实验四尿液理化及显微镜检查

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时间:2019-05-11

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1、实验三尿液分析尿液一般检查尿液理学检查:尿色通明度比密尿液化学检查:酸碱度蛋白糖定性尿液显微镜检查:细胞管型结晶要求:掌握尿液的常规检查;掌握各种实验的基本原理,会按规程操作;镜下能识别常见有形物;能观察和判断各项实验的正常和异常结果一、尿液的理学检验1尿液颜色:直接倒入试管观察报告方式:书明尿液色泽及深度,如淡黄色,深黄色,乳白色等新鲜尿液为淡黄色;可呈现不同黄色,受到饮水,季节,生理,药物,病理等因素影响。如血尿分为镜下,肉眼。棕色,咖啡色可能是肾前疾病,而血块、红色则为下尿道感染。2尿液透明度:报告方式:清晰透明、微混、混浊,若有凝块等亦需注明正常尿液

2、:淡黄色清晰透明3尿液比密:比密计悬浮法操作:将比密计轻轻放入已盛尿液(2/3高度)的比密筒中,并加以捻转,使其垂直悬浮于尿液中,待比密计平稳后,读取与尿液凹面相切的刻度。成人:1.003~1.030注意:尿液沿比密筒壁缓慢加入,不要产生气泡二、尿液化学检验1pH值:尿试带法/PH试纸正常范围4.5~8受到药物、疾病等影响,pH降低:酸中毒,肾小球肾炎,痛风等。pH升高:尿路感染,呼吸性碱中毒等。2尿蛋白定性1)加热乙酸法原理:加热可使蛋白变性凝固,然后加醋酸使得尿液的pH接近蛋白质的等电点,有利于蛋白质下沉。操作:2/3试管尿液,用试管夹夹住试管底部,倾斜

3、试管使上1/3尿液处煮沸,加5%乙酸2d~3d,再加热至沸腾,观察结果。结果判断:清晰-黑色背景下轻微浑浊+/-明显浑浊无颗粒+明显浑浊有较多颗粒++大量絮状物有部分沉淀+++絮块状大量沉淀++++评价:最为经典也最为准确的尿蛋白定性方法。特异性强2)磺基水杨酸法原理:磺基水杨酸在略低于蛋白质等电点的酸性环境下,其阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合,生成不溶性的蛋白盐而沉淀。操作:试管2支,各加1ml尿液,一管对照另一管加20%磺基水杨酸0.1ml,轻轻混匀1min后观察结果。结果判断:与对照管通明度一致-黑色背景下轻微浑浊+/-不加黑色背景可见浑浊但无颗粒+

4、明显浑浊并出现颗粒++浑浊更明显出现絮状物+++严重浑浊出现大量絮块++++评价:敏感,假阳性率高,适用蛋白尿的筛选。3糖定性试验:班氏试验原理:葡萄糖含有醛基,在热碱性溶液中,能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氧化亚铜,进而生成红色氧化亚铜沉淀。操作:1ml班氏试剂,加热试管底部,煮沸,观察,再加尿液0.1ml,继续煮沸1~2min,冷却后观察结果。结果判断:蓝色不变-蓝中略带绿无沉淀+/-绿色有少许黄绿色沉淀+较多黄绿色沉淀++土黄色浑浊大量沉淀+++大量红棕/砖红色沉淀++++评价:方法稳定,缺乏特异性。三、注意事项1、尿蛋白(1)尿pH尿液偏碱时(

5、pH>9.0)可使加热乙酸法,磺基水杨酸法呈假阴性,而使干化学试带法呈假阳性;尿液偏酸(pH<3)也会引起蛋白定性假阴性。因此,实验前需先将尿液pH调至5.0-6.0。(2)离子强度尿液离子强度很低时,可使加热乙酸法呈假阴性。因此对于限盐或无盐饮食的病人使用本法进行尿蛋白定性时,需滴加饱和氯化钠溶液1一2滴后再进行检查。(3)药物药物不仅影响磺基水杨酸法蛋白定性结果,对于化学试带法也会产生干扰。当病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时,容易使磺基水杨酸法出现假阳性;而使化学试带法呈假阴性。(4)标本的污染当尿中混有生殖道分泌物时,可使定性出现

6、“假”阳性,为此很有必要指导病人清洁尿道口采集中段尿,或离心后测定上清液。(5)在规定时间内判读结果加热乙酸法和磺基水杨酸法都要求立即观察结果。2、尿糖(1)标本留取根据临床需要留取清晨空腹尿或餐后2h尿。(2)容器清洁不含氧化性物质,否则易导致班氏法假阴性而试带法假阳性。(3)及时送检标本不宜长时间存放,以免细菌繁殖造成假阴性结果。(4)干扰因素及处理(a)尿中尿酸、水杨酸盐等,可使班氏定性出现假阳性;而高浓度的VitC使试带法呈假阴性。(b)蛋白尿影响班氏法的检查结果,应加热除去。(c)其它还原性糖类会使班氏法定性结果高于试带法,此时按试带法结果报告。镜

7、检标本制作:取新鲜尿标本10~15ml,以1000~1500rpm离心3~5分钟,取出离心管,用吸管慢慢将上清液弃掉,切勿弄混沉渣,最终留取0.2ml,混匀后滴在载玻片上,用18mm×18mm盖玻片镜检。镜检:观察时先用低倍镜观察有形成分全貌和管型,然后用高倍镜鉴定细胞成分,细胞用高倍镜观察10个视野,管型用低倍镜观察20个视野,记录结果手工制片镜检参考值WBC<5个/HPFRBC<3个/HPF扁平上皮或大圆上皮细胞少许/HPF通明管型偶见/LPF细胞1.尿红细胞正常人尿中排出红细胞数量甚少,24h尿中排出红细胞数多不超过100万。在新鲜标本沉渣中,典型的红

8、细胞形态呈两面凹的圆盘形,淡黄色;在低渗的环境下,红

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