脂肪来源干细胞联合富血小板血浆凝胶修复皮肤软组织缺损创面的实验研究

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1、南昌大学硕士学位论文脂肪来源于干细胞联合富血小板血浆凝胶修复皮肤软组织缺损创面的实验研究姓名：廖怀伟申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：刘丽忠201206摘要目的：观察脂肪干细胞(ADSCs)联合富血小板血浆(PRP)凝胶对创面修复的影响；探讨ADSCs和PRP在创面修复中的作用。方法：取大鼠腹股沟脂肪组织，使用贴壁筛选法分离、培养ADSCs，通过三系分化法鉴定备用。取6～7周龄雄性SD大鼠30只，随机选取12只大鼠经心脏取血7～10ml／只，采用改良Appel法制备PI冲，激活后备用；对留存的全血及PI心进行血小板计数。剩余18只大鼠取背部正中两侧相距脊柱2cm处，各切除直径为2

2、cm的圆形全层皮肤。将所有大鼠随机分成3组(每组6只)，其中A组为ADSCs+PRP处理组；B组为ADSCs处理组；C组为PRP处理组。随机抽取一侧创面为试验处理创面，另一侧创面即为对照创面，将所有对照创面设定为D组；观察创面肉芽组织生长情况，以及周围炎症反应和上皮化程度。记录术后第3、7、11、15天的创面面积，计算各组各时间点创面收缩率(创面收缩率(％)=(1．现创面面积／原始创面面积)×100％)并进行统计分析；记录各组创面完全愈合时间；24天后处死各组大鼠，取创面愈合组织，HE染色观察。结果：大鼠PRP中血小板计数约为全血的5．21倍。创面完全愈合所需要的时间A组18．25+1

3、．44天；B组19，13+1．28天；C组19．72+0．87天；D组22．31+1．65天，处理组与对照组创面完全愈合时问差异有统计学意义(P<0．05)；术后3、7、1l、15天各实验处理组创面收缩率均高于对照组，差异有统计学意义(P0．05)，D组的创面收缩率最低。组织学观察结果：A组皮下腺体样结构层次分明，新生血管较正常皮肤组织多，胶原纤维排列与正常皮肤组织类似；B组

4、创面内腺体样结构较正常皮肤多，新生血管较A组少，胶原纤维排列较紊乱；C组新生毛细血管较多，腺体样结构较少，但其胶原纤维排列有序：D组新生血管形成，视野里被紊乱排列的胶原纤维填充，腺体样组织较少。结论：ADSCs联合PRP可促进皮肤软组织缺损创面愈合，且较单独使用ADSCs或PRP效果好。摘要关键词：脂肪干细胞移植；富血小板血浆凝胶；软组织缺损；创面修复。AbstractABSTRACTobjective：Toobservethewoundhealingwithplatelet—richplasma(PI冲)gelandadipose-derivedstemcelI(ADSCs)appl

5、iedontothewound；ExploretheroleofADSCsandPRPinsofttissuedefectrepairing．Methods：HarvestadiposetissuefrominguinalisfatpadofSDrats，isolation，culture，andidentificaliontheADSCsthroughthreedifferentiationmethod．Take30maleSDratsabout6-7weeksoldrandomly．Selected12ofratsbeentakebloodfromheart．Preparation

6、thePRPwithmodifiedAppelmethod．TocountplateletofwholebloodandPIUundermicroscope．Taketheremainingrats．Formedaskindefectwoundbyresectioncircularof2cmdiameterbothsidesofskinapaTtfromthecenterofthespine．Dividedtheratinto3groups(n26)randomly,ofwhichgroupAtreatment谢thADSCsandPRP：GroupBtreatmentwithADSC

7、s；GroupCtreatmentwhitPRP．SelectedonesideofskindefectwoundfortestRandomlyandtherelativesideskindefectisforcontroll，HandleallofthecontrolwoundtogroupD；Observethegrowthofgranulationtissueonthewoundsurface；observetheinflammatory