重组人白细胞介素-2.ppt

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1、基因工程药物之重组人白细胞介素-2基因工程药物定义：先确定对某种疾病有预防和治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白质合成过程的基因取出来，经过一系列基因操作，最后将该基因放入可以大量生产的受体细胞中去，这些受体细胞包括细菌、酵母菌、动物或动物细胞、植物或植物细胞，在受体细胞不断繁殖过程中，大规模生产具有预防和治疗这些疾病的蛋白质，即基因疫苗或药物。一、基本信息（一）白细胞介素：是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。由于最初是由白细胞产生又在白细胞间发挥作用，所以由此得名，现仍一直沿用。白细胞介素interleukin缩

2、写为IL。现在是指一类分子结构和生物学功能已基本明确，具有重要调节作用而统一命名的细胞因子，它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调，相互作用，共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用.（二）白细胞介素-2为多肽类免疫增强剂。是一种淋巴因子，能刺激T细胞增殖分化，诱导产生细胞毒性T淋巴细胞（CTL），增强自然杀伤（NK）细胞活性，激活产生淋巴因子的杀伤（LAK）细胞和肿瘤侵润淋巴细胞（TIL），刺激B细胞增殖分化和分泌抗体，诱导干扰素和多

3、种细胞因子的分泌。用于肿瘤辅助治疗和癌性胸、腹水的治疗il-2分子：il-2分子量为15kd，是含有113个氨基酸残基的糖蛋白，在人类由第4号染色体上的一个基因编码。il-2具有一定的种属特异性，人类细胞只对灵长类来源的il-2起反应，而几乎所有种属动物的细胞均对人的il-2敏感。il-2受体(il-2r)：il-2的靶细胞包括t细胞、nk细胞、b细胞及单核-巨噬细胞等。这些细胞表面均可表达il-2r。il-2r包含3条多肽链：1条为α链，分子量55kd;1条为β链，分子量75kd;另1条为γ链，分子量64kd。α链的胞内区

4、较短，不能向细胞内传递信号，而β链和γ链的胞内区较长，具有传递信号的能力。3种肽链单独与il-2结合亲和力较低，只有同时表达才能产生高度亲和力。二、生产制备生产制备的方式主要有两种：1、传统工艺制备2、基因工程制备其中以第二种方法为主基因工程制备流程IL-2cDNA文库的构建IL-2表达利用mRNA杂交筛选IL-2cDNA克隆与质粒载体pLY-4连接，并转入大肠杆菌纯化的IL-2制备包涵体，并用凝胶过滤层析纯化cDNA文库的构建IL-2mRNA逆转录酶逆转录成单链cDNA末端脱氧核苷酸转移酶DNA聚合酶I双链cDNA蔗糖密度

5、梯度离心G-C加尾法插入到pBR322质粒的PstI位点粒转化大肠杆菌得到IL-2cDNA文库cDNA末端连接dCMP残基，寡聚（dG）12~18为引物cDNA片段重组质三、药物信息药典中有以下三种药物含有重组人白细胞素介素-2：1.注射用重组人白细胞介素-22.重组人白细胞介素-2注射液3.注射用重组人白细胞介素-2（Ⅰ）注射用重组人白细胞介素-21.性状及功效高效表达人白细胞介素-2的大肠杆菌，经过发酵、分离和高度纯化后获得的重组人白细胞介素-2冻干制成，含有适宜稳定剂，不含添加剂和抗生素。外观为白色或者微黄色疏松体，加

6、灭菌注射水后迅速溶解为澄明液体。用于治疗成人转移性肾细胞癌（RCC）及黑色素瘤等恶性肿瘤，也适用于癌性胸腹水的控制2.用法用量（1）.全身用药静脉滴注：10万一80万国际单位；皮下注射：50万—100万国际单位；介入动脉灌注：40万—l00万国际单位（2）.区域与局部给药胸腹腔注射：30万—l00万国际单位；肿瘤灶局部给药：根据瘤体大小决定用药剂量。一般剂量为一次20万国际单位(IU)。注：药物采用氯化钠溶解。重组人白细胞介素-2注射液1.性状及功效(1).性状高效表达人白细胞介素-2的大肠杆菌，经过发酵、分离和高度纯化后获

7、得的重组人白细胞介素-2制成，含有适宜稳定剂，不含添加剂和抗生素。外观为无色或者微黄色澄明液体。(2).功效1.用于肾细胞癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、直肠癌、淋巴癌、肺癌等恶性肿瘤的治疗，用于癌性胸腹水的控制，也可以用于淋巴因子激活的杀伤细胞的培养。2.用于手术、放疗及化疗后的肿瘤患者的治疗，可增强机体免疫功能。3.用于先天或后天免疫缺陷症的治疗，提高病人细胞免疫功能和抗感染能力。4.各种自身免疫病的治疗，如类风湿性关节炎等。5.对某些病毒性、杆菌性疾病、胞内寄生菌感染性疾病，如乙型肝炎、麻风病、肺结核等具有一定的治疗作用。2

8、.用法用量（1）.全身用药：1)皮下注射：重组人白介素-2（125Ala）60－100万IU/m2，皮下注射3次/周，6周为一疗程。2)静脉注射：40～80万U/m2加生理盐水500ml，滴注时间不少于4小时。3)介入动脉灌注50～100万IU/次，2～4周一次，2～4次为一疗程。(2).