陆地棉耐盐相关基因GhERF79的克隆与分析

《陆地棉耐盐相关基因GhERF79的克隆与分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、棉花学报CottonScience2013袁25渊2冤院95~102陆地棉耐盐相关基因79的克隆与分析*王洁琳袁邹长松袁陆才瑞袁王巧莲袁宋国立渊中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室袁河南安阳455000冤摘要院利用RACE-PCR技术克隆陆地棉ERF基因的全长cDNA袁命名为79袁该cDNA长度为980bp袁含有一个完整的ORF渊Openreadingframe冤为756bp袁编码251个氨基酸的多肽曰亚细胞定位显示该基因表达产物定位于细胞核中袁生物信息学分析表明79属于ERF转录因子家族内的A-1亚族遥Real-timePCR分析结果表明袁79

2、的表达受盐胁迫和植物激素诱导袁该基因在耐盐材料中9806中的诱导表达水平显著高于盐敏感材料中棉所12曰外源激素ABA渊Abscisicacid冤尧ET渊Ethylene冤尧MeJA渊Methyljasmonate冤可以显著诱导79的表达袁推测其可能在棉花响应盐胁迫途径中发挥重要功能遥关键词院陆地棉曰盐胁迫曰79曰ERF曰克隆中图分类号院S562.035.3文献标志码院A文章编号院1002-7807(2013)02-0095-08WANGJie-lin,ZOUChang-song,LUCai-rui,WANGQiao-lian,SONGGuo-li*渊45500

3、0,冤Inthisstudy,thefull-lengthcDNAsequenceof79wasisolatedfrombyRACE-PCR,itslengthis980bp,andithasanopenreadingframe(ORF)of756bpencodingaproteinof251aminoacidswhichwaslocatedinnucleusbysubcellularlocalizationexperiment;Bioinformationanalysisrevealedthat79belongedtoA-1subgroupofERFsubf

4、amily;Expressionpatternanalysisrevealedthattheexpressionof79wassignificantlyinducedbysaltstressandplanthormonesABA,ET,andMeJA,furthermore,theinducedexpressionlevelinsalt-tolerancegermplasmZhong9806()wasconsiderablyhigherthanthatinsalt-sensitivecultivarCCRI12().Theevidenceabovesugges

5、tedthat79mightplayanimportantroleinregulatingcottonsaltstressresponses.;salt-stress;79;ERF;clone[2]植物在整个生长发育过程中会受到各种逆乙烯应答曰该产物被命名为EREBP渊Ethylenere-境胁迫的影响袁导致其产量的损失和品质的降sponsiveelementbindingprotein冤袁后来通常称为低袁其中盐胁迫是自然界中主要的逆境胁迫之ERFs渊Ethyleneresponsivefactors冤遥根据结合顺式一遥棉花是一种耐盐性较强的作物袁挖掘其耐盐作

6、用元件的不同将ERF家族进一步分为ERF亚[3]相关基因袁研究其调控机制袁对棉花耐盐育种有家族和DREB亚家族遥着重要的作用遥陆地棉TM-1作为标准系袁基因纯ERF转录因子可以特异结合GCC-box渊GC-[4]合袁性状稳定袁常常作为育种和遗传研究的背景CGCC冤袁调节植物抗病基因的表达曰DREB可以材料遥ERFs是一种乙烯应答转录因子袁在植物胁特异结合DRE/CRT顺式作用元件渊A/GCC-[1][5]迫应答调控途径中有着重要的作用遥1995年袁GAC冤袁激活受干旱和冷害诱导的基因表达遥对[6]Masaru等首次在烟草中发现了4个新的cDNA袁烟草中的1尧2

7、和3袁番茄中[7]其产物既可以和GCC-box特异结合袁又可以响应的4袁5和6袁拟南芥中的AtERF1和收稿日期院2012-05-30作者简介院王洁琳(1987-)袁女袁硕士研究生袁wjlrains1987@yahoo.com.cn曰*通讯作者袁sglzms@163.com基金项目院国家野973冶计划资助项目渊2011CB111511)96棉花学报25卷[8][9][10][11]5袁棉花1尧4和5柱式RNA提取试剂盒和柱式RNA纯化试剂盒的相关研究袁显示它们的表达多数会受激素和环提取各组织中的RNA遥根据79设计特异境胁迫诱导遥植物激素信号转导途径对调控植物

8、性引物SP1尧SP2袁以RNA为模板袁