核桃内生真菌g8次生代谢产物及其生物活性的研究

核桃内生真菌g8次生代谢产物及其生物活性的研究

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时间:2019-02-28

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1、西北农林科技大学硕士学位论文核桃内生真菌G8次生代谢产物及其生物活性的研究姓名:徐文涛申请学位级别:硕士专业:林产化学加工工程指导教师:翟梅枝20080501核桃内生真菌G8次生代谢产物及其生物活性的研究摘要本文从核桃根中筛选出一株真菌G8,对G8进行了内生真菌确认,证明G8是核桃内生真菌。明确了核桃内生真菌分离方法的可行性。并根据G8的菌株形态及显微结构特征,初步鉴定为葡萄壳小圆孢菌。以8种病原真菌和3种植物种子为活性实验材料,对内生真菌G8的发酵产物进行活性测定。结果表明:内生真菌发酵液对8个病原真菌都有

2、一定的抑制作用,其中对小麦赤霉和玉米大斑病原真菌的抑制率大于50%,说明发酵液中含有抑制病原真菌的活性物质。对3种植物种子进行化感试验说明:G8菌株发酵液对3种植物生长有抑制作用,其中,发酵液对芽的抑制率大小为:油菜>绿豆>萝卜;发酵液对根的抑制率大小为:绿豆>萝卜>油菜,发酵液对测试植物绿豆的抑制活性总体较强。以此把内生真菌G8作为实验菌株。对G8进行大量发酵,发酵液各萃取相进行抑菌活性,以28种病原真菌和5种细菌作为供试菌株进行活性试验,结果表明:(1)发酵液的提取物对28种植物病原真菌均有不同程度的抑制

3、作用,各萃取相粗提物在40mg.mL。1时,乙酸乙酯萃取物的抑制效果最好,其次为正丁醇萃取物,萃余物最弱,但正丁醇萃取物对水稻纹枯、杨树溃疡、小麦雪腐病原菌的抑制率大于其它两相萃取物。(2)不同浓度的乙酸乙酯萃取物对11种病原真菌进行活性实验,结果表明:对苹果轮纹、苹果腐烂、小麦根腐、稻瘟4种病原菌的抑制率为100%,不同浓度的萃取物对苜蓿炭疽、小麦赤霉、番茄早疫、苹果炭疽和玉米小斑5种病原菌的抑制率表现出极显著差异,对玉米大斑和辣椒疫霉2种病原菌的抑制率无显著差异。(3)乙酸乙酯萃取物对5种细菌的抑菌试验表

4、明,对蜡状芽孢杆菌和马铃薯芽孢杆菌2种细菌表现为抗药性,但不同浓度处理间差异不显著。以(2)的试验结果确定了菌株次生代谢物分离的部位,活性跟踪的菌种和浓度。G8发酵液乙酸乙脂萃取得31.29样品,在活性跟踪的指导下,采用硅胶柱层析,sephadeXLH.20柱层析和重结晶等手段分离得到两种化合物。通过理化性质分析和NMR分析,最终确定了其中1个化合物为胆甾醇,另外一个尚未进一步鉴定。关键词:核桃内生真菌;液体发酵;抑菌活性;胆甾醇THESECONDARYMETABoLITESANDBIOLoGICALACTI

5、VITYoFENDOPHYTICFUNGIG8FRoMWALNUTABSTRACTAn如ngusG8waSscreenIedf.romⅡler00tofwalrIut,廿leidemificationexperimentWhetllerthe如n母lsisendophytehaVebeendone,t11eresultshowedthattlle如n目lsw嬲erldophyte,andmememodseparatillgendophytef如mwalnutisfeaSible.TheworkwIlichid

6、emifiedtlleendophnella_Vebeencarriedaccordingt0tlleshapeaIldtlleckmlcterofnlicro-struc骶,andconfi珊edit嬲(0门fD咖矿f“聊.’,埘’,DMMitu:阻initially.The8stainsofpatllogen锄ld3玉【indsofpl枷w硒used嬲thematerialst0testtlleactiVit)rofmeendophyticfennentation,resultsho、Ⅳedthattll

7、efemlentationofⅡleendophyteG8hadsomeinhabitationt0the8strains,锄dtherateofiIlhabitationwasover50%t0the胁砌伽历D印D,f“所m愆fc“聊jk船锄dF协刃f“肌g阳历仂P甜姗l,it砌icatet11attllefe肌entationhaVesomecompoundstoreducenlepathogen;thef.e咖entationllade丘Iectontlle3kindsp1锄t,tlleizlhabit

8、edrateoftIlebudw嬲r印e>nmng>radis,觚dtheim【abitedrateofrootw嬲mung>radis>rape,mei11k山itedrateofmungw嬲llighestofa11.sotheendophyteG8w嬲screenedaSthematerialtosmdy.G8waSfementedl鹕ely.111eex慨tofitsfementation、

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