第十九章 真菌

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1、真菌郭庆合真菌(fungus)也称eumycota,来源于拉丁文fungus,即蘑菇。真菌自成一界,为真核细胞型微生物,它具有典型的细胞核,不含叶绿素,营养方式为吸收,无吞噬作用,营腐生、寄生、共生和超寄生生活。细胞壁含几丁质和B-葡聚糖。有完善的细胞器,有呼吸作用,能进行有性生殖和(或)无性繁殖。它与原核型微生物有许多不同点。表19-1原核细胞型微生物与真核细胞型微生物的比较细胞核结构原核细胞型微生物真核细胞型微生物核膜无有核仁无有分裂方式主要二分裂分丝分裂、减数分裂细胞质结构质膜常缺乏固醇常有固醇内

2、膜较简单,有中介体复杂,有内质网和高尔基体核糖体70S80S呼吸系统质膜或中介体线粒体人致病的真菌分为四类:病原性真菌、条件致病性真菌、产毒真菌及致癌真菌。真菌发病率,近年明显上升趋势,特别是条件性致病真菌更为常见,这于临床滥用抗生素、经常应用激素及免疫抑制剂、抗癌药物导致机体免疫功能下降有关。真菌的形态特性:真菌按形态分为单细胞和多细胞两大类。单细胞真菌呈圆形或卵圆形,如酵母菌和类酵母菌,以出芽方式繁殖,对人致病的主要有新生隐球菌和白假丝酵母菌。多细胞真菌有菌丝和孢子,菌丝伸长分支,交织成团,称丝状菌

3、,又称霉菌,对人致病的有皮肤癣菌等。有些真菌因环境条件改变,可有一重形态转变为另一种形态,此真菌称为二相性真菌。真菌的菌落特性:1、酵母型菌落,是单细胞真菌的菌落,形态与一般细菌菌落相似,但较大些,菌落表面光滑、湿润、柔软、边缘整齐,如新生隐球菌,有部分单细胞真菌,可在培养基中形成假菌丝伸入培养基中,此菌落称酵母型菌落,如白假丝酵母菌。2、霉菌菌落是多细胞真菌的菌落,菌落呈棉絮状、绒毛状、粉末状,并产生不同的色素,如皮肤癣菌。真菌的检验方法:类同细菌检验,真菌的检验方法包括:1.直接镜检细菌形态2.抗原

4、检测3.真菌的分离培养与鉴定4.真菌核酸检测及真菌毒素检测等显微镜检验:直接镜检对真菌的诊断较细菌更为重要。许多标本不需染色即可直接镜检.如癣病标本多用KOH湿片检查法,即取病变或病损部位、皮屑、甲屑置于载玻片,加一滴10%KOH液然后加盖玻片微微加热,使标本组织溶解透明,在显微镜下可观察到真菌的孢子和菌丝。显微镜检验:有些真菌标本需要做染色观察,常用的染色方法有乳酸酚棉兰染色、瑞氏染色、革兰染色、美蓝染色、荧光染色还有墨汁负染色。如革兰染色后,真菌孢子呈革兰阳性。检测病人脑脊液标本中的新生隐球菌,需要

5、做墨汁负染色后检查,背景为黑色,新生隐球菌和荚膜不着色。直接镜检简便、快速。培养基培养一般采用葡萄糖蛋白胨琼脂,即沙氏琼脂、PH4.0-6.0一般细菌不宜生长。许多病原性真菌如白假丝酵母菌在血琼脂上生长良好,二相性真菌常使用营养更丰富的脑心浸液琼脂。培养方法:平皿培养法、大试管培养和玻片培养等。分离培养:培养温度:28摄氏度,但深部真菌为37摄氏度,对二相性真菌培养时,28摄氏度培养真菌呈菌丝相(霉菌型),37摄氏度培养为组织型(酵母型)。观察菌落生长情况是鉴别真菌的主要方法之一。真菌的生化反应:试验方

6、法同细菌试验。分离培养:病原性真菌深部真菌感染深部真菌感染是指能侵袭深部组织和内脏及全身的真菌,主要有假丝酵母菌、隐球菌、曲菌、毛霉、组织胞浆菌和卡氏肺孢菌等,其中以隐球菌感染较常见。组织胞浆菌为二相性真菌,假丝酵母菌、曲霉菌、毛霉和卡氏肺胞菌等为条件致病菌,只有在一定条件,才引起机体致病。一、假丝酵母菌假丝酵母菌(Candida),俗称念珠菌,生物学分类为半知菌亚门,半知菌纲,隐球菌目、假丝酵母菌为最常见的致病菌。临床意义白假丝酵母菌通常存在与人的口腔、上呼吸道和阴道粘膜上,当机体发生菌群失调或抵抗力

7、降低时,可引起各种念珠菌病。可引起阴道炎、外阴炎、龟头炎、包皮炎。白假丝酵母菌可引起体质虚弱婴儿的鹅口疮。引起肠炎、肺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿,长期用静脉内导管引起全身假丝酵母菌病,病死率极高。白假丝酵母菌引起的皮炎白假丝酵母菌引起的粘膜白斑微生物特性:白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形,直径3-6UM。革兰阳性,着色不均匀。出芽方式繁殖,在组织内可见芽生孢子,假菌丝,在玉米粉培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子。白色念珠菌革兰染色镜下形态微生物检验标本直接检查(1)直接显微镜检查:取脓汁,痰和

8、局部炎性分泌物直接涂片,革兰染色后镜检,显微镜下见到革兰阳性、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝,可确认假菌丝酵母菌感染。(2)、抗原检测(3)、核酸检测分离培养:将标本接种在沙氏培养基上,25摄氏度或37摄氏度培养1-4天后,培养基表面可出现奶油色类酵母型菌落。白色念珠菌在沙氏培养基上的菌落特征鉴定镜检可见假菌丝及芽生孢子。此外还可以用芽管形成试验、厚膜孢子形成试验、糖同化和发酵试验进行鉴定。药物敏感试验:对二性霉素B、5-FC等药物敏感,但

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