白芨多糖硫酸酯化、理化性质及生物学活性的研究

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1、南京师范大学硕士学位论文白芨多糖硫酸酯化、理化性质及生物学活性的研究姓名：陈景耀申请学位级别：硕士专业：植物学指导教师：吴国荣2003.5.1声明本人郑重声明：1、坚持以“求实、创新”的科学精神从事研究工作。2、本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果。3、本论文中除引文外，所有实验、数据和有关材料均是真实的。4、本论文中除引文和致谢的内容外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。5、其他同志对本研究所做的贡献均已在论文中作了声明并表示了谢意。作者签名：——Ft期：2

2、QQ3玺5目白芨多糖硫酸酯化、理化性质及生物学活性的研究摘要f多糖具有提高免疫能力、抗病毒、抗肿瘤，抗氧化等生物学活性，对多糖的研究越来越受到人们的重视，其中硫酸酯多糖由于其抗HIV等多种病毒的作用，尤为受到关注。}本实验主要对白芨多糖(BR)硫酸酯化、理化性质及生物学活性三部分内容进行了研究。在酯化工艺方面主要研究了氯磺酸一吡啶法合成白芨多糖硫酸酯的较适条件，选择试剂比例，反应温度和反应时间三个因素，应用三因素三水平正交设计，实验结果显示，毗啶和氯磺酸比例6：1，反应温度85"C，反应时间为2

3、～3h有利于提高得率和硫酸基取代度；以离子交换纤维素柱层析(DEAE．52)，分子筛SephadexG．75、SephadexG．100柱层析对产物进行了分离纯化，得到分子量不同的两个组分SBRl和SBR2。在理化性质方面，采取高效凝胶渗透色谱(GPc)测定分子量，通过紫外吸收光谱(uV)、红外吸收光谱(瓜)、核磁共振(NMR)等方法对结构进行鉴定，结果显示，硫酸基团的取代改变了产物包括构象等理化方面的性质。在生物学活性方面，与BR相对照检测了其清除超氧阴离子、羟自由基的活性，并研究了其对过氧化

4、氢诱导的红细胞溶血的影响：分别以体外培养的B淋巴细胞、富颈癌细胞和人白血病细胞U937检测其作用，结果显示，酯化前不具有清除超氧阴离子的白芨多糖酯化后具有很强的清除超氧阴离子的作用；酯化前具有较强清除羟自由基的作用，酯化届在低浓度下也表现出清除羟自由基的作用，但高浓度时易与反应体系中细胞色素C络合，形成沉淀；酯化后产物对过氧化氢诱导的红细胞溶血未见缓解作用，BR在低浓度下有缓解作用，但在较高浓度也不能起缓解作用，可能与大分子的多糖易使红细胞聚集有关：发现SBR2对B淋巴细胞的增殖作用是先上升后下

5、降；在宫颈癌细胞培养中均未见其明显抑制作用，但是白芨多糖硫酸酯对体外培养的U937细胞的生长有较为明显的抑制作用，而酯化前未见明显作用。关键词白芨多糖；硫酸酯化；分离纯化；理化性质；生物学活性垒!婴坐!———————————一StudyonSulfation，PhysicochemicalPropertiesandBiologicalActivitiesofBletillastriata(Thunb．)Reichb·f．PolysaccharideAbstract：Polysaccharides

6、havemanykindsofbiologicalactivities，suchasantitumor,antivirus，antitumor,anti—oxidant，andtheycanenhancethefunctionofimmunesystem，andSOon．Moreandmoreattentionhasbeenpaidtostudyonpolysaccharide。EspeciallymanypolysaccharidesulfatesCanresistHIVandmanyothe

7、rkindsofvirus，SOitparticularlyattractpeople’Sattention．Wemainlystudiedsulfation-techniques，physicochernicalpropertiesandbiologicalactivitiesoftheBletillastriata(Thunb．)Reichb．￡polysaccharidesulfates．Firstly,wesynthesizedBletillastriata(Thnnb．)Reichb．

8、f．polysaceharidesulfateswithchlorosulfonicacid—pyridineandchosethreemainfactors：volumeratioofchlorsulfonicacidandpyridine，temperatureandtimeofreaction．TheorthogonaltestdesignL9(34)wasusedforstudyingtheoptimizationofthesulfation—techniques．Theresultsh