豆粕发酵法产大豆多肽的发酵条件优化-论文.pdf

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1、2013年第11期中国饲料亘相筮酵产大豆多瞅曲美酵葵佴优化内蒙古农业大学动物科学学院王哲奇齐景伟安晓萍王伟伟内蒙古斯隆生物技术有限责任公司陈大勇仝宝生【摘要1试验以枯草芽孢杆菌CGMCC1．0892和米曲霉CGMCC2．0951混合固态发酵豆粕生产大豆多肽，通过响应面法对影响多肽产量的三个主要因素：装料量、发酵时间、发酵温度进行优化。结果表明，最优发酵条件为装料量30g，发酵时间120h，发酵温度34℃，在此条件下多肽产量的理论值可达23．91％。[关键词】枯草芽孢杆菌；米曲霉；发酵条件；响应面；大豆多肽【中图分类号】$816．4【文献标识码】A【文章编号】1004-3314(2

2、013)ll一0017-02[Abstract】ThecontentofsoybeanpeptideinfermentedsoybeanmealwerestudiedbyBacillussubtilisCGM—CC1．0892andAspergillusoryzaeCGMCC2．0951．Theeffectsoffermentationvolume．fermentationlastingtimeandfermen—tationtemperatureonthecontentofsoybeanpeptideweresignificantinprevioustrials．Theopti

3、malconditionsofthethreefactorswereassessedbytheresponsesurfacemethodlogy．Theoptimalconditionsshowedasfollows：fermentationvolume30g，fermentationlastingtime120handfermentationtemperature34℃．Undertheseconditions，thecontentofsoybeanpeptidWaS23．91％intheory．[Keywords]Bacillussubtilis；Aspergillusory

4、zoe；fermentationconditions；responsesurfacemethodlogy；soybeanpeptide多肽是指平均肽链长度为3—6个氨基酸残煤中提取，纯度为42％，由内蒙古永业集团有限基，分子质量为1000Da左右的低分子质量短链公司提供。肽(潘进权和刘耘，2003)。大豆多肽分子质量比大1．2菌种枯草芽孢杆菌CGMCC1．0895、米曲豆蛋白质小得多，并具有溶解度好，黏度低优点，霉CGMCC2．0951，均购于中国微生物菌种保藏且比蛋白质和氨基酸更易消化，所以多肽又称为中心。大豆活性肽或大豆功能肽(龚树立。2004)。采用发1-3培养基枯草芽孢杆

5、菌斜面培养基：牛肉膏酵法生产大豆蛋白多肽．由于在发酵过程中通过5g／L、氯化钠5g／L、蛋白胨10g／L，pH7．0，琼脂微生物作用。某些苦味肽基团进行修饰和重组，使2Og／L；米曲霉斜面培养基：麦芽汁琼脂培养基；小肽之间、小肽与氨基酸之间发生移接、重排，因枯草芽孢杆菌液体种子培养基：牛肉膏5g／L、氯此，制得的大豆肽具有溶解性好，无苦味和异味等化钠5g／L、蛋白胨10gJL，pH7．0；米曲霉液体种优点(陶红和梁歧，2004；张雁平，2003)。本试验采子培养基：麦芽汁培养基。用Minitab16软件中响应面分析方法(RSM)对枯1．4种子液的制备枯草芽孢杆菌经斜面活化草芽孢杆

6、菌和米曲霉混合固态发酵产生大豆多肽后刮取一环接人液体培养基中，35℃、120r／min进行发酵条件的优化．旨在为大豆多肽的生产提培养24h；米曲霉接种到斜面培养基，32℃培养供理论基础。72～96h，用灭菌生理盐水洗去斜面培养基上的1材料与方法孢子，调整孢子数达到10CFU／mL。最后按2：1的1．1原料豆粕、麸皮均为市购；腐植酸钠：从褐比例将枯草芽孢杆菌菌液与米曲霉孢子悬液混合作为发酵用种子液。按2．5％接种量接入灭菌的发基金项目：“十二五”国家科技支撑计划项目酵培养基中。(2011BAD18B02)1．5发酵底物发酵底物：糖蜜0．2％，腐殖酸钠通讯作者2％，磷酸氢二钾0．7％

7、，麸皮7．5％，含水量45％，中国饲料2013年第l1期豆粕装量按需要分为30、40、50g／250mL三角表2响应面分析试验设计及结果瓶。1．6响应面试验根据Box—Behnken中心组合设计原理，以装料量、发酵时间、发酵温度为自变量，以产物中的大豆多肽含量为响应值，设计三因素三水平的响应面分析试验，试验因素与水平见表1，共15个试验点，其中12个是析因点，3个零点重复(李善仁等，2010)。表1Box—Behnken响应面试验设计因素与水平1．7多肽含量的测定方法凯氏定氮法测