胸腺肽对严重烧伤患者免疫功能调理的初步研究

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1、胸腺肽对严重烧伤患者免疫功能调理的初步研究：刘静杰，隋志甫，朱敬民，郝天智【摘要】目的研究胸腺肽对严重烧伤患者的免疫调理作用。方法选取30例严重烧伤患者(其中15例除常规治疗外还应用胸腺肽治疗)，分别于伤后3、7、14、28天抽取静脉血，酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定肿瘤坏死因子α(TNFα)、干扰素γ(IFNγ)，并用流式细胞仪测定单核细胞表面人类白细胞DR抗原(HLADR)。结果接受胸腺肽治疗的患者血浆IFNγ水平升高持续至停药后较长的一段时间，未接受胸腺肽治疗的患者IFNγ水平几乎测不出。接受胸

2、腺肽治疗的患者与未接受胸腺肽治疗的患者外周血TNFα水平无显著差异。伤后7、14、28天接受胸腺肽治疗的患者单核细胞HLADR较未接受治疗组高。结论胸腺肽对严重烧伤患者的免疫功能有明显改善。【关键词】胸腺肽;免疫抑制;抗原　　Abstract：ObjectiveTostudytheimmuneopsonizationofthymicpeptideinsevereburnedpatients.MethodsTheperipheralblood30severeburnedpatients(15ofthemgthymicp

3、eptideeveryotherday)ondays3,7,14,28afterinjury.TNFαandIFNγeasuredbymeansofELISA.TheexpressedHLADRofmonocyteeasuredbymeansoffloetry.ResultsTheIFNγofthepatientsicpeptideincreased,icpeptidegroupicpeptidecanlargelyimprovetheimmunefunctionofseverepatients.　　Keyicp

4、eptide;immuneinhibition;antigen　　胸腺肽是来自于胸腺组织中的肽类成分，对胸腺依赖性淋巴细胞的分化、成熟起着重要的调节和控制作用。自被发现分离提纯以来，胸腺肽己广泛应用于多种临床免疫疾病，并且取得了一定的疗效。有研究表明[2，7]严重烧伤患者存在不同程度的免疫紊乱，临床工已开始关注胸腺肽对烧伤免疫功能的作用，胸腺肽己开始用于严重烧伤的治疗。本研究观察了应用了胸腺肽治疗的烧伤患者的细胞因子和人类白细胞DR抗原(HLADR)的变化，对胸腺肽对严重烧伤患者免疫功能影响进行评价。材料与方法　　1观

5、察对象　　我科近年来的住院的特重度烧伤患者30例，年龄(32.4±5.8)岁，深Ⅱ°以上烧伤面积在50%～60%之间，其中Ⅲ°面积在40%～60%之间，伤前无器质性疾病。患者全部经正规治疗。其中15例重度烧伤患者，除常规治疗外，在伤后第3日(休克期过后)开始应用胸腺肽α治疗。用法为1.6mg，皮下注射，隔日1次，应用10次后停药。胸腺肽治疗组患者Ⅲ°烧伤面积平均为46%，常规治疗组患者Ⅲ°烧伤面积平均为47.5%，经统计二组伤情差异不显著。所研究病例治疗过程中病情平稳，均痊愈出院。　　2标本收集　　根据临床实际,在不影响

6、临床治疗,并考虑到患者承受程度的情况下,烧伤后3、7、14、28天静脉采血，采血时间均为清晨5:00～6:00，5%乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，无菌操作。采血后留取0.5ml全血做HLADR的检测,其余立即分离血浆-70℃并保存。用于测定正常组、烧伤后各组患者的肿瘤坏死因子α(TNFα)及干扰素γ(IFNγ)的水平。　　3指标检测及方法　　3.1外周血浆TNFα、IFNγ水平测定采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血浆中TNFα、IFNγ水平(按操作说明书进行)，通过倍比稀释制作标准曲线依次加入抗体

7、、标记二抗、显色底物，酶标仪在合适的波长(450nm)测定光密度值，根据标准曲线线性回归方程计算相应标本中TNFα、IFNγ含量。　　3.2用流式细胞仪检测单核细胞表面HLADR的表达(1)0.5ml新鲜全血(采血后6小时内)加入5ml红细胞裂解液(KHCO31.0g,NH4Cl8.3gEDTA37mg加蒸馏水至100ml调整pH至7.4)，混匀，室温下静置15分钟，待溶液变清亮后，200g离心，弃上清。(2)以PBS(NaCl8g;KCl0.2g;NaHPO·7H2O1.15g;KH2PO4加蒸馏水1000ml)

8、溶液洗涤沉淀1次，加入PBS恢复体积至0.5ml;(3)加入10μlPECD14鼠抗人单克隆抗体充分混匀，再加入10μlFITCHLADR鼠抗人单克隆抗体充分混匀，室温避光孵育1小时;(4)PBS溶液洗涤2次;(5)定容至0.4ml，加入100μl4%多聚甲醛固定;(6)用200目滤网将溶液过滤入流氏专用样品检