结核分枝杆菌与实验室生物安全课件

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1、结核分枝杆菌与实验室生物安全结核病的定义结核病的疫情结核病病原学结核病的流行结核病实验室生物安全结核病实验室安全防护结核病实验室废物处理结核病职业暴露6/12/20212结核病是由结核分枝杆菌（偶尔可由牛型或非洲型分枝杆菌）引起的一种细菌性疾病。结核病可累及全身各个器官，但以肺结核最为常见。该病具有传染性强，散播面广，不分地域均可发生。结核病可由呼吸道、消化道、皮肤等途径感染，但其主要传播途径是以空气为传播因子的呼吸道传染，而排菌的肺结核病人传染性更大，是传播感染的主要传染源。6/12/20213结核病的疫情感染人数约为20亿新发活动性肺结核

2、病人890万(141/10万)新发涂阳肺结核病人390万结核病发病率每年增加1%估计患病人数为1550万例（患病率为246/10万）其中包括HIV+TB38万例死于结核病为180万例，结核病死亡率为29/10万,其中包括HIV+TB死亡27万例6/12/20214结核病病原学结核分枝杆菌是引起人类结核病的主要病原体。1882年由德国医生Koch发现。在微生物分类中，结核分枝杆菌属于厚壁门、裂殖菌纲、放线菌目、分枝杆菌科、分枝杆菌属。分枝杆菌复合群共包括人型、牛型、非洲型和田鼠型，而人型结核分枝杆菌是人类主要的致病菌。6/12/20215结核分

3、枝杆菌的形态结核分枝杆菌菌体具有多形态特征，除正常典型形态外，受不良生长条件的影响。如物理因素、化学因素，特别是药物因素，而呈现异常变化，其各种形态可归纳为杆菌型（基本形态）、滤过型、颗粒型和球菌型（L型）4种类型。6/12/202166/12/202171.杆菌型（基本形态）结核分枝杆菌正常典型的形态是直或稍弯曲、两端钝圆的杆菌。菌体长1～4μm，宽0.3～0.6μm，无芽胞、无荚膜、无鞭毛，生长发育期间有分枝生长倾向。6/12/202182.滤过型早在1901年，Foutes在检查细菌滤器滤过的结核分枝杆菌培养滤液时，在电子显微镜下观察到

4、球状微粒体。1991年，Khomeko在豚鼠损坏性肺结核模型中证实了滤过型的存在。此球状微粒体可通过细菌滤膜，称为滤过型。6/12/202193.颗粒型1907年莫赫(Much)在结核性冷性脓肿、浆液性渗出液、干酪性淋巴结等脓液中观察到革兰染色阳性颗粒，称为莫赫颗粒。莫赫颗粒的重要意义在于这些颗粒型体仍有生机与活力，在适宜的营养条件下，可重新获得增殖，发育生长出典型结核分枝杆菌。6/12/2021104.球菌型（L型）结核分枝杆菌在体内外受物理、化学、免疫等因素的影响，维持菌体固有形态的细胞壁缺损或丧失，产生细胞壁缺陷型。细胞壁缺陷型细菌是1

5、935年Kilienberger在英国Lister医学研究院研究念珠状链杆菌时首先发现的，故以Lister医学研究院的第一个字母，将细胞壁缺陷型细菌命名为L型菌。6/12/202111结核分枝杆菌的染色特性结核分枝杆菌本身无颜色，观察结核分枝杆菌必须染色后进行。结核分枝杆菌革兰染色阳性，但革兰染色不易着色。经苯胺染料着色后，能抵抗酸和酸乙醇脱色，此种特性称为抗酸性。Z-N染色法为最常用的一种抗酸染色方法，经此法染色后，分枝杆菌，包括结核分枝杆菌呈红色，而标本中其他细菌、细胞、杂质等均呈蓝色6/12/202112结核分枝杆菌的生长特性结核分枝杆

6、菌生长缓慢，繁殖一代在人工培养基内约需要15～20小时，在静脉感染未经免疫小鼠肺中约需要15小时，在巨噬细胞内约需要15～20小时，在家兔角膜中约需要20～22小时。6/12/202113结核分枝杆菌的抵抗力结核分枝杆菌因细胞壁含大量类脂质，尤其是腊样物质，具有疏水性，对物理和化学因素的作用均较一般致病菌抵抗力强。6/12/2021141.物理因素影响结核分枝杆菌生存能力较强，在温室和阴暗处干燥痰内可以存活6～8个月，粘附在飞扬的空气尘埃中可保持传染性8～10天。结核分枝杆菌一般较耐低温，在-6～8℃能存活4～5年。6/12/202115干热

7、对结核分枝杆菌杀伤力弱，痰内结核分枝杆菌在100℃下需要4～5小时被杀灭。湿热对结核分枝杆菌杀伤力强，在60℃30分钟、70℃10分钟、80℃5分钟和90℃1分钟可将其杀死，因此煮沸与高压蒸气消毒是最有效的方法之一。6/12/202116结核分枝杆菌对光线和射线敏感，在太阳光直射下2～7小时死亡。病人用过的物品在强阳光下直晒半日，基本可达到消毒的目的。10～1mg/ml菌悬液，液层厚度3mm，用10W紫外线灯在距离确0.5m处持续照射3分钟，在距离1m处持续照射10分钟，经培养无细菌生长。但紫外线穿透力弱，难以透入固体物质内部和液体深层，因此

8、紫外线通常用于空气和物体表面消毒。6/12/2021172.化学因素的影响化学消毒剂的种类很多，其杀菌的机制因化学药物种类不同而异。乙醇使菌细胞蛋白质变性、凝固而产