药物分析论文银耳多糖纯化的检测分析

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1、银耳多糖纯化的检测分析摘要：银耳中含有丰富的银耳多糖（约占银耳干重的60％～70％)。本实验的主要内容是银耳多糖纯化的检测分析，首先对银耳采用水煮法按料水比1：40(m／v)在100℃水中浸提8h提取银耳多糖。得到的提取液用硅藻土助虑，然后用1%、0.5%、1.5%的活性炭吸附脱色，最后用透析袋透析48h，透析液经离心、洗涤、真空干燥得到银耳多糖粗品。经测得银耳多糖粗品的含糖量为31.3%。关键词:银耳多糖；纯化；活性炭；透析1前言银耳为真菌类，别名白木耳、雪耳、银耳子等【1】。银耳所含化学成份比较复杂．主要可分为3大

2、类，即多糖类、脂类和蛋白类(酶、蛋白质、氨基酸)，此外有无机盐、维生素B族等。灰分中含S、P、Fe、Mg、Ca、K、Na等成分。银耳多糖是从银耳子实体或液体深层发酵的银耳孢子中提取出来的一种活性多糖，银耳多糖是银耳的主要有效成分(约占银耳干质量的60％～70％)，据国内外学者研究报道，银耳多糖作为银耳的主要活性成份可分为酸性杂多糖、中性杂多糖(多糖LPS)、酸性低聚糖、胞壁多糖和胞外多糖5大类。Ukai等(1972)从银耳子实体中分离出3种酸性杂多糖A、B、C。这3种多糖主要是由木糖、葡萄糖醛酸和甘露糖组成．还有少量葡

3、萄糖及微量岩藻糖，其分子中有典型的乙酰基结构。Tsubaki等(1977)从银耳的培养液中分离到一种具有高分子量和高分支的酸性杂多糖，主要由D一甘露糖、D一木糖、岩藻糖、D一葡糖醛酸和D一乙酰基构成。Sone等(1978)从银耳细胞壁中分离到2种胞壁多糖，胞壁外层产生的酸性多糖是由D一葡萄糖醛酸、D一甘露糖和D一木糖组成的．胞壁中的碱不溶多糖由D一葡萄糖、D一葡萄糖醛酸、D一甘露糖和D一木糖组成。Kakuta等(1979)从银耳细胞深层发酵孢子体中分离到主链结构与子实体多糖相似的酸性杂多糖，仅在支链上稍有些区别：其主链

4、结构都是由糖苷键连接的甘露聚糖，在主链的2，4，6位上连接有葡萄糖、葡萄糖醛酸和木糖等组成的侧链，表明深层培养的银耳孢外多糖和子实体提取的银耳多糖在组分上无明显的区别。此外，国内学者对银耳多糖化学成分也进行了一系列研究．章云津等【2】从福建产银耳子实体提取的银耳多糖由葡萄糖醛酸、甘露糖、木糖及少量岩糖、葡萄糖组成，相对分子质量为300000。顾锺琦等【3】对银耳孢外多糖I的研究发现．该多糖由甘露糖、岩藻糖、木糖、少量葡萄糖醛酸和一未知化合物构成．相对分子质量为560000。银耳作为珍贵的滋补品和重要的药材，在我国已有悠

5、久的历史，现代药理学研究证明银耳及其多糖有抗肿瘤、抗辐射、延缓衰老、增强免疫诱导人体产生抗体及干扰素，可治疗高血压、高血脂、糖尿病等作用【4-6】。从70年代开始．国内外对银耳化学成份的研究证明银耳多糖是银耳的主要活性成份，银耳多糖的药理作用研究主要集中在银耳多糖的化学特性、免疫调节作用及其作用机制的研究上，银耳的诸多生理活性都是建立在免疫调节基础之上的。陈子齐等【7】证明银耳多糖在体外能促使正常人淋巴细胞转化，其活性类似于植物凝集素；在体内能提高白血病人淋巴细胞的转化率。且能促进H_TdR渗入体外培养的心肌炎、大动脉

6、炎、肾病和白血病患者的T淋巴细胞转化：也能提高肿瘤患者外周血T淋巴细胞水平。银耳多糖还能促使恒河猴和小鼠E一玫瑰花环细胞形成增多和T淋巴细胞转化率显著提高。XiaDong等【8】将银耳多糖与正常小鼠经有丝分裂原ConA诱导的脾淋巴细胞体外培养。结果发现银耳多糖能显著增强小鼠脾淋巴细胞增殖反应．同时可明显拈抗6一巯基嘌呤所致的细胞免疫抑制，但不影响氢化可的松对淋巴细胞增殖反应的抑制作用。胡庭俊等【9】发现银耳多糖体外能促进小鼠脾脏淋巴细胞蛋白激酶C(PKC)的活性明显升高。通过活化细胞膜PKC。并引起细胞内一系列蛋白质级

7、联磷酸化反应来调节免疫细胞的功能。由此揭示银耳多糖的免疫增强作用与活化PKC有关。其免疫调节作用与淋巴细胞的信号传导系统密切相关。目前，银耳多糖的药理作用研究主要集中在银耳多糖的化学特性、免疫调节作用及其作用机制的研究。国内外关于银耳多糖的提取、分离工艺研究不是很多，特别是纯化方法的优化选择方面存在很大的空白。本实验力求为银耳多糖的纯化【10】提供依据。2材料、仪器和试剂2.1材料银耳（市售）2.2仪器电热鼓风干燥箱（101型　北京市永光明医疗仪器厂）磁力加热搅拌器（85-2金墰市科与仪器厂）予华牌循环水真空泵（SHZ

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