红麻叶片高质量RNA提取方法比较分析.pdf

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1、红麻叶片高质量RNA提取方法比较分析陈美霞1,2陈富成1颜克伟1刘晓倩1徐建堂1陶爱芬1祁建民11.福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室,福建福州350002;2.宁德师范学院生物工程系,福建宁德352100摘要:红麻叶片中富含多糖、多酚和其他次生代谢物质,影响其RNA的产量和质量.本研究应用CTAB法、热硼酸法、SDS法、Trizol法和商品化试剂盒5种方法提取福红992幼嫩叶片总RNA,并对各方法提取效果进行比较.结果表明,热硼酸法效果最佳,其次是CTAB法和SDS法,而Trizol法、试剂盒提取效果不理想.采用热硼酸法提取的红麻叶片总RNA能够成功进行反转录和制备

2、cDNA.红麻;叶片;总RNA提取S563.5A1671-5470(2011)06-0561-05Comparisonandanalysisofmethodsofextractinghigh-qualitytotalRNAfromkenafleavesCHENMei-xiaCHENFu-chengYANKe-weiLIUXiao-qianXUJian-tangTAOAi-fenQIJian-min2011-01-192011-04-18国家麻类产业技术体系建设项目(nycytx-19-512);国家自然科学基金项目(3100073).作者简介:陈美霞(1983-)女,博士研究生.研究

3、方向:麻类生化与分子生物学.通讯作者祁建民(1948-),男,教授,博士生导师.研究方向:作物遗传育种;生化与分子生物学.Email:Qijm863@163.com.失表l可以看I试验要哥@@[1]蒋建雄,张天真.利用CTAB/酸酚法提取棉花组织总RNA[J].棉花学报,2003,15(3):166-167.@@[2]刘志,杨永华.CTAB法提取中草药材滇紫草细胞的总RNA[J].生物技术通讯,2004,15(4):372-373.@@[3]宋蓓,赵锦,刘孟军,等.改良CTAB-LiCl法提取枣总RNA体系的建立[J].中国农学通报,2007,23(7):79-83.@@[4](硷)

4、国英,漆艳香,蒲金基,等.改良CTAB法提取高质量香蕉叶片总RNA[J].广东农业科学,2009(7):192-195.@@[5]庄军平,苏菁,陈维信.一种从香蕉果实提取高质量RNA的方法[J].分子植物育种,2006,4(1):143-146.@@[6]MANNINGK.Isolationofnucleicacidsfromplantsbydifferentialsolventprecipitation[J].AnalyticalBiochemistry,1991,195(1):45-50.@@[7]WANCY,WILKINSTA.Amodifiedhotboratemethods

5、ignificantlyenhancestheyieldofhigh-quartyRNAfromcotton(Gossypium/hirsutumL.)[J].AnalyticalBiochemistry,1994,223(1):7-12.@@[8]武耀廷,刘进元.一种高效提取棉花不同组织总RNA的热硼酸改良法[J].棉花学报,2004,16(2):67-71.@@[9]黄凤兰,李长海,孙婷婷,等.芍药花瓣总RNA的提取[J].生物技术通讯,2005,16(3):282-283.@@[10]HUNTERDA,REIDMS.Asimpleandrapidmethodforisolati

6、nghighqualityRNAfromflowerpetals[J].ActaHorticulturae.2002,319:543.@@[11]杨成君.人参cDNA文库构建,EST与相关基因表达分析及EST-SSR标记建立[D].哈尔滨:东北林业大学,2008.@@[12]ZHOUJH,PESACRETATC,BROWNRC.RNAisolationwithoutgelformationfromoligosacchariderichonionepidermis[J].PlantMolecularBiologyReporter,1999,17(4):397-407.@@[13]SCH

7、MITTME,BROWNTA,TRUMPOWERBL.ArapidandsimplemethodforpreparationofRNAfromSaccharomycescerevisiae[J].NucleicAcidsResearch,1990,18(10):3091-3092.@@[14]白斌,张金文.马铃薯块茎RNA提取及RT-PCR法克隆酸性转化酶基因[J].分子植物育种,2005,3(4):479-484.@@[15]ABES,FUJISAWAT

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