实时荧光定量PCR技术在转基因大豆A5547-127检测中的应用-论文.pdf

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1、第44卷第7期东北农业大学学报44(7)：6-102013年7月JournalofNortheastAgricuhuralUniversityJuly2013网络出版时间2013—7—1118：45：44[URL]http：／／www．cnki．net／kems／detail／23．1391．S．20130711．1845．012．html实时荧光定量PCR技术在转基因大豆A5547—127检测中的应用仇有文，张明辉，于艳波，王傲雪，高学军，敖金霞，袁肖寒，刘营(东北农业大学生命科学与生物技术研究中心

2、，哈尔滨150030)摘要：采用实时荧光定量PCR技术检测耐除草剂转基因大豆A5547—127，并对检测方法的精确度和准确度指标进行评估，分析检测方法的特异性和适用性。结果表明，定量PCR检测方法的LOD和LOQ分别是1和l0copies·I『，检测方法试验得到的所有偏差值均在允许范围之内，表明建立的定量PCR检测方法能够为转基因大豆A5547—127提供科学的定量检测依据，为转基因作物的鉴定、检测提供新方法。关键词：大豆；实时荧光定量PCR；A5547—127；定量检测中图分类号：$565．1文献标

3、志码：A文章编号：1005—9369(2013)07—0006—05仇有文，张明辉。于艳波，等．实时荧光定量PCR技术在转基因大．EA5547-127检测中的应JEf[J]．东北农业大学学报，2013，44(7)：6-1O．QiuYouwen，ZhangMinghui，YuYanbo，eta1．Applicationofreal-timePCRtechniqueindetectionofgeneticallymodifiedsoybeanA5547-127[J]．JournalofNo~heastAg

4、riculturalUniversity,2013，44(7)：6-10．(inChinesewithEnglishabstract)Applicationofreal-timePCRtechniqueindetectionofgeneticallymodifiedsoybeanA5547-127／QlUYouwen，ZHANGMinghui，YUYanbo，WANGAoxue，GAOXuejun，AOJinxia，YUANXiaohan，LIUYing(LifeScienceandBiotechni

5、queResearchCenter,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030，China)Abstract：Inthisstudy，rea1．timePCRwasusedtodetectherbicidetolerantgeneticallymodifiedsoybeanA5547．127．Thedetectionaccuracyandaccuracyindicatorsofthismethodwereassessed，andthespecificity

6、ofthedetectionmethodandapplicabilitywereanalyzed．TheresultsshowedthattheLODandLOQofthisquantitativePCRmethodwere1and10copies·UL。。，respectively．Andallthedeviationswerewithinthepermissiblerange．ItindicatedthatthisquantitativePCRdetectionmethodcouldprovide

7、scientificbasisforgeneticallymodifiedsoybeanA5547·127quantitativedetection，andalsooferedanewdetectionandidentificationmethodforGMOs．Keywords：soybean；rea1．timePCR；A5547--127；quantitativedetection随着转基因技术的应用和发展，转基因新品同时，也带来食品安全和环境安全问题伫。因种不断涌现。据国际农业生物技术应用服务组

8、织此，加强转基因作物及其产品的监督和管理尤为重(ISAAA)统计Ⅲ，截止2012年全球转基因作物种植要。如何快速、准确、科学地对样品进行转基因鉴面积已达1．7亿hm。转基因作物在解决粮食危机定，是当前转基因检测行业面临的关键问题H。转收稿日期：2013—04—02基金项目：转基因生物新品种培育重大专项(2011zxO8O04—002—002—0o4)；哈尔滨市科技创新人才专项资金项目(2010RFQXN101)作者简介：仇有文(1979一)，男，助理研究