螃蟹脚黄酮类化合物提取工艺优化研究

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1、螃蟹脚黄酮类化合物提取工艺优化研究杨凤贤，向轶波，冯小飞，刘祥义【摘要】　　目的用乙醇提取螃蟹脚中总黄酮的最佳工艺。方法比较超声提取和回流提取实验，用比色法测定有效成分；采用回流提取正交实验，并对实验数据经不同的计算和分析比较优选螃蟹脚的提取工艺条件。结果总黄酮提取率是超声提取低于回流提取；实验数据经不同的数据处理方式得到不同的优化工艺条件。通过验证实验可得到重复的实验结果。结论实验结果用多元线性回归计算，可弥补正交极差、方差计算的不足，更有利于结果解释和工艺条件的优化。【关键词】正交设计螃蟹脚黄酮提取工艺　　Abstract：ObjectiveTooptimizetheextrac

2、tionprocessoftotalflavonoidsViscumarticulatumBurm.Methodsparedent，colorimetricanalysiseasurethecontentofactiveingredients.Besides，orthogonaldesignoftherefluentextractionizethetechnologiesofViscumarticulatumBurminparisonentalresults.ResultsTheextractionrateofthetotalflavonoidsoftheultrasonicumex

3、tractionprocessescouldbeobtainedbydifferententresultsbutthesameexperimentresultsultivariateregressionanalysiscanmakeupshortageofsense.Theequationofregressionismorehelpfulforexplanationofresultandoptimumofpreparationtechnology.　　KeyarticulatumBurm；Flavonoid；Extractionprocess　　螃蟹脚（扁枝槲寄生）Viscumart

4、iculatumBurm系桑寄生科槲寄生属植物，是一种寄生在树龄较高的古乔木茶树上的寄生物。螃蟹脚为多年生草本，形状像小珊瑚，因寄生枝杆节状带毫，故此被称为“螃蟹脚”。在缅甸，由于其特殊的地理位置和生态环境，千年古茶园里的古茶树上就寄生着“螃蟹脚”。主治风湿痹痛、腰膝酸软、胎动不安，与《中国药典》收载的“槲寄生”Viscumcoloratum（Kom.）Nakai具有同等功效〔1〕，同时还具有降压、抗心律失常、增加冠脉流量、改善冠脉循环、增强心脏收缩力、抗肿瘤、治疗肝炎等作用〔2〕。对于槲寄生属的研究，国内已对寄生在柿、栗、榆、桦、柳、枫、杨等树上的有报道和专利〔3～4〕，但迄今未见

5、对寄生在缅甸茶树上的螃蟹脚提取工艺优化研究的报道。　　经研究,槲寄生属的主要有效成分为黄酮类化合物和一些高分子化合物〔3～4〕，黄酮类化合物广泛存在于植物中，具有抗肿瘤、增强心血管功能、抑菌、抗病毒等作用，同时它还是一种天然的抗氧化剂〔5〕。本文以乙醇为溶剂，采用超声提取和回流提取两种方法，以总黄酮得率为指标进行比较。然后对回流提取的正交实验设计优选出螃蟹脚的最佳提取工艺，并对实验数据进行了极差、方差计算，经直观分析以及多元线性回归分析，计算机程序计算处理两种方法所优选工艺条件的比较，为合理筛选螃蟹脚的提取工艺提供科学依据。　　1仪器与试剂　　UV-22201型紫外分光光度计（日本岛

6、津公司），KESP-100KH超声波萃取器（深圳市科工达超声公司）。　　螃蟹脚采自缅甸，并经西南林学院资源学院植物学教研室鉴定。　　芦丁（供含量测定用），由中国医药（集团）上海化学试剂公司提供，所用试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1超声提取和回流提取的比较取3g样品，在50℃条件下以乙醇为提取溶剂，固液比1∶5。超声提取3次，30min/次；回流提取3次，2h/次。3次提取液分别合并至50ml容量瓶中，并用相应浓度的乙醇定容至刻度，使其作为供试品溶液。　　2.2正交实验（回流提取）供试品溶液制备按文献〔4〕的方法进行研究。　　2.3总黄酮的测定　　2.3.1标准曲线的制备按文

7、献〔5〕方法，以50%乙醇溶液为空白，测定吸收度，得回归方程为A=10.395C+0.0157，r=0.9999。　　2.3.2含量测定方法取上述供试液，按文献〔5〕方法进行研究，计算即得总黄酮的含量。　　2.3.3正交实验显色稳定性取上述供试液按文献〔6〕方法进行研究：RSD=0.97%，tn=3h。加样回收率的测定：X=99.07%，RSD=3.75%，n=9。　　2.4超声提取和回流提取总黄酮结果见表1。　　表1超声提取和回流提取总黄酮的结果（略）