疑难血型鉴定中的若干问题1

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1、疑难血型鉴定中若干问题输血前免疫学检测输血前检测要求做ABO血型（正反联合）、RhD抗原鉴定，抗体筛选和交叉配血。血型定型是基础。目的：准确定型，选择相容血液。意义：输血安全、有效。“疑难血型”的定义“疑难血型”是指一种血型难以判定的“现象”实质不是一种独立的血型在临床输血中,只要求查ABO,RhD,不要求查其它血型,因此,疑难血型只涉及ABO和RhDABO疑难血型一般是因为正,反定型不合而发现的红细胞血型系统简介血型系统：29个血型系统，已检出的抗原超过200个。血型集合：达不到血型系统命名标准的血型抗原，但在血清学、生化、或遗传学上有相关性。血型系列：一个高频组（＞

2、90%），一个低频组（＜1%）。红细胞血型系统简介最具临床意义：ABO、Rh重要临床意义：输血安全、器官移植、新生儿溶血病。ABO血型临床意义溶血性输血反应ABO抗体与相应抗原结合后，能够激活补体，导致红细胞在血管内立即被破坏。轻者仅表现为发热、腰背痛、血红蛋白尿或手术野弥漫性渗血。重者可表现为DIC、休克、急性肾衰竭，甚至死亡。ABO血型临床意义新生儿溶血病器官移植ABO抗原的发育在胚胎早期A和B抗原就开始产生，到出生时，他们比成人的抗原数目要少，大约是成人25～50%。与抗A和抗B试剂血清反应比成人弱，18个月后才能充分表现出抗原性。2~4岁时，抗原逐步发育成熟，并

3、终生基本保持恒定。ABO血型抗体正常情况下存在于缺少相应抗原的人血清中。新生儿ABO抗体很少；无抗体成人罕见。自然产生抗体：IgM（主要是A和B型）、IgG类（主要是O型）。IgM可被唾液中血型物质中和。O型-抗A,B：识别A和B抗原表位共同的结构部分具有交叉反应性。ABO血型系统的独特性质血清中常存在反应很强的抗体，而红细胞上缺乏相应的抗原。许多组织细胞上有规律地存在着A、B、H抗原（消化道呼吸道泌尿系统上皮细胞）以及分泌型人的分泌液（唾液、眼泪、尿液、消化液、胆汁、乳液、羊水、卵巢囊肿液、腹水）中存在着A、B、H血型物质。ABO血型的鉴定完整的ABO定型必须包括正定

4、型和反定型两种方法，并互相核对其结果是否一致。正定型用已知型特异性的抗体试剂检查被检红细胞抗原。试剂血清常规用抗A、抗B两种标准血清。反定型用已知血型的红细胞检查血清中的抗体。试剂细胞常规用A、B和O型三种红细胞。血型鉴定方法玻片法（瓷板法、纸片法）试管法：经典的试管离心方法仍被认为是最可靠的ABO定型方法。微量板法(U型或V型板)：大量标本微柱凝胶免疫实验技术（卡式）PCR方法注意：细胞浓度、血清与细胞比例ABO正反定型不符合原因试验因素假阴性：未加试剂；红细胞与血清比例不当；试验温度不当；离心速度不够；未判明结果为溶血；试验结果解读不准确。假阳性：试剂血清、红细胞或

5、生理盐水污染；应用不洁的器皿；离心过度；试验结果解读不准确。患者本身患者因素红细胞（正定型）：红细胞抗原减弱：亚型、疾病红细胞抗原增多：获得性B抗原细菌污染造成多凝集现象红细胞被自身抗体致敏Wharton胶混合外观凝集：骨髓移植、近期输血患者因素血清方面的原因（反定型）血清抗体减少：年龄因素低丙种球蛋白血症血清抗体增加：自身抗体的存在同种抗体的存在血清被细菌污染造成多凝集现象球蛋白过高造成的缗钱状凝集近期内血浆置换溶血素（溶血反应）常见问题处理方法★了解患者一般情况。★在做进一步试验之前，先进行重复试验。★用试管法,洗涤细胞。★更换新的试剂。★灭活补体。常见问题处理方法

6、初步检查：再取一份患者新鲜标本；红细胞洗涤后配成2～5%浓度；重复进行各项试验；直接抗人球蛋白试验；用O及自身细胞检测血清，怀疑抗I，用脐血细胞检查；判定结果之前，实验管至少在室温和4℃放置30分钟，阴性者用显微镜观察结果。进一步实验增加试剂血清：抗A1抗H抗A,B增加细胞：自身、O细胞、脐血细胞唾液血型物质鉴定吸收试验放散试验直接抗球蛋白试验分子生物学实验特殊ABO正反定型不一致的解决方法异常正定型（红细胞问题）抗原弱获得性B抗原混合凝集视野cisAB抗原弱当患者血清中存在抗A或抗B时，而红细胞不与相应的抗血清凝集，高度怀疑是缺乏抗原或抗原弱。此时有两种情况：亚型；

7、疾病（急性白血病、骨髓增生异常综合症等）所致。对策：以A亚型为例①用抗A、抗A1、抗A,B、抗H，重复检查洗涤后的被检红细胞，并在室温及4℃放置至少30min。注意按试剂说明书操作。②做吸收放散试验，放散液与3个A细胞和3个O细胞反应。若与A细胞呈阳性反应，与O细胞呈阴性反应，证明被检细胞有A抗原。③检查唾液中ABH物质。④如果有条件，当疾病缓解后复查ABO血型。获得性B抗原当红细胞正定型似乎是AB型，而血清中又含有抗B时，应该考虑是获得性B抗原。常发生于A1型个体。疾病导致的。对策：①仔细观察红细胞与抗A抗B的凝集强度，与抗B血清反应要