大黄牡丹汤组方对急性胰腺炎模型大鼠腺泡细胞分泌功能的影响-论文.pdf

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1、第31卷第3期实验动物科学VOI_31NO．32014年6月LAB0RAT0RYANIMALSCIENCEJune2O14驴告报究研驴护大黄牡丹汤组方对急性胰腺炎模型大鼠腺泡细胞分泌功能的影响张延英舒畅蔡兴吴建军张艳霞王茸李存祥康万荣王荣(1．甘肃中医学院／甘肃省中药药理与毒理学重点实验室／甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室，兰州730000)(2．甘肃省分析测试中5'／甘肃省实验动物管理委员会，兰州730000)摘要：目的研究大黄牡丹汤组方(RPDP)对急性胰腺炎(Acutepancreatiti

2、s，AP)模型大鼠胰腺腺泡细胞外分泌功能和腺泡细胞内钙离子浓度(FI)的影响。方法SD大鼠灌胃RPDP以制备大黄牡丹汤组方含药血清(RPDP—S)；SD大鼠分为假手术组和AP模型组，分离胰腺腺泡细胞并与RPDP—S共同孵育，测定腺泡细胞淀粉酶分泌水平和FI变化。结果AP模型大鼠腺泡细胞分泌淀粉酶水平较假手术组显著升高(P<0．05)，经RPDP—S处理的AP模型大鼠腺泡细胞分泌淀粉酶水平显著降低(P<0．05)；FI随AP模型病程延长而升高(P<0．05)，RPDP-S可抑制AP模型大鼠腺泡细胞内FI升高(P<0

3、．05)。结论RPDP通能抑制AP大鼠胰腺腺泡细胞的外分泌功能，抑制腺泡细胞内钙离子的升高，降低腺泡细胞内FI超载。关键词：大黄牡丹汤组方；急性胰腺炎；胰腺腺泡细胞；AP模型大鼠；FI超载中图分类号：Q95—33文献标识码：A文章编号：1006—6179(2014)03—0026-04急性胰腺炎(Acutepancreatitis，AP)是一种胰酶许可证号：SYXK(甘)2011—0001；SPF雄性SD大鼠激活引起的常见急腹症之一，胰腺腺泡细胞内酶原120只，体质量2o0—260g。异常激活，胰腺局部炎症反应，

4、AP早期的主要病因1．2药物、主要试剂与仪器是胰酶异常激活引起胰腺自身消化，现今研究牡丹汤组方(RPDP)由甘肃省中药药理与毒理的热点之一是“腺泡细胞钙超载学说”，同行学者认学重点实验室浓缩成含4kg／L生药的液体。实验可度不断提高。中草药治疗AP的疗效得到国内用的多聚赖氨酸、伊格尔粉状固体培养基(DMEM)、外支持，大黄牡丹汤(RheumpalmatumLand胶原酶P、牛血清白蛋白组分V、Fluo一3／AM、大豆paeoniasuffruticosaandrewsdecoctionprescription，酶

5、抑制剂(SBTI)和CCK培由兰州硕达生物技术公RPDP)治疗AP模型大鼠机理还未系统阐明。本司购入，实验用的其他试剂是本实验室用分析纯试实验运用中药动物血清药理学方法，通过观测剂新鲜配置。实验用的普通光学显微镜、日产激光RPDP对胰腺腺泡细胞外分泌功能及腺泡细胞内钙共聚焦显微镜(LeicaTCSNT)、VELOCITY18R台离子浓度(n)的影响，进一步探索RPDP治疗AP式高速冷冻离心机、IX51研究级倒置显微镜、MCO．的作用机制。18AICCO：培养箱、荧光定量分析软件由本实验室提供。1材料和方法1．3大

6、黄牡丹汤组方含药血清fRheumpalmatumLandpaeoniasufrutieosaandrewsdecoction1．1实验动物prescriptionserum，RPDP-S)的制备SPF级实验动物和屏障实验室均由甘肃中医学取120只SD大鼠分为2组，其中RPDP灌胃组院提供，生产许可证号：SCXK(甘)2011—0001，使用(RPDP组)80只，生理盐水灌胃组(SLYS组)收稿日期：2014—05—05基金项目：甘肃省技术研究与开发专项(No．1305TCYA043)作者简介：张延英(1964一)

7、，男，硕士，副教授。研究方向：实验动物学。E-mail：780005161@qq．COB通信作者：蔡兴(1959一)，男，研究员，长期从事实验动物管理及分析测试研究。E-mall：cxir-g407@163．corn第3期张延英等：大黄牡丹汤组方对急性胰腺炎模型大鼠腺泡细胞分泌功能的影响·27·40只。灌胃前禁食禁水4h，其他时间正常供水和组分别用10％RPDP—S—M、10％SLYS—S—M和DMEM饲料。RPDP组灌胃RPDP煎剂，每13剂量为培养基重新悬浮，分别加入到多聚赖氨酸包被过的40g／kg(相当于1

8、0mL／kg)，此剂量相当于成人用孔板各孔内，置37~C5％CO培养箱培养6h，37oC药量的20倍；SLYS组大鼠灌胃等体积生理盐水。环境用fluo一3／AM(5p~mol／L)避光加载细胞30rain，每日2次，12h灌胃一次，连续给药7d。第7天灌清洗干净细胞外荧光，在激光共聚焦显微镜下于激胃1h后无菌操作采血，100r／min离心2min，取血发波长488—514