金黄色葡萄球菌分子特征及耐药相关分子标志

《金黄色葡萄球菌分子特征及耐药相关分子标志》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学校代码10459学号或申请号201212272857密级公开硕士学位论文金黄色葡萄球菌分子特征及耐药相关分子标志作者姓名：刘静导师姓名：杨海燕副教授学科门类：医学专业名称：流行病与卫生统计学培养院系：公共卫生学院完成时间：2015年4月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterMolecularcharacteristicsanddrugrelatedresistantmolecularmarkersofStaphylococcusaureusBy:JingLiuSupervisor:AssociateProf.

2、HaiyanYangEpidemiologyandBiostatisticsCollegeofPublicHealthMay，2015学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：夕’^曰期：年f月学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有

3、关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：日期：>/_]:年〈月//摘要摘要金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)是目前全球范围内引起人类感染性疾病的主要病原微生物之一，简称金葡菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistantStaphylococeusaur

4、eus，MRSA)的出现是由于甲氧西林敏感金葡菌(Methicillin-sensitiveStaphylococcusaureus，MSSA)获取了葡萄球菌盒式染色体（StaphyloccoccalCassetteChromosomemec，SCCmec）元件。成簇的规律间隔的短回文重复序列(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeat，CRISPR)是最近发现的针对噬菌体等外源基因的细菌免疫系统。目的1.了解分离的金葡菌耐药性、耐药基因分布及分子特征。2.了解郑州地区分离的金葡菌spa和MLST主要流行型别，揭示该地区金葡菌

5、分子流行病学特征。3.了解CRISPR/Cas系统的cas核心基因cas1和cas2的分布情况，初步探索金葡菌cas1和cas2与金葡菌耐药关系。方法1.采用最低抑菌浓度（MIC）对分离的金葡菌进行25种药物敏感试验。2.PCR方法扩增介导β-内酰胺类、氨基糖苷类、红霉素、四环素等药物耐药的11种耐药基因及cas1，cas2基因，并测序分析。3.多重PCR方法对MRSA进行SCCmec分型。4.PCR方法进行金葡菌spa分型，PCR产物经测序确定spa型别。PCR扩增MRSA7个管家基因，PCR产物经测序后通过查找数据库确定ST型别。5.不同菌株耐药表型、基因型以及cas1，cas2基

6、因分布以百分率描述。采用SPSS21.0软件进行统计学分析。MRSA和MSSA敏感率、耐药基因的阳性率比较以及菌株耐药表型、耐药基因型、SCCmec分型与cas1，cas2基因关联性采I摘要用χ2检验或Fisher确切检验。6.利用DNAstar7.0软件的MegAlign进行序列比对同源性分析并构建系统发育树。结果1.分离的86株金葡菌中，MRSA共28株，MSSA共58株。青霉素耐药率最高，为95.35%，耐药率大于50%的有11种。MRSA菌株对19种抗菌药物的耐药率均高于MSSA菌株。2.对86株金葡菌菌耐药基因检测，acc(6')/aph(2'')、aph(3')-III、a

7、nt(4',4")阳性率分别为100.00%、72.09%、86.05%；ermA、ermB、ermC、msrA阳性率分别为95.35%、79.07%、93.02%、58.14%；tetM、tetK阳性率为97.67%、81.40%；未检测出blaTEM；3.86株金葡菌spa分型可分为11个型别，28株MRSA的SCCmec分型共分为3个型别，MLST分为4个型别。4.86株金葡菌中有44株cas1阳性，30株cas2基因阳性。cas1基因在