2018年-2022年广西...行动物沙门菌血清型分布分析_顾桂敏

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广西畜牧兽医2023年Vol．39(1)37■■■■■■■■■■食品安全■2018年－2022年广西爬行动物沙门菌血清型分布分析■■11111112*3*■与■顾桂敏，覃定勇，杨自宁，吕鹏，黄昌盛，阮海，游武霖，王鸣柳，许学斌■检验检疫■(1．广西壮族自治区产品质量检验研究院，广西南宁530007;■■■■■■■■■2．广西壮族自治区疾病预防控制中心，广西南宁530021;3．上海市疾病预防控制中心病原生物检定所上海200336)中图分类号:S858．299．26文献标识码:B文章编号:1002－5235(2023)01－0037－04doi:10．3969/j．issn．1002－5235．2023．01．016摘要:为了解2018年－2022年广西爬行动物中沙门菌触爬行动物的接触中在统计学上有显著的流行病的血清型别分布，本研究于2018年－2022年采集了广学联系。2019年在上海首次成功溯源了因幼儿接西282份爬行动物的相关样品，对沙门菌进行分离、培触宠物龟感染波摩那沙门菌［5］。广西2008－2012养和鉴定分析。结果发现，282份样品中检出沙门菌年各类爬行动物的沙门菌监测数据表明:沙门菌阳60株，共有31种血清型，其中以奥雷宁堡沙门菌(Sal-［6］性检出率33．2%，共检出28种血清型，其中13monellaoreninburg)和汤卜逊沙门菌(Salmonellathomp-种与人源血清型一致。因此，进行对广西爬行动物沙son)为主。研究表明，应加强爬行动物沙门菌生态学门菌的监测，摸清人感染与爬行动物相关沙门菌分布监测，以防止与沙门菌相关的疾病暴发。规律，可为相关监管部门加强防控措施提供依据。关键词:沙门菌;爬行动物;血清型1材料与方法随着人们生活水平的提高及动物保护意识的1．1样品来源加强，与爬行类宠物密切接触，均会增加沙门菌从2018年1月－2022年7月采集的爬行动物肛动物传播给人的风险，然而爬行动物可分为食用拭子、尿拭子、外表涂抹物、爬行动物生存环境水型、观赏型、药用型，因此美国每年接触爬行动物等样，其来源包括广西的农贸市场、花鸟市场、龟鳖市被感染沙门菌的病例约7．4万例，占沙门菌病例数［1］场、养殖场、家庭养殖宠物，种类包含龟、鳖、大的6%。由于爬行动物有巨大的药用和食用价壁虎。值，人们容易从未经过安全审查的药用型和食用型1．2试剂与仪器爬行动物上感染沙门菌，其中美国爬行动物引发沙1．2．1试剂胰蛋白胨大豆肉汤(trypticasesoy门菌病以亚种Ⅲa多见，由美国的响尾蛇携带的奥broth，TSB)(北京陆桥技术股份有限公司、无锡市雷宁堡与亚利桑那亚种竞争宿主、非法加工成保健赛微生物技术有限公司)，Cary－Blair氏运送培养品被消费的疾病新传播途径值得预警，然而FDA［2］基(Cary－BlairTransportMedium)(北京陆桥技术未对响尾蛇胶囊进行安全性或有效性审查。随股份有限公司)，沙门显色+XLD双拼双拼选择培着文娱生活的丰富化，人们与观赏型爬行类宠物的养皿(安科生物制品(上海)有限公司)，TSB海绵密切接触也会增加感染沙门菌感染的风险，如走私涂抹棒(安科生物制品(上海)有限公司)，罗伯特入境的小乌龟和养殖的短吻鳄携带的波摩那型沙增菌液(ＲappaportVassiliadisbroth，ＲV)(北京陆桥门菌曾导致美国的非伤寒沙门菌感染，而鳄鱼技术股份有限公司、安科生物制品(上海)有限公(肉)食用和(皮)出口贸易，提示职业暴露与防护［3］司)、亚硒酸盐煌绿增菌液(selenitebrilliantgreen人和动物感染风险。英国研究者对1445株沙broth，SBG)(上海科玛嘉微生物技术有限公司、安［4］门菌使用全基因组测序方法，证明了在家里接科生物制品(上海)有限公司)，沙门菌显色平板(CHOＲMagarSalmonella，CAS)(上海欣中生物工收稿日期:2022－10－20基金项目:广西壮族自治区市场监督管理局科技计划项目(No．程有限公司、无锡市赛微生物技术有限公司)、木GXSJKJ2022－11)。糖赖氨酸脱氧胆酸盐平板(xyloselysinedeoxy-作者简介:顾桂敏(1985－)，本科，研究方向为沙门菌检验，E-mail:cholate，XLD)(美国BD公司、无锡市赛微生物技343041650@qq．com。*通讯作者。E-mail:wmlml@163．com;xxb72@sina．com。术有限公司，沙门菌诱导软琼脂(安科生物制品

138广西畜牧兽医2023年Vol．39(1)(上海)有限公司)和肠道菌筛选双糖管(无锡市赛表1三类爬行动物沙门菌的分离检测结果微生物技术有限公司)，沙门菌分型血清(丹麦SSI分类阳性阴性合计aa217诊断公司)，法国梅里埃细菌鉴定卡革兰氏阴性细龟53164a，ba，b鳖62329菌鉴定卡(GN)(法国生物梅里埃公司)均在有效bb36大壁虎135期内使用。合计602222821．2．2仪器法国生物梅里埃VITEK2Compact注:不同字母上标表示差异显著(P＜0．05)(法国生物梅里埃公司)表2三类爬行动物沙门菌血清型的分布情况1．3实验方法分类龟鳖大壁虎合计1．3．1肛拭子、尿拭子拭子+9mLSBG，36℃SalmonellaⅢb38:l，v:z531001培养24h，接种XLD和CAS，36℃培养24h，观察SalmonellaⅢb48:i:z351001SalmonellaⅢb61:l，v:z350202菌落特征。挑取选择性平板挑取2个及以上的疑C2－C3群1001似典型菌落，完成肠道菌筛选双糖管初筛试验，初I群1001筛符合者进行系统生化鉴定，符合沙门菌属者鉴定O61群1001奥雷宁堡6006血清型。奥兹马森30031．3．2水水样45mL+10倍浓缩TSB5mL，混波摩那2103匀后36℃培养24h，取1mLTSB加入SBG，另吸肠炎1001非丁伏斯1012取0．1mLTSB加入ＲV中。SBG置于36℃、ＲV置科特布斯1001于42℃，从2种选择性增菌液各取10μL接种科瓦利斯1001劳拉1001XLD和CAS，36℃培养24h，观察菌落特征。挑取利奇菲尔德2002选择性平板挑取2个及以上的疑似典型菌落，完成罗森1001肠道菌筛选双糖管初筛试验，初筛符合者进行系统迈阿密1001蒙得维的亚1001生化鉴定，符合沙门菌属者鉴定血清型。姆班达卡10011．3．3涂抹物TSB海绵涂抹棒涂抹爬行动物表慕尼黑2002纽波特1001面，36℃培养24h，取1mLTSB加入SBG，另吸取浦那10010．1mLTSB加入ＲV中。SBG置于36℃、ＲV置于圣保罗010142℃，从2种选择性增菌液各取10μL接种XLD和圣地亚哥2002鼠伤寒4004CAS，36℃培养24h，观察菌落特征。选用选择性鼠伤寒(H2－)2002平板挑取2个及以上的疑似典型菌落，完成肠道菌斯坦利4004筛选双糖管初筛试验，初筛符合者进行系统生化鉴汤卜逊3205旺兹沃思1001定，符合沙门菌属者鉴定血清型。维尔肖10011．4统计分析胥伐成格隆1001乙副爪哇变异型1001本研究采用EXCEL2007、SPSS26．0软件对数印第安纳10012据进行整理和分析，计数资料差异比较采用χ检长湾尼2002验，以P＜0．05为差异有统计学意义。阴性1642335222总计21729362822结果2．3龟样品来源及其分离结果根据龟的来源，分为中国本地产的龟和外来入2．1检测结果侵物种的龟的分离情况，见表3。2018年－2022年采集于广西的农贸市场、花表3不同龟种来源沙门菌分离情况鸟市场、养殖场、家庭养殖宠物的各种样品，种类包龟来源阳性阴性含龟、鳖、大壁虎共282份，见表1。aa本地351822．2分离菌血清型bb外来1720060株沙门菌共有31种血清型，其中3株为不其他1c216c可分型，前2位沙门菌血清型依次为奥雷宁堡、汤合计53598卜逊，见表2。注:不同字母上标表示差异极显著(P＜0．01)

2广西畜牧兽医2023年Vol．39(1)392．4样品龟来源及其分离株血清型现花鸟市场上的宠物龟大部分为外来物种，常见的本地龟与外来入侵物种龟分离株血清型的分巴西红耳龟是市面上的宠儿，尤其是陆龟的种龟，［9］布情况，见表4。基本上以进口为主。在2020年7月3日，农业表4不同来源龟分离株血清型的分布情况农村部网站发布农业农村部、海关总署第256号公血清型外来龟本地龟其他龟告，发布经修订的《中华人民共和国进境动物检疫SalmonellaⅢb38:l，v:z53010疫病名录》中，未表明爬行动物进境需进行沙门菌SalmonellaⅢb48:i:z35010检疫，因此，外来物种的爬行动物携带沙门菌有输SalmonellaⅢb61:l，v:z35000入性的风险。然而，欧盟委员会表示，爬行动物肉C2－C3群100I群010携带沙门菌是威胁人类健康的潜在因素，并于O61群0102020年2月17日发布(EU)2020/2056号条例，制奥雷宁堡600定爬行动物肉产品中沙门菌标准，对法规(EC)No奥兹马森2102073/2005附件I的修改增加了爬行动物投放市波摩那110［10］场的沙门氏菌检出标准，因此，加强爬行动物沙肠炎100门菌的监测，需要引进高于国标的方法、技术，否则非丁伏斯100国外的技术壁垒会导致我们处于技术劣势，进而给科特布斯100科瓦利斯100企业经济和国家经济带来严重的损失。劳拉010世界动物保护协会在北京发布野生动物异域利奇菲尔德110宠物全球贸易报告称:目前已有超过500种鸟类及罗森001500种爬行动物在全球交易，其中非法贸易额高达迈阿密010200亿美元。异宠贸易背后的种种，以及饲养异宠蒙得维的亚100如爬虫等携带的病原体给饲养者带来的风险都值姆班达卡100慕尼黑110得警惕，异宠贸易带来生态及安全隐患如常见的巴纽波特100西红耳龟就被列为全球最危险的入侵物种之浦那100［11］一。红耳龟其多种致病性血清型沙门氏菌携带圣保罗000率高，可通过水生生态系统传播，威胁人类的健圣地亚哥110［12］康。近年来，中国海关及其相关执法部门针对鼠伤寒310走私濒危野生动植物的行为加大了打击力度，其中鼠伤寒(H2－)110斯坦利3102018年5月，广东查获了绿鬣蜥628只、豹纹陆龟汤卜逊30030只;2019年9月21日东兴海关缉私分局捣毁一［13］旺兹沃思010个鳄鱼走私窝点，现场查获暹罗鳄活体806条。维尔肖100这使得我国外来爬行动物有携带沙门菌输入性的胥伐成格隆100风险得到一定的控制。乙副爪哇变异型100通过调研发现爬行动物沙门氏菌检出全部阴印第安纳100长湾尼020性的饲养方法是饲料+益生菌。而投喂生料的龟总计35171能检出沙门氏菌，每一年的沙门氏菌的血清型都不一样，在龟体内定殖的菌会由于喂养的生料的带菌3讨论与结论情况不一样而不同。有研究发现用含有枯草芽孢［7］最新公布的沙门菌血清型共2659种，沙门杆菌的(UD1022)这种益生菌的水灌溉生菜，可菌通常在爬行和哺乳类动物的肠道中留存，再通过以让鼠伤寒沙门菌在生菜叶片内的含量大大减［14］粪便污染水源土壤使其通过外环境的生态循环，广少。［8］泛分布在大自然中。因此，应加强爬行动物沙因此，国内需要与时俱进制定更先进、更全面门菌生态学监测，预防与沙门菌相关的疾病暴发。的沙门菌检测技术来加强爬行动物沙门菌的监测。为了满足众人对观赏爬宠的需求，市面上许多建议国内监管部门需尽快制定相关法律法规，如禁品种均为外来物种，经近5年的时间调研、采样，发止蛇鳄龟和红耳龟的进口，从源头上降低入侵概

340广西畜牧兽医2023年Vol．39(1)［15］率。参照美国食品药品监督管理局禁止小乌龟联盟丁酉年岁末公开已收录的133种沙门菌血清［EB/的商业流通［16］，加强已有的龟鳖养殖单位、销售市OL］．(2018－02－11)［2019－12－20］．https://mp．weixin．qq．com/s/KONB5－HoKMMJsH_AXyDG9gQ．场的管理。根据美国方法，给消费者提供有关爬行［8］朱超，许学斌．沙门菌属血清型诊断［M］．上海:同济动物相关沙门菌病危险性和预防办法是在销售点［17］大学出版社，2009:87－88．分发宣传相关资料。加大外来物种危害的宣传［9］胡海．养好宠物龟手绘图鉴［M］．北京:化学工业出力度，杜绝宠物弃养。用于食物或作为宠物的龟可版社，2018:63－38．能是一个重要的沙门菌储液槽，因此在处理和处置［10］食品伙伴网．欧盟制定爬行动物肉产品中沙门氏菌标过程中需要采取预防措施方可降低沙门菌病的风准．［EB/OL］．［2020－02－18］．http://exim．food-［18］险。将宠物细菌病纳入全国细菌疾病监测网mate．net/news/2020/02/550393．html．［19］络，有利于完善全国细菌病预警系统;严控宗教［11］杜治平，刘媛．野生动物异域宠物贸易猖獗［J］．生放生等活动;同时，加强爬行动物体内沙门菌源头态经济，2019，35(05):5－8．调研，从源头上改变饲养的爬行动物携带沙门菌。［12］沈兰．入侵物种红耳龟沙门氏菌携带率及对环境影响的研究［D］．海南:海南师范大学，2011:10－24．参考文献［13］广西新闻网．南宁海关破获一起重大走私鳄鱼案成功［1］MerminJ，HutwagnerL，VugiaD，eta1．Ｒeptiles，amphibi-解救活体暹罗鳄806条．［EB/OL］．［2019－10－21］．ans，andhumanSalmonellainfectin:apopulation－based，http://pic．gxnews．com．cn/staticpages/20191021/ne-case－controlstudy［J］．ClinInfectDis，2004，38Suppl3:wgx5dad26ff－18752455．shtml．S253－261．［14］Johnson，N;Litt，PK;Kniel，KE;Bais，H:EvasionofPlant［2］BottichioL，WebbLM，LeosG，etal．Notesfromthefield:InnateDefenseＲesponsebySalmonellaonLettuce［J］．salmonellaoranienburginfectionlinkedtoconsumptionofFrontiersinMicrobiology．2020;11:500．rattlesnakepills–kansasandTexas，2017［J］．MMWＲ［15］赵虎，王启军，邓捷，等．陕西渭河流域龟鳖类外MorbMortalWklyＲep，2018，67(17):502–503．来物种调查及风险分析［J］．野生动物学报，2021，42［3］SakaguchiK，NevarezJG，DelPieroF，eta1．Salmonella(04):1202－1205．entericaserovarPomonainfectioninfarmedjuvenileAmeri-［16］DeJongB，AnderssonY，EkdahlK．Effectofregulationcanalligators(Alligatormississippiensis)［J］．VetPathol，andeducationonreptile－associatedSalmonellosis［J］．2017，54(2):316–319．EmergInfectDis，2005，11(3):398－403．［4］Waldram，Alison，Dolanetal．Epidemiologicalanalysisof［17］龚震宇，龚训良，张见麟．1996～1998年美国若干州爬Salmonellaclustersidentifiedbywholegenomesequen-行动物相关的沙门氏菌病概况［J］疾病监测，2000，cing，EnglandandWales2014．［J］FoodMicrobiol．2018;(11):437－438．71:39－45．［18］ZhangJ，KuangD，WangF，etal．TurtlesasaPossible［5］王闻卿，房华，崔琪奇，等．上海市首次宠物龟暴露致ＲeservoirofNontyphoidalSalmonellainShanghai，China．幼儿感染波摩那沙门菌病例调查．［J］疾病监测，2020，FoodbornePathogDis．2016;13(8):428－433．35(10):957－960．［19］焦新安，黄金林．宠物重要人兽共患细菌病流行现状［6］王鸣柳，林玫，周凌云，等．主要爬行动物来源沙门菌及其控制策略［J］．中国比较医学杂志，2010，20(Z1):血清型分布及耐药特征分析［J］．中国媒介生物学及控59－64．制杂志，2015，26(03):266－270．［7］菌学联盟．舌尖中国之沙门菌的食菌同源—祝贺菌学