黄芪多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用论文

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1、黄芪多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用论文隗义双余嗣明刘平周乾坤【摘要】目的：研究黄芪多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的治疗保护作用。方法：利用线栓法阻断大脑中动脉（MCAO）制作大鼠局灶性缺血再灌注脑损伤模型，并将实验大鼠随机分假手术组，模型组，黄芪多糖低、中、高剂量组，于再灌后第1天、第3天、第7天处死取材，检测各组大鼠脑组织含水量、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）变化情况，辅以氯化三苯四氮唑（TTC）染色观察脑梗死灶变化情况。结果：与假手术组比较，模型组脑组织含水量及MDA含量显

2、著升高.freelia-ReperfusionInjuryinRats【Abstract】Objective:TostudytheprotectiveeffectofAstragaluspolysaccharideonfocalcerebralischemia-reperfusioninjuryinrats.Methods:Themodelsoffocalbrainischemia-reperfusioninjuryiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)inSD-rats.

3、Theratslydividedintoshamoperationcontrolgroup,modelgroup,loiddleandhighdosedruggroup,aftertreatmentthebraineasuredatthefirst,thirdandseventhdayafterreperfusion.Therangeofcerebralinflarctoperationcontrolgroup,thebrainodelgroup.Thebrainiddle,highdosegroups

4、thanonesinmodelgroup.Conclusion:ProtectiveeffectofAstragaluspolysaccharideonfocalcerebralischemia-reperfusioninjuryinratsardablebyreducingthebrainia-ReperfusionInjury;SOD;MDA黄芪多糖（Astragaluspolysaccharide,.freelresco07/2010）；直径0.26mm鱼线（日本PATU公司）。1.1.3仪器72

5、00型紫外分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）；冷冻离心机（3K30sigma）；恒温培养箱（HPX-9272MBE常州诺基仪器有限公司）；玻璃匀浆器（上海仪器二厂）。1.2方法1.2.1分组与给药随机分为5组，分别为假手术组；模型组：黄芪多糖小、中、大剂量组；每组19只，药物组与手术后10分钟腹腔注射黄芪多糖（低0.5g·kg－1·d－1、中1g·kg－1·d－1、高2g·kg－1·d－1），由生理盐水配置，之后每天同样时间给药，模型组和假手术组在相应时间注射等体积生理盐水。分别与给药1天处死7只，3

6、、7天各处死6只。1.2.2大鼠MCAO再灌注模型制作利用改良Longa法2～3制作MCAO模型：术前禁食12h但不禁水。大鼠以10%水合氯醛0.36ml/100g腹腔注射麻醉，麻醉后仰卧固定，颈正中切口，依次分离暴露右侧颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）、颈内动脉（ICA）、0-3号丝线分别结扎CCA远心端、ECA，微型血管夹夹闭ICA，在CCA处剪一小口，将头端烧制圆钝的鱼线沿CCA插入ICA，鱼线插入18.5～20mm处感觉有明显阻力后停止进线，结扎ICA，固定鱼线，缝合肌肉、皮肤，体外留2c

7、m鱼线以备再灌。手术10min后腹腔注射黄芪多糖；缺血90mins后，轻轻拔出鱼线至遇到轻微阻力，实现再灌，剪去体外部分鱼线，待大鼠完全苏醒后进行神经行为学评分。假手术只分离CCA、ICA、ECA、腹腔注射等体积生理盐水。1.2.3神经行为评分参考Longa2～45分制评分标准：0分无神经缺损症；1分提尾时对侧前肢内收，不能完全伸直；2分爬行时向对侧旋转、划圈；3分站立时向对侧倾倒；4分无自主活动伴意识障碍；5分死亡。1～4分符合实验要求，剔除不符合实验要求的并加以补充。1.2.4脑组织含水量、SOD、

8、MDA的测定缺血再灌1天、3天、7天后分批处死迅速取脑，取右侧半脑二分之一用于计算脑含水量变化，称湿重于100℃烘箱内至恒重，脑含水量（%）=（湿重－干重）/湿重×100%。另二分之一制作脑匀浆，按照试剂盒说明书方法检测SOD、MDA。1.2.5脑组织切片TTC染色观察配置1%TTC磷酸缓冲液（pH7.4）；第一天处死的大鼠各组中取一只，迅速取脑放于－20℃冰箱中冷冻15min，切去嗅球和地位脑干，间隔2mm连续冠状切片6片，放入1%TTC