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《膀胱移行细胞癌pten蛋白异常表达研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、膀胱移行细胞癌PTEN蛋白异常表达研究作者：张大虎,郭永连,张小平,王志新,石涛,冯强,陈怀波,丁志勇 [摘要]目的:探讨PTEN蛋白在膀胱移行细胞癌（BTCC）中的表达及其生物学特征的相关研究。方法:SP法检测BTCC标本中PTEN的表达，并分析其与肿瘤病理分型和临床分期之间的关系。结果:64例BTCC组织中23例(36.0%)PTEN蛋白表达阳性，其表达率随肿瘤细胞病理分级、临床分期的增高而降低(P<0.05)。结论:PTEN基因异常表达在BTCC的进展中有重要作用,检测PTEN的表达有助于判断病情与预后。 [关键词]膀胱移行细胞癌;PTEN蛋白;免疫组化Abstract:
2、ObjectiveToinvestigatetherelationshipbeta.MethodsExpressionofPTENprotEinensbyusingSPimmunohistochemistry,theclinicalstageandpathologicaltypeors,theloalexpressionofPTENmayplayanimportantroleinthedevelopmentofBTCC,examinationofPTENmightbeusefulforthejudgementoftumordevelopmentandprognosis. Keya;P
3、TENprotein;Immunohistochemistry 膀胱移行细胞癌(BladderTransitionalCellCarcinoma,BTCC)是泌尿系最常见肿瘤，易出现复发、多发、局部浸润和远处转移,故其生物学行为难以预计，有人认为与抑癌基因的失活和突变有关。其中人类第10号染色体上的磷酸酶基因(phosphataseandtensinhomologydeletedonchromosometen,PTEN）是迄今为止第一个具有双特异磷酸酶活性的抑癌基因[1],亦发现其在BTCC中的丢失或灭活与肿瘤的级别明显相关[2]。我们采用免疫组化方法检测了64例BTCC组织中PTE
4、N的表达情况,探讨其与BTCC生物学行为发生发展的关系，以期为BTCC基因治疗提供一定的依据。 1材料与方法 1.1病例选择 2000年4月~2005年5月本院手术切除且经病理诊断的原发性BTCC组织石蜡标本64例，其中男55例,女9例，年龄介于37～82岁之间,平均61.9岁。所有病例术前均未作任何治疗。病理分级按标准,T123例,T225例,T312例，T44例。同时取癌旁非癌组织20例和正常组织10例固定、包埋。 1.2试剂鼠抗人PTEN单克隆抗体（一抗,美国AntibodyDiagnostica公司）,SP试剂盒(即用型，二抗)、DAB酶底物显色试剂盒（美国Maxim公
5、司）。 1.3免疫组化SP法检测PTEN石蜡切片厚4μm，65℃烘烤脱蜡，3％过氧化氢灭活内源性过氧化酶8min,用10%羊血清封闭10min,加入一抗，湿盒中4℃过夜；加入通用型生物素化（SP）二抗,37℃孵育30min,加入辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素，37℃孵育30min,DAB显色，苏木素复染，封片。用正常兔血清代替一抗作阴性对照，以已知阳性乳腺癌作阳性对照。结果判定标准:PTEN阳性染色为肿瘤细胞膜及细胞浆内见棕褐色颗粒,根据癌细胞染色程度、范围和分布的不同进行判断、评分。阴性(-):整个切片未见棕色颗粒细胞;弱阳性(+):阳性细胞<25%;中度阳性(++):阳性细
6、胞26%～50%;强阳性(+++):阳性细胞>50%。 1.4统计学处理 所有数据用SPSS10.0软件进行统计学分析，以Spearman和Ridit分析法，P<0.05作为显著性差异标准。 2结果 2.1PTEN蛋白的表达及定位PTEN蛋白着色大多位于细胞质,极少数在细胞膜,细胞核无表达,所有癌旁组织及正常组织均有广泛黄染,呈阳性和强阳性表达，其阳性率可达75％、100％；在BTCC中的阳性表达也位于细胞质，极少数位于细胞膜，但呈现不规则的弱阳性反应，阳性率仅为3593％,与癌旁组织及正常组织之间存在显著性差异（P<0.01），见表1。表1PTEN基因表达与
7、BTCC生物学特征的关系（略） 2.2PTEN蛋白表达与BTCC生物学特征的关系 肿瘤临床分期Spearman分析显示，T1+T2期PTEN阳性率（83.61%）大于T3+T4期（33.33%）(P<0.05)，表明BTCC的表达随分级的增加而呈下降趋势；病理分级也显示，BTCCⅠ级与Ⅲ级、Ⅱ级与Ⅲ级间存在差异(P<0.05),但Ⅰ,Ⅱ级之间无差异(P>0.05)，PTEN阳性率在Ⅰ,Ⅱ级显著高于Ⅲ级(P<0.05)
