双斑侧沟茧蜂病毒调控寄主核转录因子nf-κb和翻译起始因子eif4f

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时间:2019-03-20

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1、分类号密级编号碛士研究營位恰夂题目双斑侧沟茧蜂病毒调控寄主核转录因子和翻译起始因子学院(所、中心)生命科学学院专业名称动物学研究生姓名于东帅学号导师姓名罗开捃职称研究员导师姓名胡建生职称教授年月论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,不存在剽窃或抄袭行为。与作者一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。现就论文的使用对云南大学授权如下:学校有权保留本论文(含电子版,也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文;学校有

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3、相结合,从而调控信号通路,实验发现转录信号通路被抑制后,下游的会被下调,导致寄主的相关蛋白特别是免疫蛋白的表达翻译受限,从而达到抑制寄主免疫反应的目的。本研宄通过斜纹夜蛾血淋巴转录组数据,从中找到了,,和序列,从双斑侧沟苗蜂的多分病毒基因组数据中找到,和序列,通过保守结构域预测确定,和家族都具有结构域,证明了它们结构的相似性。构建了包含全长编码区的原核表达载体及真核表达载体,经证明均可在大肠杆菌及鳞翅目昆虫细胞系中的表达。并通过免疫荧光定位确定蛋白表达位置以及对细胞骨架的影响。提取了被双斑侧沟茧蜂寄生后天的斜纹夜蛾血淋巴,以及病毒粒子感染个小时的细胞的

4、逆转录为,用实时荧光定量检测了基因,,斯在的表达量。提取到天被寄生的斜纹夜蛾血淋巴的蛋白,通过购买特异性抗体检测其在寄生之后的表达情况,发现复合体的表达均有下调。而后又检测了家族在斜纹夜蛾血淋巴,神经,脂肪体,中肠,卵巢和精巢中的表达分布,发现在卵巢和脂肪体中高表达,说明在免疫反应和斜纹夜蛾生殖中起到重要作用。同时发现与之间存在紧密联系。关键词:多分病毒;免疫抑制;核转录因子;真核翻译起始因子AbstractAbstractMicroplitisbicoloratuscarriespolydnavirus,Itispredominantlyexpres

5、sedinvivotosuppresshostimmuneresponsesbypolydnavirus.Ininvertebrates,NF-kBsignalingpathwaytranscriptionissuppressedbyPDV.BecauseIicB-likegenes(Vankyrin)structureissimilarwithDorsal.ItcaneffectivelycompetewithCactus,combinedwithDorsal.InhibitionofNF-kBsignalingpathway,Itfoundthat

6、aftertheNF-kBtranscriptionsignalingpathwayisinhibited,thedownstreameIF4Fwillbereduced.Therebyinhibitingtheimmuneresponseofthehost.Inthisstudy,wegotRelish,DorsalfCactusandeIF4FSequencesfromtheSpodopteraliturahemocytestranscriptom.AlsogotVankyrin86sVankyrin92andVankyrinlOlSequence

7、sfromtheMicroplitisbicoloratuspolydnavirusgenomedata.DeterminedbytheconserveddomainsofRelish,CactusandVankyrinfamilyhaveANKdomains,,,,,目录目录巾錢!弓胃昆虫的先天免疫研究在昆虫免疫抑制中的作用信号通路信号通路在细胞凋亡中的研究信号通路在昆虫细胞凋亡中的研究概况翻译启始因子的组成以及在免疫抑制中的作用本研究的目的与意义材料与方法簡斜纹夜蛾双斑侧沟革蜂昆虫细胞质粒和受体菌株限制性内切酶及其他酶类试剂盒及抗体其他主要试剂培养

8、基缓冲液主要设备施目的基因的克隆载体的构建质粒的提取(普通用)原核表达质粒构建流程示意图真核表

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