血小板膜糖蛋白ⅱb-ⅲa受体拮抗剂rgds对血小板释放反应的影响

《血小板膜糖蛋白ⅱb-ⅲa受体拮抗剂rgds对血小板释放反应的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板释放反应的影响：谢双锋，尹松梅，杨国雷，聂大年，李益清，王秀菊，马丽萍，吴裕丹王景峰【摘要】【目的】观察血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa（GPⅡb/Ⅲa）拮抗剂——四肽Arg-Gly-Asp-Ser（RGDS）对血小板聚集和CD62p表达的作用，探讨RGDS对血小板聚集和释放反应的影响。【方法】检测二磷酸腺苷(ADP；终浓度5μmol/L，下同）诱导血小板聚集的最大聚集率（rPA,max）、静息血小板和ADP诱导的血小板CD62p表达，检测不同浓度RGDS对ADP诱导的rPA,max的抑制率和血小板CD62p表达的抑制率

2、，进行回归分析。【结果】5种浓度（50、100、200、400、800μmol/L）的RGDS对rPA,max均有显著抑制作用。正常人静息血小板CD62p表达率为(3.5±0.6)%；ADP激动的血小板CD62p表达率为(65.6±13.8)%，两组比较有显著性差异（P<0.01）；50、100μmol/L的RGDS对血小板CD62p表达无抑制作用；当RGDS浓度≥200μmol/L时（200、400、800μmol/L），其可抑制血小板CD62p的表达；RGDS对rPA,max的抑制作用和其对血小板CD62p表达的抑制作用相关。【结论】RGDS浓度＜20

3、0μmol/L时，对ADP诱导的血小板释放反应无影响；RGDS浓度≥200μmol/L时，可抑制ADP诱导的血小板释放反应；与RGDS显著的抗聚集效应相比，其对血小板释放反应的影响比较小；RGDS抑制血小板释放反应的作用与其抗血小板聚集有关。【关键词】血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa；受体拮抗剂RGDS；CD62p[JSUNYat-senUniv(MedSci),2007,28(2):192-195]基础和临床实验均证明了血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa（GlycoproteinⅡb/Ⅲa,GPⅡb/Ⅲa）受体拮抗剂强大的抗血小板聚集作用[1]，但其对血小板释放反应的作用尚不明

4、确，相关研究无统一结论。我们通过观察不同浓度的GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂——四肽Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)对血小板聚集和CD62p表达的影响，探讨GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板释放反应的影响。1材料与方法1.1标本2006年1月-2006年10月于我院体检中心体检的健康者15人，20～40岁，性别不限，近1个月无用药史；排除冠心病、高血压、糖尿病患者及妊娠女性。空腹12h后肘静脉采血，柠檬酸葡萄糖液（acidcitratedextrose,ACD）抗凝，抗凝液与血液体积比例为1：6。1.2实验方法1.2.1血小板最大聚集率(maximal

5、plateletaggregation,rPA,max)的测定ACD抗凝静脉血，150g离心8min，吸取富血小板血浆，再以650g离心10min；弃去上清液，加入含1g/L的牛血清白蛋白的羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）缓冲液吹散沉淀，调整血小板数于(200～300)×109/L，每次测试取190μL，加入诱导剂二磷酸腺苷（ADP）（二磷酸腺苷购自美国Sigma-Aldrich公司，本文中ADP终浓度均为5μmol/L）；在TYXN-91智能血液凝集仪（上海通用机电技术研究所产品）连续测量并记录血小板聚集5min，以rPA,max为观察指标[12]。1.2.2血

6、小板膜糖蛋白CD62p测定ACD抗凝静脉血，分成每份90μL，加入ADP孵育5min，实验组加入CD62p:PE、CD61:PerCP，对照组对应加入MouseIgG:PE、CD61:PerCP染色，室温下作用20min，立即加入2～8℃的甲醛溶液1mL，置2～8℃冰箱内固定30min，24h内上机检测；每次检测取5μL标本，以CD61:PerCP和SSC双参数设门，检测CD62p阳性血小板的百分率。1.2.3RGDS对rPA,max作用制备处理标本同1.2.1加入诱聚剂ADP之前，先加入不同浓度的RGDS于37℃孵育2min，其余各步骤相同。rPA,max抑制

7、率＝[（对照组rPA,max－RGDS用药后rPA,max）/对照组rPA,max]×100%。1.2.4RGDS对血小板CD62p表达率的作用制备处理标本同1.2.2，静息组不加ADP直接测定，对照组加入ADP，RGDS用药组加入不同浓度的RGDS于37℃孵育10min后加入ADP；其余各步骤相同。CD62p表达抑制率＝[（对照组CD62p表达率－RGDS用药后CD62p表达率）/对照组CD62p表达率]×100%。1.3统计分析采用统计软件SPSS11.0进行数据分析，正常人静息状态下和ADP激动后血小板CD62p表达的比较采用随机化配对设计资料均数的t检验

8、；各浓度RGDS孵育前后