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《稀土离子荧光及其在免疫分析和核酸探针中的应用_陈泮藻》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、《免疫学杂志》年第卷第期稀土离子荧光及其在免疫分析和核酸探针中的应用‘陈伴藻史华红李振甲解放军总医院基础所生化室北京,铺。稀土离子特别是衫械光波长不同荧光寿命也不同可根据这两个’。,,摘能发出强的荧光由于激光特点选择适当的延缓测量时间配以不同的,,,技术的发展自六十年代起人们对稀土离子滤光片能很精确地测量混合物中不同稀土,。的荧光进行了深入的研究弄清了稀土离子离子的含量荧光机理、荧光特点和影响因素。近年来,国二、在免疫分析中的应用放射免疫分析法是目前最常用的方法。内外学者把稀土离子的
2、荧光应用到生物学和,,,,医学的研究上为稀土的应用提供了广阔的其灵敏度高特异性强但有放射性危害受。,前景半衰期限制所以人们致力于研究非同位素。,,一、稀土离子的荧光特点标记法酶标记法较为安全但酶不稳定致。,。游离的稀土离子的荧光是相当微弱的使检测灵敏度低可检测的标准曲线范围窄一,,当稀土离子与有机配位体如二酮类芳香普通荧光标记法受本底荧光干扰大荧光易,碎灭。稀土离子荧光,拨酸类形成配合物时产生分子内能量传具有独特的优点用它作‘,。,,递使稀土为标记示踪物再配以时间分辨荧光测量仪离子的荧光强度显著增强当加、、、,,,入斓乍馆或忆等离子时产生分子间能量能显
3、著提高分析灵敏度标准曲线范围宽而,,·,〔,’〕”‘且无放射性危害传递使离子和离子的荧光增标记技术容易掌握标记物。。强一个数量级稳定性好解离增强法荧光光谱分为两部分激发光谱和发射。十光谱普通物质的荧光光谱位移较用双功能试剂把离子鳌合到免疫、,。。,小如荧光素的位移为通常样品上抗原抗体或亲和素当免疫反应完,,,成后用增强溶液把离子解离下来组激发光谱和发射光谱有部分重叠互相影响。,,成新的鳌合物并增强其荧光强度为了提高严重而且干扰因素多荧光寿命短小于,一,。易碎灭稀土离子的荧光光谱具有
4、较检测的灵敏度常常利用生物素链亲和素一,的放大作用此法的最大的位移发射光谱和激发光谱不会,,,一不能使相互重叠例如甲的最大激发波大特点是双功能试剂只起赘合作用,,。,长为最大发射波长为其离子的荧光增强因需外加增强溶液,,。位移达发射光谱峰范围相当若操作不当易污染样品影响测定结果但,,窄小于特异性很强荧光寿命为这个方法应用相当普遍灵敏度也较高丫,,一,。’‘一。娜甚至更长比普通的荧光寿命高几重复性好个数量级。检
5、测时,采用适当的时间延缓,可直接浏量荧光度法、,非常显著地降低来自散射光样品的本底荧鉴于解离增强法样品易受污染人们设。光的干扰。此外,不同的稀土离子,最大发射法避免加入增强溶液广州中山大学化学系博士生《免疫学杂志》年第卷第期十离子的标记法通过双功能鳌双标记法,一,汇‘合剂卜双氯化苯酚磺酸盐仆菲锣离子和离子的双标记,“十琳标记到抗原或抗体上当抗原与用离子和离子分别标记人血清中,。抗体产生特异性的免疫反应达到动态平衡和两种激素的单克隆抗体当免疫,,,,,
6、以后再加入适当的离子与免疫复合反应后加入增强液内含,一,,物中的!∀形成新的荧光鳌合物直接一的醋酸缓冲液使。一、,测量其荧光引入生物素链亲和素体系能提,离子离子洗脱下来在不同的条。’十、’。高检测灵敏度整个过程不用外加件下分别测量离子离子的荧光,,。增强溶液操作非常方便目前国外已制成药测量结果见表摧圣〔〕、,离子标记法用双功能鳌合表双标记和灵敏度对比一剂二乙三胺五乙酸对氨基水杨酸!、。,
7、标记到抗原抗体当免疫反应后再加、小,,,入适当的离子测量其荧光而无须预,,先制备标记物简化了操作步骤但灵,、,「’〕敏度有待提高。离子共发光双标记用,、,上离子分别标记和的单述两种方法的主要特点是双功能试,,,。克隆抗体因为共发光对值要求严格所剂既起鳌和作用又起传递能量作用当免疫,、,反应完成后才加入稀土离子避免样品的污以把增强液分成两部分件二酮体离、一,,染间题。子一一醋酸缓冲液这、共发光法部分主要使
8、离子
