栉杆菌多糖硫酸酯化及酯化前后生物活性比较探究

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1、栉杆菌多糖硫酸酯化及酯化前后生物活性比较探究摘要：目的以栉杆菌多糖（APD）为研究对象，进行硫酸酯化（SAPD），并测定其抗肿瘤活性和免疫调节活性。方法APD采用氯磺酸-吡啶法进行酯化，溴化二苯偶氮盐（MTT）比色法研究样品在体外对肿瘤细胞株的抑制作用和促进正常小鼠脾脏细胞增生的作用。结果红外光谱证明SAPD已经形成硫酸酯，其取代度为0.918。APD对肿瘤细胞株几乎无细胞毒性，SAPD对A549肺癌细胞株的抑制率为31％。APD对ConA诱导的脾脏细胞增生具有促进作用，但对LPS诱导的脾脏细胞增生无促进作用。SAPD低

2、浓度时对ConA诱导的脾脏细胞增生有促进作用，对LPS诱导的脾脏细胞增生无促进作用。结论APD经过硫酸酯化后抗肿瘤活性显著增强，对ConA诱导的脾脏细胞增生有一定的促进作用。关键词：栉杆菌多糖；硫酸酯化；抗肿瘤；免疫调节中图分类号：Q539文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)01-0001-04SulfationofPolysaccharidefromArthrobactersp.andComparativeStudyonBioactivityofPolysaccharideandItsSulfated

3、DerivativeWANGFeng-qin，GENGYue10(CollegeofLifeScience,ShandongNormalUniversity,Jinan250014,China)Abstract：ObjectiveTostudythesulfationofthepolysaccharidefromArthrobactersp.(APD)anddeterminetheantitumorandimmunitymodulationactivitiesofitanditssulfatedderivative(SA

4、PD).MethodsAPDwaschemicallymodifiedbychlorosulfonicacid-pyridinemethod.MTTcolourimetrywasusedtoevaluatetheantitumoractivityagainsthumantumorcellsinvitro，aswellastheproliferation-enhancingeffectonspleenlymphocytesofnormalmice.ResultsTheIRspectrumshowedthatSAPDhadb

5、eenformed,thesubstituteddegreewas0.918.APDhadlittlecytotoxicactivitytowardsthecancercells,whileSAPDinhibitedthegrowthofA549lungcancercellsremarkablywith31%inhibitoryratio.ThoughAPDhadnoeffectontheproliferationofLPS-inducedspleencells,itcouldenhancetheproliferatio

6、nofConA-inducedspleencells.SAPDwithlowdosecouldpromotetheproliferationofConA-inducedspleencells,butalsohadnoeffectontheproliferationof10LPS-inducedspleencells.ConclusionTheantitumoractivityofAPDisremarkablyenhancedafteritwassulfated.APDcanalsopromotetheproliferat

7、ionofConA-inducedspleencells.Keywords：polysaccharidefromArthrobactersp;sulfation;antitumor;immunitymodulation多糖的硫酸酯化是多糖化学修饰研究中的一个热点，实验表明硫酸酯化多糖具有抗病毒、抗肿瘤、抗凝血等作用。本实验对栉杆菌中的多糖进行分离纯化，并对其中一种组分（APD）进行硫酸酯化，得到硫酸酯化多糖（SAPD），然后对APD和SAPD的抗肿瘤活性和免疫活性进行了初步研究。1材料1.1APD栉杆菌（Arthroba

8、ctersp.）发酵产物分离到的多糖，去蛋白质后经20％，40％，60％，80％乙醇分级沉淀得到多糖组分，选取80％乙醇沉淀（APD）作为实验材料。1.2试剂吡啶（山东化学研究所）；氯磺酸（中国医药上海化学试剂厂）；明胶（上海化学试剂公司）；无水甲酰胺（天津广成化学试剂公司）；硫酸钾、氯化钡（天津天河化工厂）；RPM