吸光光度法课件.ppt

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1、第7章吸光光度法Spectrophotometry05-十月-2117.1光吸收基本定律7.2分光光度计7.3显色反应及影响因素7.4吸光光度分析及误差控制7.5吸光光度分析法的应用05-十月-212吸光光度法是基干物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。方法特点：一、灵敏度高：1%－10-5%二、准确度高：目视5%－10%，仪器2%－5%三、快速简便四、应用广泛:绝大多数无机离子，有机化合物05-十月-2137.1光吸收基本定律c－真空中光速2.99792458×108m/sλ－波长，单位：m,cm,mm,m,nm,Å1m

2、=10-6m,1nm=10-9m,1Å=10-10mν－频率，单位：赫芝（周）Hz次/秒n－折射率，真空中为11.波动性7.1.1.光的基本性质一、光是一种电磁波------波粒二象性05-十月-2142.微粒性h－普朗克(Planck)常数6.626×10-34J·s－频率E－光量子具有的能量单位：J(焦耳)，eV(电子伏特)光量子，具有能量。05-十月-2153.波粒二象性结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越长(频率越低)，光量子的能量越低。单色光：具有相同能量(相同波长)的光。复合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在一起

3、。电磁波谱的波段如何划分?真空中:05-十月-2164．电磁波谱(Electromagneticwaves)电磁辐射按波长顺序排列：γ射线→X射线→紫外光→可见光→红外光→微波→无线电波(真空紫外)远红外中红外近红外可见近紫外远紫外10nm~200nm中层电子200nm~380nm价电子380nm~780nm价电子780nm~2.5m分子振动2.5m~50m分子振动50m~300m分子转动05-十月-217二、光的互补关系可见光——白光（复合光）：由不同波长的光按一定比例复合而成单色光：波长处于某一范围的光（理论：同一波长）

4、互补光：如果两种单色光按一定强度比例混合后到白光，这两种单色光称为互补色05-十月-218不同颜色的可见光波长及其互补光/nm颜色互补光400-450紫黄绿450-480蓝黄480-490绿蓝橙490-500蓝绿红500-560绿红紫560-580黄绿紫580-610黄蓝610-650橙绿蓝650-760红蓝绿05-十月-219三、吸收曲线当白光通过某一有色溶液时，该溶液会选择性地吸收某些波长(wavelength)的光而让未被吸收的光透射过，呈现的是它吸收光的互补光的颜色例如，KMnO4溶液选择吸收了白光中的绿色(500~560n

5、m)光，与绿色光互补的紫色光因未被吸收而透过溶液，所以KMnO4溶液呈现紫色。05-十月-2110将一系列不同波长的单色光依次通过某一吸光物质，测量该物质对光的吸收程度（吸光度），作吸光度（A）——入曲线：吸收曲线吸收曲线：05-十月-2111吸收曲线(absorptionspectrum)05-十月-2112吸收曲线的讨论：1.在入525nm，吸收最大入max2.浓度改变入max不变（同种溶液）浓度越大，吸光度越大05-十月-21137.1.2光吸收的基本定律一.朗伯比尔定律(Lambert’slaw)透光度(T)与吸光度(A)I0

6、’ItIrIaI0’=It+Ia+IrA=lg(I0/It)05-十月-21142.吸收定律A=kbcA—吸光度(absorbance)b—介质厚度(length/cm)c—浓度(concentration)K—吸光系数(absorptivity)当一束平行单色光垂直通过均匀，非散射的吸光物质时，其吸光度A与吸收物质的浓度c及吸收层厚度b成正比。05-十月-2115A,T,C之间的关系A=lg(I0/It)A=lg(1/T)05-十月-2116吸光度(A)、透光率(T)与浓度(c)的关系ATcA=kbc线性关系05-十月-2117二、

7、摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度1.摩尔吸光系数：:L·mol-1·cm-1当c的单位用mol·L-1表示时，用表示.(b：cm)－摩尔吸光系数(Molarabsorptivity)A＝bc物理意义：在一定温度下，当吸光物质的浓度为1mol·L时，液层厚度为1cm时，溶液的吸光度。反映了吸光物质进行光度测定的灵敏度05-十月-2118摩尔吸光系数()的讨论吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数，可作为定性鉴定的参数；ε与吸收物质本身的性质有关；同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以

8、εmax表示。εmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。05-十月-2119朗伯-比尔定律的适用条件单