资源描述：
《原发性肝癌组织中肝素酶表达与肝癌侵袭 转移关系的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、原发性肝癌组织中肝素酶表达与肝癌侵袭转移关系的研究.L.编辑。作者：罗志强刘锋邵江华邬林泉【摘要】目的探讨乙酰肝素酶(HeparanaseHpa)在肝癌中的表达及其与肝癌临床病理特征的关系。方法分别采用RT-PCR和免疫组织化学法检测HpamRNA及Hpa蛋白在肝细胞肝癌、癌旁肝组织及肝癌细胞株中的表达。结果肝癌HpamRNA和蛋白的表达显著高于癌旁及正常肝组织(P<0.05),肝癌组织中HpamRNA的表达与TNM分期、Edmondson分级和复发有关(P<0.05)。结论HpamRNA及蛋白在肝癌中高表达,并
2、与肝癌的侵袭转移、复发、预后有关。【关键词】肝细胞肝癌乙酰肝素酶侵袭转移复发【Abstract】ObjectiveThemainaimofthisinvestigationistoexploretheexpressionofheparanasemRNAandprotEininhepatocellularcarcinoma(HCC)anditsrelationshiperasechainreaction(RT-PCR)andimmunohistochemicalstainingRNAandprotEIninnormalhepa
3、tictissues,tumortissuesandadjacenttissuesofhepatocellularcarcinoma.ResultsTheexpressionofHpamRNAandproteininHCCtissuesalhepatictissues(P<0.05).Itondson-Steiner’sclassification(P<0.05).ConclusionOverexpressionoftheheparanasemRNAandproteinrelatestotheinvasion,m
4、etastasis,recurrenceandprognosisofhepatocellularcarcinoma.【KeyaHeparanaseInvasionMetastasisRecurrence乙酰肝素酶(heparanase,HPA)是1999年克隆分离出的一种葡糖苷酸内切酶。它可降解硫酸乙酰肝素(hearansulfate,HS),破坏细胞外基质和血管基底膜,并促进肿瘤新生血管生成,使肿瘤细胞实现侵袭转移。作者运用RT-PCR和免疫组织化学法对HpamRNA及Hpa蛋白在肝细胞肝癌、癌旁肝组织及肝癌细胞株中的表达
5、进行检测,检测33例原发性肝细胞肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)标本中HPA的基因表达,并结合病人的临床病理学和随访资料,以探讨HPA可否作为HCC转移潜能的可靠标志。1临床资料1.1一般资料新鲜冷冻的标本取自2005年8月至2006年4月南昌大学第二附属医院普外科手术切除并经病理学检查证实的33例HCC(包括癌和癌旁肝组织)和9例肝脏良性肿瘤(取瘤旁肝组织作正常对照)。收集病人临床病理学检查资料,HCC组中男28例,女5例;年龄29～73岁,平均49岁。28例术后6～16个月内获得随访,占85
6、%(28/33)。根据手术记录、术后病理学检查报告等,将有癌栓、肝内播散即卫星癌灶和(或)淋巴结转移的14例HCC病人定为高转移复发倾向组。反之,无癌栓、肝内卫星癌灶和(或)淋巴结转移的19例HCC病人为低转移复发倾向组。其中癌灶长径≤5cm8例,＞5cm25例;癌灶包膜完整14例、不完整19例;甲胎蛋白(AFP)阳性26例、阴性7例;HBsAg阳性27例、阴性6例;合并明显肝硬化18例、无明显肝硬化15例;肿瘤EdmondsonⅠ、Ⅱ级13例、Ⅲ、Ⅳ级20例;TNMⅠ、Ⅱ期18例、Ⅲ、Ⅳ期15例。随访有和无转移复发各14例
7、。肝脏良性肿瘤9例中男4例,女5例;年龄32～65岁,平均41岁;其中肝海绵状血管瘤8例、肝局灶性结节性增生1例。1.2总RNA提取和半定量RT-PCR检测Trizol总RNA分离试剂盒(Gibco)Trizol一步法提取组织总RNA,甲醛变性胶电泳鉴定及紫外分光光度仪测定OD值后,逆转录合成cDNA。AMV为TaKaRa公司产品,dNTP购自上海生物工程公司。HPA引物参照3讨论 在生理状态下,乙酰肝素酶(Hpa)主要分布在胎盘、脾脏、血小板及中性粒细胞、单核细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞等免疫细胞内,在肝脏、肾脏及胰腺等
8、均不表达。研究发现Hpa在结肠癌、肝癌、卵巢癌、子宫内膜癌等［２，３］多种恶性肿瘤细胞中异常高表达,而相应的正常组织不表达。本实验结果显示,肝癌组织HpamRNA及Hpa蛋白的表达显著高于癌旁肝组织及正常肝组织(P<0.05),正常肝组织不表达,与
