红参水提物人参总皂苷的大孔吸附树脂纯化研究论文

《红参水提物人参总皂苷的大孔吸附树脂纯化研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、红参水提物人参总皂苷的大孔吸附树脂纯化研究论文谢丽玲，任理，赵闯营，莫全毅，陈蔚文【摘要】目的研究D101大孔吸附树脂纯化人参总皂苷的工艺条件，为人参总皂苷的工业化生产提供参考。方法以人参总皂苷的吸附率、纯化率为指标，考察D101大孔吸附树脂对人参总皂苷的吸附和洗脱条件。结果浓度为0.8g生药/ml的红参供试品溶液最大上样体积12.5ml，上样流速1ml/min;用6倍柱体积的蒸馏水进行平衡、3倍柱体积70%乙醇洗脱树脂柱.freell/min，纯化效果较好。结论D101大孔吸附树脂能有效富集并纯化人参总皂苷

2、。【关键词】大孔吸附树脂;人参总皂苷;纯化大孔吸附树脂是不含交换基团、具有大孔结构的高分子吸附剂，在水溶液中对有机物吸附力强，吸附容量大1。近十余年来，大孔吸附树脂逐渐被应用于中草药化学成分的提取分离和中药新药的研制开发中，既可除去大量杂质，又可使有效成分富集，尤其对皂苷类成分的富集纯化有较好的效果2。红参是五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的栽培品经蒸制后的干燥根及根茎，人参皂苷是其主要有效成分。红参性味甘温，补气补血，是复方胃乃安中的主药之一。本文用D101大孔吸附树脂富集纯化人参总皂

3、苷，对其整个工艺过程进行优化，为中成药“胃乃安胶囊”的二次开发研究提供科学依据。1仪器与材料1.1仪器BS224S电子天平(北京赛多得斯仪器系统有限公司)，HH-2型恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)，UV-2102C型紫外-可见分光光度计尤尼柯(上海)仪器有限公司。1.2材料红参药材由广州中一药业有限公司鉴定并提供(批号080501(03)，检字号08101741)。人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所，批号为110754-200421)，D101型大孔吸附树脂(上海摩速科学器材有限公司)。1.3试剂

4、香草醛、高氯酸、冰醋酸、乙醇、α-萘酚、浓硫酸，均为分析纯。2方法2.1标准曲线的制备分别取人参皂苷Re标准品溶液(质量浓度为0.5mg·ml-1)100，200，250μl和300μl，加入香草醛-冰醋酸、高氯酸进行显色反应，以空白溶液做参比3，将显色体系在450～650nm波长范围内扫描，确定最大吸收波长。精密吸取体积为40，80，120，160，200和240μl的人参皂苷Re标准品溶液，显色后在选定波长处测定吸收值，制作人参总皂苷标准曲线。2.2供试品溶液的制备称取一定量的红参置于圆底烧瓶中，加入6倍

5、水冷凝回流提取2次，1.5h/次，5000r/min离心5min，取上清液水浴浓缩至一定浓度，作为供试品溶液。2.3大孔吸附树脂的预处理D101大孔吸附树脂用无水乙醇浸泡12h，水洗至无醇味，湿法装柱(1.6cm×30cm)。树脂柱体积32ml，树脂湿重32.57g，备用。2.4纯化工艺的优化2～62.4.1泄漏曲线的考察取浓度为0.2g生药/ml的红参供试品溶液100ml上柱，上样流速1ml/min，流出液10ml/份，共收集10份，测定上柱液和流出液人参总皂苷含量，考察泄漏曲线，确定样品液的最大上样体积。

6、2.4.2吸附速度的考察根据泄漏曲线，取0.2g生药/ml药液的最大上样体积上柱，吸附流速分别为1，2，4ml/min，收集流出液，测定人参总皂苷的含量，计算吸附率，确定吸附流速。2.4.3上样浓度的考察取药液上柱，浓度分别为0.2，0.4，0.6，0.8g生药/ml，均为最大上样体积，收集流出液，测定人参总皂苷的含量，确定上样浓度。2.4.4水平衡倍量考察取0.2g生药/ml药液上柱，流速1ml/min，用蒸馏水平衡，流出液每1个柱体积收集1管，取样进行Molish反应，观察液体颜色。2.4.5洗脱溶剂浓度

7、的考察取0.2g生药/ml药液上柱，蒸馏水平衡树脂，依次用30%，50%，70%和90%乙醇洗脱，分别收集洗脱液，测定人参总皂苷含量，确定洗脱剂浓度。2.4.6洗脱溶剂用量的考察取0.8g生药/ml药液上柱，先蒸馏水平衡至流出液近无色，再用6倍柱体积的70%乙醇洗脱，每半个柱体积收集1管。测定各管中人参总皂苷含量，确定洗脱剂的用量。2.4.7乙醇洗脱流速考察取0.8g生药/ml药液上柱，乙醇洗脱流速分别为1,.freell/min，收集醇洗脱液，测定人参总皂苷纯化率，确定洗脱流速。3结果3.1标准曲线的制备显

8、色后扫描结果表明，不同含量的标准品溶液在563nm处均显示最大吸收，且空白无干扰，选563nm为测定波长。回归方程为Y=6.0057X-0.0234，R2=0.9996，表明人参皂苷Re在20～120μg范围内呈良好线性关系。3.2泄漏曲线的考察从测定结果和泄漏曲线(图1)可知，上样药液为50ml时，泄漏曲线进入平台期，说明D101型大孔吸附树脂对人参总皂苷的吸附量逐渐趋向饱和，此时人参总皂苷开始明