牡丹泛素延伸蛋白基因ubiquitin克隆及其作为内参基因的研究

《牡丹泛素延伸蛋白基因ubiquitin克隆及其作为内参基因的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、园艺学报，2015，42(10)：1983–1992.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0180；http：//www.ahs.ac.cn1983牡丹泛素延伸蛋白基因ubiquitin的克隆及其作为内参基因的研究1,22,*2221,**2,**刘传娇，王顺利，薛璟祺，朱富勇，任秀霞，李名扬，张秀新12（西南大学园艺园林学院，重庆市花卉工程技术研究中心，重庆400715；中国农业科学院蔬菜花卉研究所，农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室

2、，北京100081）摘要：以牡丹品种‘洛阳红’（Paeoniasuffruticosa‘Luoyanghong’）为试验材料，采用RT-PCR方法获得一个牡丹泛素延伸蛋白基因Psubiquitin（PsUBI），其cDNA开放阅读框（ORF）长度为447bp，编码148个氨基酸，GenBank登录号为KP742952。序列比对发现，该基因与其他23种植物泛素延伸蛋白核苷酸序列的相似性均在81%以上，氨基酸序列的相似性达96%。进化分析表明，牡丹泛素延伸蛋白与棉花泛素延伸蛋白的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示，在牡

3、丹不同组织器官中，相对于其他5个常用看家基因（GAPDH、GAPDH1、tubulin、tubulin2、18SrRNA），ubiquitin的PCR扩增曲线的CT值最为恒定，尤其是在不同花器官中的CT值完全一致。进一步分析发现该基因在牡丹的根、茎、叶片、花、雄蕊和心皮组织中均恒定表达，特别是花器官中的表达量几乎完全一致。以ubiquitin作为内参基因探讨控制花器官发育的基因PsAG的表达情况，结果显示PsAG的表达模式与其作用位点相吻合，ubiquitin更适宜作为牡丹花器官研究的内参基因。关键词：牡丹；ubiqui

4、tin；基因克隆；表达分析；内参基因中图分类号：S685.11文献标志码：A文章编号：0513-353X（2015）10-1983-10MolecularCloningofUbiquitinProteinGeneandStudyonThisGeneasReferenceGeneinTreePeony1,22,*2221,**LIUChuan-jiao，WANGShun-li，XUEJing-qi，ZHUFu-yong，RENXiu-xia，LIMing-yang，2,**andZHANGXiu-xin1（Collegeo

5、fHorticultureandLandscapeArchitecture，SouthwestUniversity，ChongqingEngineeringResearchCenterfor2Floriculture，Chongqing400715，China；KeyLaboratoryofBiologyandGeneticImprovementofHorticulturalCrops，MinistryofAgriculture，P.R.China，InstituteofVegetablesandFlowers，Chin

6、eseAcademyofAgriculturalSciences，Beijing100081，China）Abstract：Oneubiquitinproteingenewasobtainedfromtreepeony（Paeoniasuffruticosa‘Luoyanghong’）byRT-PCR.ItwasdesignatedasPsUBIandtheGenBankaccessionnumberwasKP742952.Theopenreadingframe（ORF）ofPsUBIwas447bp，andcoulde

7、ncode148aminoacids.收稿日期：2015–05–07；修回日期：2015–10–08基金项目：国家自然科学基金项目（31501800，31572156）；国家公益性行业（农业）科研专项（201203071）；国家‘863’计划项目（2011AA10020703）；中国农业科学院科技创新工程项目（CAAS-ASTIP-IVFCAAS）；中国农业科学院院所基金项目（1610092015002-01）*共同第一作者**通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：limy@swu.edu

8、.cn；zhangxiuxin@caas.cn）LiuChuan-jiao，WangShun-li，XueJing-qi，ZhuFu-yong，RenXiu-xia，LiMing-yang，ZhangXiu-xin.Molecularcloningofubiquitinproteingeneandstudyonthi