正交试验优选黄芪有效成分提取工艺

《正交试验优选黄芪有效成分提取工艺》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、正交试验优选黄芪有效成分提取工艺　　【摘要】目的：优选黄芪有效成分的提取工艺。方法：采用正交试验L9（34）优化提取工艺，以乙醇体积分数醇度、乙醇溶剂用量、提取时间、提取次数为考察因素，以主要有效成分黄芪甲苷，毛蕊异黄酮葡萄糖苷的提取率为指标。结果：最佳工艺为用10倍量80%乙醇，回流提取2次，每次1h。结论：优选的工艺稳定、合理，可用于黄芪有效成分的提取及质量控制方法标准。【关键词】黄芪；黄芪甲苷；毛蕊异黄酮葡萄糖苷；正交试验；提取工艺黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus（Fisch.）Bge.

2、var.mongholicus（Bge.）Hsiao或膜荚黄芪Astragalus7membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血、行滞通痹、托毒排脓、敛疮生肌之功效，临床应用广泛，为常用补气中药，其有效成分具有明确的药效作用等[1-2]。按中国药典2010年版一部规定的质量考察标准，需进行主要指标成分：黄芪甲苷，毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的测定[3]。但相关测定研究方法仍存在一些不足[4]。同时研究提高不同黄芪有效成分提取率的方法也在不断开展，如纤维素酶提取法、微波提取工艺法

3、、超微粉碎提取方法等[5-7]。在本项实验研究中笔者采用了正交试验法进行了相关研究并取得一定的研究结果，现介绍如下。1材料1.1仪器Aglient1200HPLC-DAD液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；sartoriusOSA-22电子分析天平；DZKW-4型电热恒温水浴锅等。1.2药材及试剂黄芪，购自北京，产地内蒙古，经鉴定为规定品种的中药饮片，符合中国药典2010年版一部规定[3]。黄芪甲苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110781-200613），毛蕊异黄酮葡萄糖苷（中国食品药品检定研究院，批号：10103

4、0-200510）；甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1黄芪甲苷的含量测定色谱条件：色谱柱AglientTC-C18（150mm×4.6mm，5μm）；Ser#USJBB01065；流动相：乙腈-水（32：68）；流速：1.0ml/min；柱温：25℃；蒸发光散射：温度105℃，气流量2.8L/min，空气泵压力0.5mPa（0.45～0.56mPa），柱压75～77bar，进样量：10μl。对照品溶液的制备：精密称取10mg黄芪甲苷对照品，用甲醇将其溶解，并定容到25ml，即得。供试品溶液的

5、制备：精密称取黄芪47g（粉碎，过40目筛），置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4h，提取液回收溶剂至干，残渣加水10ml，微热溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解定容到10ml，进样测定。2.2毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定色谱条件：色谱柱：AgilentTC-C18（150mm×4.6mm，5μm）；Ser#USJBB01065；流动相：乙腈-0.2%甲酸梯度洗脱，见表1；流速1ml/min；检

6、测波长260nm。对照品溶液的制备：精密称取毛蕊异黄酮葡萄糖苷5mg，用甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中，即可。供试品溶液的制备：精密称取黄芪粉末1g，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，加热回流4h，放冷，再称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，进样测定。2.3正交试验优选提取工艺2.3.1单因素考察溶剂对提取工艺的影响提取一：取黄芪500g，用10倍量60%乙醇回流提取1h，提取1次，醇提液浓缩至约1100ml，喷雾干

7、燥，得粉末85.2g。提取二：取黄芪500g，用10倍量80%乙醇回流提取1h，提取1次，醇提液浓缩至约680ml，喷雾干燥，得粉末62.8g。7黄芪甲苷的测定：供试液的制备：取1g黄芪醇提物粉末，加水10ml加热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，蒸干正丁醇层，残渣加甲醇定容到5ml。HPLC测定法同前，黄芪甲苷含量见表2。结果显示，乙醇醇度对黄芪中皂苷的提取影响较大，采用80%乙醇提取时，黄芪皂苷的提取效果最佳，故应采用80%乙醇条件提取黄芪。2.

8、3.2因素水平的选择根据预试验，及对提取液中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的初步含量分析，确定乙醇体积分数醇度（A）、乙醇溶剂用量（B）、提取时间（C）、提取次数（D）为考察因素，采用四因素三水平[L9（34）]正交试验法确定最优提取工艺，因素与水平考察见表3。2.3.3测定与