离子交换层析分离纯化漆酶 毕业论文

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1、学院本科生毕业设计（论文）学院本科生毕业设计（论文）题目离子交换层析分离纯化漆酶姓名学号系别生命科学系专业生物工程指导教师职称教授年月日学院教务处制7学院本科生毕业设计（论文）目录摘要……………………………………………………………………………………1关键词…………………………………………………………………………………1Abstract………………………………………………………………………………1Keywords……………………………………………………………………………1引言………………………………………………………………………………

2、11材料与方法………………………………………………………………………11.1材料来源……………………………………………………………………21.2方法…………………………………………………………………………21.2.1硫酸铵盐析………………………………………………………………21.2.2离心……………………………………………………………………21.2.3透析…………………………………………………………………21.2.4酶活力和蛋白含量的测定………………………………………………21.2.4.1酶活力的测定…………………………………………

3、………………21.2.4.2蛋白含量的测定………………………………………………………21.2.5酶液浓缩……………………………………………………………21.2.6离子交换柱层析…………………………………………………………21.2.7酶活力和蛋白含量测定…………………………………………………31.2.8酶回收率和纯化度的计算………………………………………………32分析和讨论…………………………………………………………………………32.1牛血清蛋白标准曲线……………………………………………………32.2离子交换层析柱结果……………………

4、………………………………32.3酶的纯化度和回收率………………………………………………………42.4讨论…………………………………………………………………………5参考文献………………………………………………………………………………5致谢……………………………………………………………………………………67学院本科生毕业设计（论文）离子交换层析分离纯化漆酶生物工程专业学生指导教师摘要：粗酶液经盐析、离心、透析和浓缩后，上样于Q-SepharoseF.F.层析柱，获得具有漆酶活性的组分。关键词：粗毛栓菌，漆酶，离子交换层析Seperati

5、onandPurificationofLaccasesinTrametesgallicaStudentmajoringinBiotechnologyDingJijinTutorSunXunAbstract:Thecrudeenzymewasultrafiltrated,saltedout,dialyzedconcentrateandap-pliedtoQ-Sepharoseionexchangecolumn.Thecompositionwithlaccaseactivitywasabtained.Keywords:Trametesg

6、allicaFr.,laccase,ionexchangechromatography引言漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，最早是从日本的漆树汁中发现的，是人类最早发现的酶之一，但直到现在，人们对它的认识还不完整[1]。近年来，随着漆酶功能的逐步发现，有关漆酶的研究受到普遍的重视。由于在降解木质素方面的功能，使之在制浆造纸工业，特别是纸浆生物漂白领域得到深入的研究和开发[2，3]，在环保方面也有很大的潜力，如它可与有毒的酚类作用，使含苯氧基类的除草剂、石油化工废物的物质解去毒性等[4]。随着应用的不断加深，漆酶的研究和开发越来越受到人们的

7、关注[5]。对白腐真菌粗毛栓菌(TrametesgallicaFr.)的前期研究显示,该菌能产生3种主要的木质素降解酶:木质素过氧化物酶(LigninPeroxidase),锰过氧化物酶(ManganesePeroxidase)以及漆酶,且具有较好的木质素降解能力[6]。通过对测定真菌漆酶酶活的各种不同的分光光度法进行了综述和比较分析,认为采用ABTS法作为测定漆酶酶活的方法较具合理性和科学性,建议作为漆酶酶活测定7学院本科生毕业设计（论文）的统一方法[7]。本文就以漆酶的分离、纯化及其部分性质进行初步研究。并测定其纯化度和回收率。

8、1材料与方法1.1材料来源粗酶液是由老师提供。该酶液来自粗毛栓菌TrametesgallicaFr.在麦草粉中的培养物[8]。1.2方法1.2.1硫酸铵盐析首先在粗酶液中添加固体（NH4）2SO4粉末至30%饱和度，过夜离心（7,00