最新实验诊断实验课课件教学讲义ppt课件.ppt

《最新实验诊断实验课课件教学讲义ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、实验诊断实验课课件一目的：熟悉白细胞计数方法，掌握白细胞计数参考值及临床意义。二原理：用2%稀醋酸(冰乙酸)作白细胞计数稀释液，可使红细胞溶解，留下白细胞，用血细胞计数板计数一定体积中的白细胞数，计算出每升血液中白细胞的总数。三器材：白细胞稀释液、显微镜、计数板、采血针、小玻棒、小试管、试管架、微量吸管、小纱布、75％酒精棉球、消毒干棉球四步骤：1.以2％冰乙酸溶液为白细胞计数稀释液，用吸管准确吸取稀释液0.38ml，置于清洁干燥的小试管中。2.毛细血管采血法:用微量吸管采血至20微升处，擦去管

2、尖外围多余的血液，将管内血液迅速注入试管底部，并用上清液将管内残存血液洗净，立即混匀。待液体呈褐色后，再振荡均匀，用小玻棒取此液注入计数池内，静置2－3分钟。3.用低倍镜计数四角的四个大方格内的白细胞数(N)。压线细胞计数原则：数上不数下，数左不数右。实验二红细胞计数一实验目的：掌握红细胞计数原理和方法，熟悉红细胞参考值及临床意义。二实验原理：用红细胞稀释液将血液稀释一定倍数，置于血细胞计数板内，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，然后再计算出每升血液内的红细胞数。三实验器材和试剂：红细胞稀释液

3、（0.85%NaCl）、显微镜、小试管、细胞计数板、盖玻片、微量吸管、试管架、采血针、小玻棒、75%酒精棉球、小纱布、消毒干棉球、报告单。四实验步骤：1.取试管1支，加红细胞稀释1.99ml。2.消毒皮肤，用采血针刺破皮肤，使血液自动流出，拭去第一滴血，用一次性微量吸管准确取血10微升。3.去管尖外部余血，轻轻注入红细胞稀释液底部，再吸取上层稀释液清洗吸管2-3次，立即摇匀。4.倾斜试管用小玻棒沾取红细胞悬液，注入血细胞计池内，要求一次充好，不要产生气泡。静置2-3分钟，使红细胞完全沉降。5.将

4、计数板置于显微镜下用高倍镜计数中央大方格红细胞计数区四个角和中间的一个中方格共5个中方格内的红细胞。凡压在中方格边缘上的红细胞，以数上不数下，数左不数右的原则进行计数。五计算R（五个中方格内RBC数）R×5×10×106×200=△.△△×1012个/升式中：×5：5个中方格内红细胞数换算为1个大方格内红细胞数×10：1个大方格容积（0.1微升）换算成1微升×106：1微升换算为1升×200：血液稀释倍数六实验报告方式：△.△△×1012/L七正常参考值：成年男性：4.00-5.50×1012/

5、L成年女性：3.50-5.00×1012/L新生儿：6.00-7.00×1012/L八注意事项：1.显微镜物镜接近计数板时应注意，勿损坏计数板及镜头。2.计数时进入显微镜的光线要适中，否则不易找到方格。计数池内的细胞分布要均匀，各中方格的细胞相差不应超过±10%，否则重新计数。3.试管、计数板须清洁，以免杂质、微粒等被误认为红细胞。4.稀释倍数要准确。5.计数完毕后，用清水将计数盘和盖玻片冲洗干净，待干后备用。九思考题：1.计数不准确的常见原因有哪些？2.红细胞数增多减少的临床意义？实验三白细胞

6、分类计数一实验目的：掌握白细胞分类计数原理和方法，熟悉白细胞分类计数的参考值及临床意义。二实验原理：白细胞的胞质、胞核和胞桨颗粒等含有不同的化学成分，其与各种染料的亲和力不同。经染色后能着上不同的颜色，根据颜色的差异，可将白细胞区别并进行分类计数。三实验器材和试剂：显微镜擦镜纸75％酒精推玻片吸水纸消毒干棉球载玻片染色架瑞氏染色液采血针香柏油缓冲液吸球二甲苯四实验步骤：1.血涂片制备--取末梢血一滴，置于载玻片一端，将推片的一端，放在血滴前面，逐渐后移接触血滴，血滴好沿推片散开，然后使推片与载玻

7、片间成30°～45°夹角，平稳向前推动至载玻片的另一端，玻片上便留下一均匀薄层血膜，自然干燥。2.染色--①将干燥后的血膜片置于染色架上。②用瑞氏染液3～5滴，覆盖整个血膜，固定细胞0.5～1min。③滴加等量或稍多的缓冲液于血膜上，用吸球将其吹匀，染色5～10min。④平放玻片，用流水从玻片的一侧冲去染液，待血片自然干燥或用滤纸吸干，即可镜检。3.镜检--在低倍镜下观察细胞着色情况，然后选择血涂片体尾交界部染色良好的区域滴加一滴香柏油，在油镜下按一定的方向顺序对所见到的每一个白细胞进行分类，既

8、不得重复亦不遗漏，共计数100个白细胞。求出各类白细胞所占的百分率。瑞氏染色外周血五种白细胞形态特征：细胞类型大小（µm）外形细胞核细胞质核形染色质着色颗粒中性杆状核粒细胞10～15圆形弯曲呈腊肠样，两端钝圆深紫红色粗糙淡橘红色量多，细小，均匀布满胞质，浅紫红色中性分叶核粒细胞10～15圆形分为2～5叶，以3叶为多深紫红色粗糙淡橘红色量多，细小，均匀布满胞质，浅紫红色嗜酸性粒细胞11～16圆形分为2叶，呈眼镜样深紫红色粗糙淡橘红色量多粗大，圆而均匀，充满胞质，鲜橘红色嗜碱性粒细胞10～12圆形核