精氨酸对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响论文

《精氨酸对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、精氨酸对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响论文【摘要】目的:探讨左旋精氨酸与急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的关系.方法:以蛙皮素制造AP模型，观察不同剂量LArg治疗AP大鼠后，胰腺组织中一氧化氮合酶（NOS）活性、一氧化氮(NO)的含量、胰腺腺泡细胞凋亡及胰腺组织病理改变.结果:AP胰腺组织中NOS活性较正常胰腺组织中升高，而此时胰腺组织NO浓度反而降低，低剂量LArg（75,150mg/kg）使胰腺组织中NO浓度升高致接近正常组水平，促进了胰腺腺泡细胞凋亡，减轻胰腺病理损害；高LAr

2、g剂量（1200,2400mg/kg），胰腺组织中NO浓度升高超出正常组.freelg/kg体质量治疗组（D,E,F,.freela公司,左旋精氨酸(LARG)购自上海信谊制药厂,经生理盐水稀释为25%溶液后使用,原位凋亡检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司).1.2方法1.2.1模型制备与用药所有实验动物术前12h禁食，自由饮水，称取体质量后，50g/L戊巴比妥（4mL/kg）肌肉注射麻醉.以腹腔内注射蛙皮素50.0μg/kg,1次/h,连续2次,制造AEP模型,假手术组注射生理盐水.4h后经颈静

3、脉注射LArg(上海信谊制药厂批号990302，经生理盐水稀释为25%溶液后使用).其后12h采取断颈方法处死动物，剖腹取材.所取胰腺组织分成两部分：一部分以40g/L甲醛固定，用于胰腺组织形态观察，并用TUNEL方法检测胰腺组织细胞凋亡；一部分制成匀浆，-20℃保存，用于测定胰腺组织ＮＯＳ活性、ＮＯ２－／ＮＯ３－浓度.1.2.2观察指标①采取相同部位的胰腺组织固定于40g/L甲醛溶液，常规方法制作病理切片，HE染色，光镜下观察.胰腺炎组胰腺组织呈炎性改变.对照组胰腺组织细胞正常.采用改良Gre.④取

4、胰腺组织２００ｍｇ，加入ＰＢＳ缓冲液（０.０２ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ７.４）匀浆至２ｍL，离心后取上清０.１ｍL，以酶法（南京建成生物制品研究所试剂盒），按说明书步骤测定ＮＯ２－／ＮＯ３－浓度，间接反映ＮＯ浓度.统计学处理:所有实验结果以x±s表示，组间比较采用SPSS8.0统计软件作单因素方差分析及两两比较.P0.05认为具有统计学意义.２结果2.1病理观察正常组胰腺肉眼及光镜下均未见明显病理变化，AP组胰腺组织中炎症细胞浸润，腺细胞肿胀，点状坏死，间质水肿.胰腺组织光镜下病理评分见表1.AP及各治疗组中组

5、病理评分高于正常组（P0.05），其中D,E,F组明显低于B组，而H,I组高于B组.表1胰腺组织光镜下病理评分（略）2.2胰腺组织中NOS活性、ＮＯ２－／ＮＯ３－浓度、腺泡细胞凋亡AP及各治疗组中组NOS活性高于正常组（P0.05），各组间NOS活性无统计学差异（P0.05）.B,C组ＮＯ２－／ＮＯ３－浓度明显低于A组（P0.05），LArg治疗组ＮＯ２－／ＮＯ３－浓度，均高于正常及AP组（P0.05），其中H,I组分别高于D,E组；AEP及各治疗组中组凋亡指数高于正常组（P0.05），其中D,E,F

6、,G组AI高于B组，而H,I组AI低于B组（P0.05,表2）.表2各组胰腺组织中NOS水平、ＮＯ２－／ＮＯ３－浓度、腺泡细胞凋亡指数（略）3讨论AP是普外科临床的常见急腹症之一,近年来发病率逐渐升高,临床表现凶险,常合并器官功能障碍，病死率高，目前仍属于难治性疾病之一.一般认为,胰腺炎发生后出现的炎性细胞聚集和炎性介质(即所谓“瀑布样效应”)是影响胰腺炎病情的主要因素.然而，最新的研究报告指出,胰腺炎发生时最早的病理变化出现在胰腺腺泡细胞内,腺泡细胞本身对损伤的反应是决定“瀑布样效应”程度及病情轻重的

7、决定性因素之一.AP时，胰腺细胞受损，细胞存在凋亡和坏死两种不同的死亡形式，其中腺泡细胞凋亡是机体的一种自我保护机制.AP时，受损的胰腺腺泡细胞发生死亡，如果以坏死方式进行，细胞内多种成分（多种酶原、细胞器等）释放出来，会产生“瀑布样效应”，并伴随剧烈的炎症反应，从而诱发急性重症胰腺炎，致敏的中性粒细胞和大量的炎性介质造成机体产生全身炎性反应综合征（SIRS）如不及时终止其发展，则可进一步导致多脏器功能不全综合征（MODS），甚至多脏器功能衰竭（MOF）.坏死细胞越多，则胰腺炎病情越重.如果受损的胰腺腺

8、泡细胞以凋亡方式进行，细胞内多种成分不外泄，形成凋亡小体，被巨噬细胞等吞噬周围炎症反应轻，胰腺炎病情较轻［5］.本研究结果证明在凋亡指数低,胰腺病理损害较严重，如果能调控凋亡的强弱,有可能在急性胰腺炎的治疗方面开辟一个新的领域.本研究表明，急性水肿性胰腺炎（AEP）时胰腺组织中NOS活性较正常胰腺组织中明显升高，而此时胰腺组织NO浓度反而降低，提示胰腺组织NO浓度降低是由于作为NO惟一供体的LArg耗竭引起的.我们采用剂量呈倍数梯度增加的