结核分枝杆菌.ppt

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1、结核分枝杆菌10/16/20211分枝杆菌属Mycobacterium一类直或微弯曲的杆菌,有分枝生长趋势,可呈丝状或菌丝样生长。细胞壁脂质含量高(分枝菌酸),耐酸,抗酸染色阳性。对氧和营养要求高,生长慢。不产生毒素和侵袭酶类,引起慢性疾病。又称抗酸杆菌(acid-fastbacillus)---不易着色,可抵抗盐酸酒精的脱色作用分类属放线菌科,本属有80多种,可分三类:结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。细菌的DNAG+Cmol%为62-7010/16/20212临床标本抗酸染色+L-J分离培养+>7天+<7天缓生菌速生菌PNB+--T2H++-非典型分枝杆菌人型结核分枝杆菌牛型分

2、枝杆菌光反应性试验光产色菌暗产色菌不产色菌分枝杆菌的鉴定程序10/16/20213结核分枝杆菌一、分类结核分枝杆菌(MycobacteriumTuberculosis,TB)复合群:人结核分枝杆菌(M.tuberculosis)牛分枝杆菌(M.bovis)非洲分枝杆菌田鼠分枝杆菌10/16/20214二、细菌特性形态染色TB菌细长略弯曲,有时可见分枝,呈单、成堆或成束排列,无鞭毛、无芽胞,有荚膜。可出现多形性,在陈旧的病灶和培养物中,形态常不典型,可呈颗粒状,串球状,短棒状,长丝形等。TB菌革兰染色阳性。荧光染料金胺O染色,在荧光下菌体呈橘黄色。萋~尼氏抗酸性染色法染色,菌体染成红色。10/

3、16/2021510/16/2021610/16/2021710/16/2021810/16/2021910/16/20211010/16/202111培养特性专性需氧菌,3%-5%的CO2能促进生长。最适ph6.5~6.8,最适温度为37℃,低于30℃难生长,营养要求高,在含有蛋黄、马钤薯、甘油和天门冬素等的固体培养基上才能生长,且生长缓慢。固体培养基---典型菌落为干燥、坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或淡黄色,形似菜花样。液体培养基---生长较快呈粗糙皱纹状菌膜生长,有毒株可呈索状生长(吐温干扰)。10/16/202112菜花样菌落10/16/202113生化反应生化不活泼。不发酵糖类,多数

4、菌株触酶阳性,热触酶阴性,非结核分枝杆菌正好相反。结核分枝杆菌烟酸和硝酸盐试验阳性,耐噻吩-2-羧酸肼(T2H),牛型则相反。有毒株中性红试验阳性。变异性TB菌易发生形态、菌落、最适生长温度、毒力和耐药性的变异。如卡介苗、Much颗粒和多重耐药菌株出现等。10/16/202114抵抗力TB菌细胞壁含大量脂类,抵抗力较强干痰中存活6-8个月,粘附尘埃上保持传染性8-10天。3%HCL或4%NaOH、6%H2SO4溶液中能耐受30分钟常以酸碱中和处理严重污染的检材,杀死杂菌和消化粘稠物质,提高检出率对一定浓度的孔雀绿有抵抗力。对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。(如在液体中加热60℃30分钟,直射日

5、光下2~3小时,75%酒精内数分钟即死亡。)10/16/202115三、临床意义TB菌引起结核病。对人类致病的有人结核分枝杆菌、牛型结核杆菌和非洲分枝杆菌,人型结核杆菌感染引起的发病率最高。成为全球性重大公共卫生问题。所致疾病TB菌的致病作用可能是细菌在细胞内增殖引起炎症反应,以及诱导机体产生免疫反应性损伤有关。通过呼吸道、消化道和破损的皮肤粘膜进入机体,侵犯多种组织器官,引起相应器官,其中以肺结核最常见。可分原发感染和继发感染。免疫性TB菌的感染率很高,发病率却较低,这表明人体感染结核杆菌可获得一定的抗结核免疫力,这种免疫称为有菌免疫或传染性免疫。TB菌的免疫原rRNA和变应原结核菌素诱发

6、机体产生由T淋巴细胞介导细胞免疫反应。10/16/202116致病物质1.脂质-脂质占菌体干重的20~40%,占胞壁干重的60%。①磷脂:能刺激单核细胞增生,并可抑制蛋白酶的分解作用,使病灶形成干酷样坏死。②索状因子:是分枝菌酸与海藻糖的复合物,具有破坏细胞线粒体膜,毒害微粒体酶类,抑制中性粒细胞游走和吞噬作用,引起慢性肉牙肿。具有该物质的TB菌毒株,在液体培养基中能紧密粘成索状。③蜡质D:是一种肽糖脂与分枝菌酸复合物,能引起迟发型变态反应,并具有佐剂作用。④硫酸脑苷脂:TB菌毒株胞壁中含有,能抑制吞噬细胞中的吞噬体与溶酶体融合,使结核杆菌在细胞内存活。10/16/202117致病物质2.荚

7、膜-主要为多糖,少量脂质和蛋白质。①粘附和入侵②分解物质提供营养③防止有害物质入侵3.蛋白质-TB菌菌体内都含有数种蛋白质,其中重要的蛋白质是结核菌素。结核茵素与蜡质D结合,能引起较强的迟发型变态反应。其他蛋白质可引起机体产生相应的抗体,但无保护作用。10/16/202118四、微生物学检验临床标本涂片检查       分离培养     核酸检测  抗体检测直接涂片 集菌涂片  处理标本或无污染标本染色   

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