双歧杆菌的分离鉴定与耐氧驯化_张旭.pdf

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1、现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2009,Vol.25,No.1双歧杆菌的分离鉴定与耐氧驯化张旭，魏仲珊，李华丽（湖南省畜牧兽医研究所，湖南长沙410131）摘要：本研究从鸡盲肠内容物中分离出单菌落，经菌落菌体形态观察和生理生化鉴定为双歧杆菌。采用逐级增加氧气含量的方法对筛选出的双歧杆菌进行耐氧驯化，以改善双歧杆菌对氧气的耐受力，经过多次驯化，优选出对氧气有一定耐受力、凝乳能力较好，且在贮藏过程中活菌数能够达到保健功能要求的菌株B05。经二次鉴定该菌株保持了双歧杆菌的形态和生理特征。关键词：双歧杆菌；分离；鉴

2、定；耐氧驯化中图分类号：TS201.3；文献标识码：A；文章篇号:1673-9078(2009)01-0031-04Isolation,IdentificationandAcclimatizationofaResistant-oxygenStrainofBifidobacteriumZHANGXu,WEIZhong-shan,LIHua-li（HunanInstituteofAnimalandVeterinaryScience,Changsha410131,China）Abstract:AstrainofBifidobacteriumwasisol

3、atedfromtheappendixoffifteen-day-oldchickens,whichwasacclimatizedtooxygenicenvironmentbyincreasingthecontentofoxygengradually.Byrepetitiousdomestication,anoxygen-resistantstrainofBifidobacteriumB05wasachieved,whichremainedthemodalityandphysiologicalcharactersofBifidobacterium.

4、Thisstrainalsoshowedmilkcurdingcapability,usingwhichenoughnumberoflivingBifidobacteriumcellswasdetectedinthestorageperiodofyogurt.Keywords:Bifidobacterium;isolation;Identification;acclimatization双歧杆菌是正常人体消化道内的益生乳酸菌，双性好的双歧杆菌菌株应用于生产。歧杆菌能够抵御感染，刺激宿主产生免疫反应，对维本研究旨在选育出具有耐氧能力的双歧杆菌菌持人体

5、正常的肠道微生态平衡起到十分必要的作用。株，解决双歧杆菌活菌制剂的生物活性低和产品稳定双歧杆菌在厌氧环境下生长繁殖产生大量乳酸，降低性差的问题。保证产品在贮藏过程中有相当数量的活系统pH值而迅速使肠道菌群发生变化，抑制和杀死肠菌，能够达到保健功能的要求。道病原菌，能够减少消化道感染和肠炎、肠癌的发生。1材料与方法双歧杆菌能分解N-亚硝胺，产生具抗肿瘤特性的胞外多糖，还能分泌双歧杆菌素和类溶菌物质，提高巨噬1.1材料[1]细胞的吞噬能力，增强人体免疫力，此外，双歧杆菌1.1.1分离源[2]还能在肠道内自然合成多种维生素。双歧杆菌是消化15d龄健康小鸡

6、的盲肠内容物（本试验所用样品鸡道中的原生菌，在食品工业生产中如何提高原生菌的来自湖南省畜牧兽医研究所种鸡场的试验用鸡，沙门活菌数量、延长活菌保藏期是双歧杆菌及其制品的研氏菌和球虫检验阴性）。制与开发的关键。酸乳制品是双歧杆菌的良好载体，1.1.2培养基[4]但由于双歧杆菌为专性厌氧菌，对营养要求高，需要1.1.2.1添加X-Gal的NPNL培养基：用于双歧杆外源性生长因子即双歧杆菌增殖因子才能很好地生菌分离与计数。[5]长，且对胆汁和酸的耐受力差，使得目前的双歧杆菌1.1.2.2PTYG培养基：用于双歧杆菌纯化。[6]乳制品存在着产品活菌数量低，达

7、不到保健功能的要1.1.2.3TPY液体培养基：用做鸡双歧杆菌的增菌6[3]求，即活菌数>10cfu/mL，以及活菌能够进入肠道培养基。的数量低等问题，因而有必有选育出安全性高、稳定1.1.2.4脱脂乳培养基收稿日期：2008-07-07将100g脱脂奶粉溶解于1000mL蒸馏水中，分作者简介：张旭(1979-)，女，硕士，助理讲师。装于试管，121℃灭菌15min，用于双歧杆菌凝乳发31现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2009,Vol.25,No.1酵。用于双歧杆菌驯化时在脱脂乳培养基中加入1%以指示剂的颜

8、色变化来判断含氧量的多少，经多次传葡萄糖。代驯化后，选择在脱脂乳培养基中凝乳时间较短、活1.1.3无氧指示剂菌数较高且贮藏