病理实验流程

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1、Pathology病理学病理实验室工作流程、相关技术简介PathologyPathology一、工作流程工作流程Pathology二、工作制度标本接收与清点制度制片读片资料管理制度仪器设备维修和保养制度Pathology标本接收与清点制度接收-核对-签收-编号-取材登记记录-扫描-录入Pathology资料管理制度玻片-蜡块-申请单-报告单-登记本Pathology三、相关技术简介1.常规H.E染色制片技术即常规石蜡包埋切片技术，将所研究的组织用固定液固定，再经过水洗、梯度乙醇脱水、二甲苯或TO透明剂透明、浸蜡等处理，然后用石蜡包埋剂支持组织进行切片、苏木素-伊红（H.

2、E）染色的技术。适用于没有特殊固定要求的一切组织；所获得的组织切片还可用于多种染色。Pathology注意事项：标本均需用固定液固定；大标本按自然状态切开固定，10倍体积的固定液；取材后立即投入固定液固定，72小时内制片最佳；取材大小：长2厘米，宽1.5厘米，厚3毫米；Pathology固定液的选择：无特殊要求-用10%中性福尔马林（甲醛）溶液固定。（37-40%原液低于15度久置变甲酸。通常取原液10ml加水90ml配成10%福尔马林液，实际上只有3.7-4%的甲醛浓度。免疫组化、原位杂交、FISH、突变、PCR效果好)；糖原、尿酸结晶-80～95%乙醇；脂肪、睾丸、

3、皮肤-Bouin液（1.22%饱和苦味酸水溶液75ml、甲醛液25ml、冰醋酸5ml）；磷酸酶、酯酶、氧化酶-丙酮；Pathology固定液的选择：皮下肥大细胞固定-AF液(95%乙醇90ml、甲醛液10ml）；电镜观察标本-2.5-4%戊二醛--保存蛋白质和核酸；（0.2mol/LPB50ml+25%GA12ml+双蒸水38ml-3%100ml）-0.1%四氧化锇--保存脂类。Pathology组织的处理（机器操作）：包括固定、脱水、透明、浸蜡和包埋，是制作优质切片的关键，一旦组织处理有欠缺，往往导致无法挽回的后果。（1）制片过程按操作流程进行。（2）包埋用石蜡必须过滤。

4、（3）试剂必须按要求及时更换。Pathology切片：•切片是制片技术中非常重要的环节。影响切片质量的因素很多;•组织块固定、脱水、透明和浸蜡的质量直接影响切片的质量；•优质的切片机是制备优质切片的重要前提；•对技术人员的技能要求也很高，即使是同一蜡块，使用同一台切片机和同一切片刀，不同的操作者也会切出不同质量的片子。Pathology切片：(1)切片刀必须锋利，切片过程中用力均匀；切片厚度以4µm为宜。切片必须完整，无污染、皱褶和刀痕。(2)组织片贴附应在除去标签位置后居玻片的中间，各块组织的方向应一致。(3)小活检组织须做间断连续切片。Pathology染色封片：(1)

5、烤片温度应在60~62℃左右，不得高于65℃，时间不能少于20min。(2)染色试剂必须根据切片染色质量按要求及时更换。(3)切片封固前必须经乙醇充分脱水、二甲苯透明，湿封。不得用温箱烤干或用电吹风吹干后封片。(4)盖玻片使用前必须清洗(真空包装除外)。(5)封片时不应有气泡，不得有树胶外溢。Pathology其他：标签必须贴于玻片左侧，必须确保载玻片上的病理编号与相关组织蜡块的病理号完全一致。编号字迹必须清楚、整齐，且不易褪色，有条件者尽量采用打印标签。Pathology三、相关技术简介2.冷冻切片技术是采用冷冻的方法将未经固定处理的组织切成薄片，然后快速染色制片以进行病

6、理诊断。Pathology特殊检查需要：当某些特殊检查需要保持组织的抗原性或酶的活性不被破坏时、或某些细胞成分在常规染色时无法显示时，也需采用冷冻切片技术。例如:确定细胞内脂肪作特殊染色时，需要作冷冻切片；肾穿刺活检的荧光标记；酶组织化学或某些特殊抗原的免疫组化检测等，也需要作冷冻切片。Pathology局限：病灶或组织过小(一般小于0.2cm)和含水量较多的脑组织标本。此类标本因取材破碎、量少，常影响冷冻制片质量。已知传染性疾病(例如结核病、AIDS、病毒性肝炎)标本。此类标本一般不宜作冷冻切片检查，应待组织固定后再行常规制片处理。Pathology冷冻切片检查的工作程序

7、（1）申请：提前一天向病理科提出书面申请；（2）标本处理：技术员接收标本后应于15~20min内制成切片交病理医师阅片。切片应立即贴上有编号的标签。同一组织可视诊断需要切2~3张空白片备用；已冷冻的组织应保留于切片机的“冷冻头”上，待诊断确立后再取下；（3）诊断一经确定，标本应立即固定。冷冻取材后剩余的标本称“冷剩”(留作染色）。申请单上必须注明编号，放置“冷剩”标本的容器应标明患者姓名及编号，以便查对；Pathology冷冻切片检查的工作程序（4