资源描述：
《hplc法测定妇康胶囊中盐酸水苏碱含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、HPLC法测定妇康胶囊中盐酸水苏碱含量【摘要】目的:建立妇康胶囊中水苏碱的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,EC250/4.6NUCLEOSTL,100-5SA柱,以0.05mol.L-1磷酸二氢钾―乙晴―三乙胺(100:2:0.1)(以磷酸调pH值至2.3)为流动相。结果:水苏碱在0.344～5.500μg范围内呈良好的线性关系。R=0.9999,回收率为99.2%。结论:该方法简单、灵敏、准确。【关键词】妇康胶囊;益母草;盐酸水苏碱;高效液相色谱法【中图分类号】R917【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)10-084-1
2、1仪器、试剂与药品1.1SSI液相色谱仪,分析之星色谱工作站;sartoriusBP211D电子天平;JL―180DTH超声波清洗器。1.2盐酸水苏碱对照品为中国药品生物制品检定所提供(批号712-200105供含量测定用);妇康胶囊(成都圣洪生物科技有限公司);缺益母草阴性对照品(由成都圣洪生物科技有限公司提供);甲醇为色谱醇;水为重蒸馏水;其余试剂为分析纯。2试验方法与结果2.1色谱条件5色谱柱为EC250/4.6NUCLEOSTL,100-5SA柱,0.05mol.L-1磷酸二氢钾―乙晴―三乙胺(100:2:0.1)(以磷酸调pH值至2.3)为流
3、动相;流速为0.8ml/min;检测波长为192nm。2.2试验用溶液的制备对照品溶液的制备精密称取盐酸水苏碱对照品适量,置容量瓶中,加30%的甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得。供试品溶液的制备取本品装量差异检查项下的内容物,研细,取约2.0g,精密称定,置烧瓶中,精密加乙醇50ml,称定重量,回流提取1小时,取出放冷,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25ml,通过氧化铝―活性碳柱(中性氧化铝3g,湿法装柱,上层用活性碳1g,乙醇预洗),用乙醇90ml洗脱,洗脱液蒸干,残渣用30%的甲醇溶解定容于10ml容量瓶中,用
4、微孔滤膜(0.45μm)滤过,即得。2.3阴性样品溶液的制备取不含益母草的样品,同供试品溶液制备方法项下制备。2.4阴性干扰性试验5在选定的色谱条件下,分别精密吸取对照品溶液、样品溶液和缺益母草阴性样品溶液各10ul注入液相色谱仪,理论塔板数(N)按水苏碱峰计算在5000以上。水苏碱的保留时间约为7min,阴性样品在对照品位置无干扰峰,色谱图分别见A、B、C。A.对照品B.供试品C.阴性样品2.5标准曲线的绘制精密称取盐酸水苏碱对照品适量,加30%甲醇制成不同浓度的对照品溶液,摇匀,作为对照品溶液,分别精密进样10µl,其进样量为0.344
5、µg、0.688µg、1.375µg、2.75µg、4.125µg、5.5µg,按色谱条件进行分析,测定峰面积,并以峰面积值(A)对进样量(C)进行回归,得标准曲线方程为:A=1.3456×105C+1.8752×103,r=0.9999。以峰面积值(A)对进样量(C)作图,得一直线,结果表明在0.344～5.50μg范围内与峰面积呈很好的线性关系。2.6精密度试验精密吸取盐酸水苏碱对照品溶液(0.1375mg/ml)10µl,连续进样5次,测得盐酸水苏碱对照品峰面积R
6、SD%为0.85%。2.7稳定性试验取样品(批号051001),制备供试品溶液,分别于不同时间进样,结果表明样品在16小时内测定较稳定。2.8重复性试验取样品(批号051001),分别制备5份供试品溶液,按上述色谱条件进行测定,盐酸水苏碱的平均含量为1.66mg/g,其RSD%=1.17%,方法重复性较好。52.9回收率试验精密称取样品(样品批号为051001,含量平均值为1.66mg/g)适量,6份,分别精密加入盐酸水苏碱对照品溶液,按上述色谱条件进行测定,平均回收率为99.2%,RSD=0.61%,表明回收率的试验较好。2.10样品的含量测定取3批
7、样品,依法制成供试品溶液10ul,随行对照溶液10进样,分别测定吸收峰面积,按外标法计算样品的含量。3讨论3.1流动相的选择依据文献,本实验曾试用了多种流动相[1.2],并比较了0.05mol.L-1磷酸二氢钾―三乙胺、0.05mol.L-1磷酸二氢钾―乙晴―三乙胺、0.1mol.L-1磷酸盐溶液(1.0mol.L-1磷酸二氢钠溶液用0.1mol.L-1用磷酸氢二钠溶液调节Ph至5.5)等流动相,结果显示,以0.05mol.L-1磷酸二氢钾―乙晴―三乙胺(100:2:0.1)(以磷酸调pH值至2.3)为流动相效果较佳,故选择其为流动相。3.2水苏碱峰形
8、影响因素样品的进样量越大,其峰形拖尾较为严重,样品的分离较差,流动相中加入三乙胺可以改变峰形的
