第二章 生物制药工艺技术基础

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1、第二章生物制药工艺技术基础一、填空题1、从生物材料中提取天然大分子药物时，常采用的措施有、、等。2、生化活性物质浓缩可采用的方法有、、、、、3、生化活性物质常用的干燥方法有、、4、冷冻干燥是在、条件下，利用水的性能而进行的一种干燥方法。5、微生物菌种的分离和纯化可以用的方法有和。6、微生物菌种的自然选育是指利用微生物在一定条件下产生的原理，通过分离、筛选排除，选择维持原有生产水平的菌株。7、诱变时选择出发菌株时应考虑、、、等问题。8、目前常用的诱变剂可分为、和三大类。9、常用的菌种保藏方法有：、、、、、等。10、微生物生长需要的六大营

2、养要素是、、、、、。11、生物药物制备过程中，常用的灭菌及除菌方法有：、、、。12、获得具有遗传信息的目的基因的方法有、、、。13、PCR由3个基本反应组成，即、、。14、基因工程中原核表达常用的宿主有、等；常用的真核表达系统有、等。15、大肠杆菌表达系统的缺点是不能进行，因而像EPO等基因的表达需使用表达系统。16、分泌表达是指将目的基因嵌合在基因下游进行表达，从而使目的基因分泌到细胞周质或培养基中。17、固定化酶常采用的方法可分为、、和四大类。18、下面酶固定化示例图分别代表哪种固定化方法：A．B.C.D.二、选择题1、如果想要从

3、生物材料中提取辅酶Q10，应该选取下面哪一种动物脏器（）A、胰脏B、肝脏C、小肠D、心脏2、目前分离的1000多种抗生素，约2/3产自（）A、真菌B、放线菌C、细菌D、病毒3、由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大，拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质，可采用（）A、SDS凝胶电泳B、盐析法C、凝胶过滤D、吸附层析4、以下可用于生物大分子与杂质分离并纯化的方法有（）A、蒸馏B、冷冻干燥C、气相色谱法D、超滤5、分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（）A、分离量大分辨率低的方法B、分离量小分辨率低的方法C、分离

4、量小分辨率高的方法D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定6、以下可用于菌种纯化的方法有（）A、高温灭菌B、平板划线C、富集培养D、诱变处理7、能够实现微生物菌种定向改造的方法是（）A、紫外诱变B、自然选育C、制备原生质体D、基因工程8、能够用沙土管保存的菌种是（）A、大肠杆菌B、酵母菌C、青霉菌D、乳酸杆菌9、以下关于PCR的说法错误的是（）A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶B、应用PCR技术可以进行定点突变C、PCR的引物必须完全和模板互补配对D、PCR反应中，仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增三、名词解

5、释1、酶工程（enzymeengineering）：2、固定化酶（immobilizedenzyme）：3、原生质体融合：4、杂交育种：5、诱变育种：6、感受态细胞：7、原代细胞：8、二倍体细胞系：四、问答题1、生物药物分离制备的基本特点有哪些？2、简述单克隆抗体（monoclonalantibody）的制备原理。3、简述生物活性物质分离纯化的主要原理。第二章生物制药工艺技术基础（答案）一、填空题1.采用缓冲系统、添加保护剂、抑制水解酶作用。2.盐析浓缩、有机溶剂沉淀浓缩、超滤浓缩、真空减压浓缩或薄膜浓缩、用葡聚糖凝胶浓缩、用聚乙二醇

6、浓缩。3.减压干燥、喷雾干燥、冷冻干燥。4.低温、低压、升华。5.平板划线法、稀释后涂布平板法。6.自发突变、衰变型菌落。7.出发菌株的稳定性、选用具备某种优良特性、对诱变剂敏感、菌种的生理状态及生长发育时间。8.物理诱变因子、化学诱变剂、生物诱变因子。9.斜面低温保藏法、液体石蜡封藏法、冷冻干燥保藏法、液氮超低温保藏法、甘油保藏法、沙土管保藏。10.碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水。11.加热灭菌、辐射灭菌（紫外杀菌）、介质过滤除菌、化学灭菌法。12.鸟枪克隆法（DNA文库）、cDNA文库法、化学合成法、PCR法。13.高温变

7、性、低温退火、适温延伸。14.大肠杆菌、枯草杆菌；酵母、动物（植物）细胞。15.翻译后加工（糖基化）、真核（酵母）。16.信号肽。17.吸附、包埋、交联、共价键结合。18.A．吸附B.共价键结合C.交联D.包埋二、选择题1.D2.B3.C4.D5.A6.B7.D8.C9.C三、名词解释1.是从应用目的出发，研究酶和应用酶的特异催化功能，并通过工程化过程将相应原料转化成所需产物的技术。2.是指借助于物理和化学的方法把酶束缚在一定空间内并具有催化活性的酶制剂，酶经固定化以后稳定性有所提高，而且可以反复使用，并能实现反应连续化、自动化，简化

8、产品的纯化工艺。3.用脱壁酶处理将微生物细胞壁去除，制成原生质，再用聚乙二醇（PEG）促进原生质体发生融合，从而获得融合子的技术。4.杂交育种一般指将两个基因型不同的菌株通过接合使遗传物质重新组合，再从中分离和筛选出具有