吸光光度法ppt培训课件

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1、第10章吸光光度法10.1物质对光的选择性吸收和光吸收的基本定律10.2分光光度计及吸收光谱10.3显色反应及影响因素10.4吸光光度分析及误差控制10.5其它吸光光度法10.6吸光光度法的应用8/15/20211依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,主要有:红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围2.51000m,主要用于有机化合物结构鉴定。吸光光度法8/15/20212紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。可见吸收光谱：

2、电子跃迁光谱，吸收光波长范围400750nm，主要用于有色物质的定量分析。8/15/2021310.1.1物质对光的选择性吸收1.光的基本性质白光(太阳光)：由各种单色光组成的复合光单色光：单波长的光(由具有相同能量的光子组成)可见光区：400-750nm3.1-1.7eV紫外光区：近紫外区200-400nm远紫外区10-200nm（真空紫外区）10.1物质对光的选择性吸收和光吸收的基本定律8/15/20214硫酸铜溶液，吸收黄光呈现蓝色.青蓝橙白光绿青蓝紫红黄光的互补色示意图高锰酸钾溶液，吸收绿光,呈现紫色。

3、互补光8/15/202152.吸收光谱产生的原因光谱名称波长范围X射线0.1~10nm远紫外光10~200nm近紫外光200~400nm可见光400~750nm近红外光0.75~2.5um中红外光2.5~5.0um远红外光5.0~1000um微波0.1~100cm无线电波1～1000m当光子的能量与分子的E匹配时，就会吸收光子E=hu=hc/l8/15/202163.物质对光的选择性吸收M+热M+荧光或磷光E=E2-E1=h量子化；选择性吸收;分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同；用不同波长的单

4、色光照射，测吸光度—吸收曲线与最大吸收波长max；M+hM*基态激发态E1（△E）E28/15/2021710.1.2光吸收定律－朗伯-比尔定律吸光光度法的理论依据，研究光吸收的最基本定律I0=Ir+It+IaI0=It+IaI0IrItIaT=It/I0,T:透射比或透光度A=lg(I0/It)＝lg(1/T),A:吸光度朗伯定律（1760年）：光吸收与溶液层厚度成正比比尔定律（1852年）：光吸收与溶液浓度成正比8/15/20218当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（溶

5、液的厚度）成正比关系－－－朗伯比尔定律数学表达：A＝lg(1/T)=Kbc其中，A:吸光度，T:透射比，K:比例常数，b:溶液厚度，c:溶液浓度8/15/20219注意2.Lambert－Beer‘sLaw也适于均匀非散射的g、s，适于紫外光和红外光；3.当溶液中含有多种吸光物质时：即：吸光度具有加和性（非常有用的性质）。1.平行单色光均相介质无发射、散射或光化学反应8/15/202110(1)摩尔吸光系数e灵敏度表示方法A=ebcA=Kbcc:mol/Le表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时溶液的

6、吸光度。单位：(L•mol-1•cm-1)c:g/LA=abca:吸光系数a相当于浓度为1g/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度(L·g-1·cm-1）8/15/202111（2）Sandell灵敏度SS的原含意：人眼借助颜色变化，在单位截面积（cm2）液柱内能检出物质的最低含量（μg/cm2）。若借助仪器，当仪器的检测极限为A=0.001（规定）时，单位截面积光程内能检出物质的最低含量称之“Sandell灵敏度”S.S与ε的关系：∵A=εbc=0.001,则:bc=0.001/ε又∵将（1）式代（

7、2）中得：S=M/ε8/15/202112摩尔吸光系数ε的讨论（1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数；（2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，ε仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；8/15/202113（3）可作为定性鉴定的参数；（4）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示。εmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。8/15/202114（5）εmax越大表明该物

8、质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。ε>105：超高灵敏；ε=(6～10）×104：高灵敏；ε<2×104：不灵敏。（6）ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。8/15/202115例：氯磺酚S测定钢中的铌50ml容量瓶中有Nb30μg，用2cm比色池，在650nm测定光吸收，A＝0.43,求S.(Nb原子量92.9