脂肪酸提取和检测的方案

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1、固液比分别为1:6,1:7,1:8,1:9,1:10微波功率500W,提取时间5min,温度50℃称取250g的海带粉装入500ml的大圆底烧瓶,加入石油醚(乙醇、乙醚)用微波萃取法提取脂肪酸,500ml大圆底烧瓶称重海带粉碎成粉,过筛60℃称重滤液浓缩抽滤固液比分别为1:6,1:7,1:8,1:9,1:10微波功率500W,提取时间5:00,温度50℃集中收集,一起浓缩滤渣继续提取,提取3次称100ml的空锥形瓶,称取5g的样品加入到100ml的锥形瓶中沸水加热1小时加10mL0.5mol/L氢氧化钠—乙醇溶液,在瓶口上插一小漏斗,漏斗上再盖一块玻璃反应完成后移去漏斗,继续加热除去

2、乙醇。再加人10mL蒸馏水,加热,使皂化物溶解成混合液。加入10ml,0.5mol/L的硫酸,在瓶口上插一小漏斗,漏斗上再盖一块玻璃加人10mL蒸馏水加热1小时加浓盐酸(约5mL)使之呈酸性加热,可见脂肪酸呈油状浮于上层时,用分液漏斗分开上下层油状物分层,用分液漏斗分开上下层,上次用热水重复洗涤三次,洗去甘油、硫酸等,静置澄清,上清液即为脂肪酸上层用热水重复洗涤三次,每次用水100m1,除去混杂于脂肪中的无机盐、甘油、盐酸等,静置澄清,上清液即为脂肪酸加入25ml,0.5mol/l的KOH-CH3OH,25ml石油醚加入甲醇7ml和3-4滴BF3-乙醚冷却加热60℃,处理30min加

3、入2g经预处理的样品[1]称量两个100ml圆底烧瓶中加入为处理的2g未经预处理的样品冷却后加入25ml饱和NaCl溶液至中性,取上层清夜,称重加入25ml,10:1的浓硫酸-CH3OH再加蒸馏水至瓶颈,取出上清,再用2ml石油醚洗多次,合并上清,放入小瓶中待测,称重加入2ml石油醚加热60℃,处理30min参考文献:[1]寇秀颖,于国萍.脂肪和脂肪酸甲酯化方法的研究.《食品研究与开发》,2005,26(2),起止页码[2]闰玉霞,李平林,蔡扬鹏,李八方.利用GC一MS测定不同甲醋化条件下沙蜚脂肪酸组成.《中国海洋药物杂志》,2010,第29卷第6期[3]何勇,彭莺,黎军.硫酸催化甲

4、酯化气相色谱法测肥皂产品中的脂肪酸分布及总脂肪物含量.《顺德职业技术学院学报》,2011,7:第9卷第3期[4]曾虹燕,李昌珠,蒋丽娟.用GC-MS分析不同方法提取的茶油脂肪酸.《热带亚热带植物学报》,2005,13(3):271-274[5]蔡心尧,尹建军.海藻中多不饱和脂肪酸的测定方法.《无锡轻工大学学报》,1999,9:第18卷第5期[6]罗盛旭,梁振益,陈佩.海带脂肪酸的提取及其成分分析.《海南大学学报自然科学》,2005,9:第23卷第3期[7]冯小峻,邓舟,陆慧宁等.GN海带新品系脂肪酸的气相色谱一质谱联用分析.《中山大学学报》,2010,11:第49卷第6期[8]纪丽丽

5、,宋文东,刘建秀.红树林植物露兜中挥发油和脂肪酸的测定.《现代食品科技》,2008:V01.24,No.6[9]朱晓楠,魏士刚等.微波辅助提取一气相色谱质谱联用测定肉桂中的挥发油.《高等学校化学学报》,2009,7:V01.30,No.7,1300一13041.脂肪化学名甘油三酯,脂肪是由甘油和脂肪酸组成的三酰甘油酯,其中甘油的分子比较简单,而脂肪酸的种类和长短却不相同。脂肪酸分三大类:饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸。脂肪在多数有机溶剂中溶解,但不溶解于水。2.多不饱和脂肪酸指含有两个或两个以上双键且碳链长度为18~22个碳原子的直链脂肪酸。通常分为omega-3和ome

6、ga-6,在多不饱合脂肪酸分子中,距羧基最远端的双键在倒数第3个碳原子上的称为omega-3;在第六个碳原子上的,则称为omega-63.单不饱和脂肪酸,在分子结构中仅有一个双键;多不饱和脂肪酸,在分子结构中含两个或两个以上双键脂肪转化为脂肪酸的方法:1.脂肪在碱性溶液底下水解生成脂肪酸钠,然后加入硫酸,溶于水,不溶于乙醇。无水物是白色晶体或粉末,浓缩把乙醇蒸出,得到脂肪酸脂肪酸提取:称200g的海带粉,加入固液比为1:5的乙醇在50℃,500W的条件下用微波法提取,抽滤,取滤液静置,滤渣再加入1:4的乙醇溶剂进行二次提取,提取条件为50℃,500W的条件下进行,提取后抽滤,静置至一

7、段时候后,充分析出白色固体后抽滤进行浓缩,在浓缩前可适当加入甲醇,再经行浓缩现象:甲酯化:酸化甲酯化1.加入正己烷4ml,浓度2mol的氢氧化钾一甲醇溶液2ml,剧烈振摇1—2min,30度水浴反应20min。加入三氟化硼-甲醇溶液,3000r/min离心10min。取上清液待测。其中三氟化硼法能利用快速皂化使脂肪酸盐直接转化成脂肪酸甲酯,减少酸化提取手续2.取1.3g浸膏,加0.5mol·L~KOH-CH3OH溶液25mL,苯一正己烷(体积比为1:1)溶

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