金黄色葡萄球菌耐药机制与分子流行病学研究

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1、金黄色葡萄球菌耐药机制与分子流行病学研究Antimicrobialresistanceandm．olecularepidemiologyofStaphylococcusaureus研究生：张晓平专业：预防兽医学导师：吴艳涛教授扬州大学兽医学院2012年6月张晓平：金黄色葡萄球菌耐药机制与分子流行病学研究金黄色葡萄球菌耐药机制与分子流行病学研VIJ宓b。兰究熹：鬻鬟兰辨睡删导师：吴艳涛教授。一一中文摘要目的：阐明扬州及其周边地区不同来源金黄色葡萄球菌的分布状况、耐药特点及机制，了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的SCCmec基

2、因分型及各基因型的耐药特征；采用多位点序列分型(MLST)技术，探讨金黄色葡萄球菌的遗传特性，为防治金黄色葡萄球菌(尤其是MRSA菌株)感染提供依据。方法：以纸片扩散法检测金黄色葡萄球菌对不同种类抗生素的敏感性；采用PCR方法检测各分离菌株携带的耐药基因和鉴定MRSA菌株；以多重PCR方法进行分离菌株的SCCmec基因分型；通过测定7个管家基因(arcc、aroe、glpf,gmk、pta、tpi、yqil)的序列进行分离菌株的MLST分型。结果：(1)从261株金黄色葡萄球菌中检测到48个MRSA株，其中人源36株，检出率为29

3、．75％(36／121)；猪源8株，检出率为25．81％(8／31)；牛源4株，检出率为15．38％(4／26)。(2)48个MRSA菌株均具有多重耐药，对青霉素G、头孢话丁的耐药率达到了100％，对复方新诺明和四环素的耐药率分别为85．42％和81．25％。未发现耐万古霉素的MRSA菌株。213个甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)菌株对青霉素G的耐药率达到了71．36％，对红霉素和四环素的耐药率分别为44．60％署n27．70％。MRSA菌株对各类抗生素的耐药率均显著高于MSSA菌株(p<0．05)。(3)48个MRSA菌株

4、中SCCmecIII型占58．33％(28／48)，SCCmecV型占22．92％(11／48)，SCCmecⅣ型占8．33％(4／48)，SCCmecI型占2．08％(1／48)，未分型的MRSA菌株占8．33％(4／48)，未发现SCCmecII型菌株。人源MRSA菌株以SCCmecIII型为主，占77．78％(28／36)，牛源MRSA菌株全部为SCCmecV型，猪源MRSA菌株中未知型占50％。(4)对195株金黄色葡萄球菌进行MLST测序分型，共检测到42种sT型，新定义10种等位基因型、12种ST型。人源MRSA菌株主

5、要以SCCmeclII．ST239为主，猪源MRSA菌株以SCCmecV．ST9为主，牛源MRSA菌株以SCCmeclII．ST630为主。结论：(1)MRSA菌株在多种宿主体内均能检到，对多种抗生素耐药率均较高，具有多重耐药性，未发现万古霉素耐药菌株。扬州人学硕士学位论文(2)MRSA菌株的耐药率普遍高于MSSA菌株，且SCCmec盒式染色体与MRSA的多重耐药密切相关。(3)不同来源MRSA菌株在基因结构上存在差异，SCCmec基因分型技术及MLST分型技术可有效阐明MRSA菌株的流行病学特征。关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

6、；耐药机制；葡萄球菌染色体mec基因盒；多位点序列分型(MLST)张晓平：金黄色葡萄球菌耐药机制与分子流行病学研究AntimicrobialfistancendmolecularpidemiologyDialresistanceantlmolecUlareOltlemlolOoI。’StaphylococcusaureusM．S．candidate：XiaopingZhangAdvisor：Prof．Yantao缪幻Abstract3一Objective：Methicillin—resistantStaphylococcusaur

7、eus(MRSA)isallimportantmultidrug—resistantpathogenthatisfoundthroughouttheworld．Inthisstudy，adiversecollectionof261Saw·eusisolatesfromhuman，animal，foodandenvironmentalsourceswerescreenedusinggenotypicandphenotypicmethodstoinvestigatetheprevalenceofmethicillin．resistan

8、tSaureus(MRSA)isolatesbasedontheexpressionofthestaphylococcalcassettechromosomemec(SCCmec)，夕-lactamaseandotherresistancegene