融合基因gmcsfbzlf1重组腺病毒表达载体的构建的论文

《融合基因gmcsfbzlf1重组腺病毒表达载体的构建的论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、融合基因GMCSFBZLF1重组腺病毒表达载体的构建的论文融合基因gmcsfbzlf1重组腺病毒表达载体的构建【关键词】疱疹病毒4型，人;粒细胞巨噬细胞集落刺激因子;基因，即早;基因融合;遗传载体【摘要】目的构建粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gmcsf)和eb病毒即刻早期基因(bzlf1)融合基因的重组腺病毒表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应分别获得gmcsf和bzlf1编码序列的cdna，应用剪接式重叠延伸(soe)技术将两段基因通过多肽接头(gly4ser)3的dna序列进行连接，构建融合

2、基因gmcsfbzlf1。将融合基因gmcsfbzlf1定向亚克隆至padtrackcmv质粒，在原核细胞e.colibj5183中完成穿梭质粒与骨架质粒padeasy1的同源重组，构建融合基因gmcsfbzlf1真核表达载体padgmcsfbzlf1。将真核表达载体padgmcsfbzlf1转染293细胞，获得复制缺陷型重组腺病毒vadgmcsfbzlf1。rtpcr鉴定感染重组腺病毒的293细胞中gmcsfbzlf1基因的表达。结果gmcsfbzlf1基因插入重

3、组腺病毒表达载体的预期位置，且插入序列完全正确;感染重组腺病毒vadgmcsfbzlf1的293细胞中检测到融合基因gmcsfbzlf1的转录表达。结论成功地构建了融合基因gmcsfbzlf1重组腺病毒表达载体，为进一步探讨gmcsfbzlf1的功能提供了理论基础和实验依据。.cOm【关键词】疱疹病毒4型，人;粒细胞巨噬细胞集落刺激因子;基因，即早;基因融合;遗传载体　constructionofrebinantadenovirusexpressionvectorencodinggmcsf

4、bzlf1fusiongenecuiying,edicalcollege,qingdao266021,china);[abstract]objectivetoconstructhumangranulocytemacrophagecolonystimulatingfactor(gmcsf)geneandebvencodingimmediateearlygenes(bzlf1)fusedtogmcsfbzlf1geneandthefusiongenerebinantadenovirusexpressi

5、onvector.methodsgmcsfcdnaandbzlf1cdnacsfbzlf1csfbzlf1vplasmid.theshuttleplasmidandthebackboneplasmidpadeasy1ologouslyine.colibj5183cells,thenfusiongeneeukaryoticexpressionvectorpadgmcsfbzlf1csfbzlf1vectorcsfbzlf1.rtpcrcsfbzlf1in293cellsinfec

6、tedcsfbzlf1.resultstheresultofdnasequencingdemonstratedthatgmcsfbzlf1geneinsertedintheexpectedsiteintherebinantadenovirusexpressionvectorandtheinsertionsequencecsfbzlf1couldbedetectedinthe293cellsinfectedcsfbzlf1.conclusionthefusiongenegmcsfbzlf1r

7、ebinantadenovirusexpressionvectorhasbeenconstructedsuccessfully,ightfurnishtherationaleandexperimentalevidenceforfurtherstudyonthefunctionofgmcsfbzlf1gene.　　[keyan;granulocytemacrophagecolonystimulatingfactor;genes,immediateearly;genefusion;geicvectors

8、　　eb病毒(ebv)是嗜b淋巴细胞的疱疹病毒，为致瘤病毒之一。文献报道，该病毒与多种人类恶性肿瘤如burkitt淋巴瘤、鼻咽癌(npc)、霍奇金病、免疫缺陷病人的b淋巴细胞瘤及胃癌等发生有关[14]。hoshikacsf)主要由t细胞和巨噬细胞产生，是一种具有多种生物学活性的细胞因子，将gmcsf基因转入肿瘤细胞内，可以提高其免疫原性从而诱导有效的抗肿瘤免疫应答[6]。本研究拟将gmcsf