吸光光度法课件.ppt

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1、分析化学定量分析化学化学分析：常量组分(>1%),Er0.1%～0.2%依据化学反应,使用玻璃仪器化学分析与仪器分析方法比较仪器分析：微量组分(<1%),Er1%～5%依据物理或物理化学性质,需要特殊的仪器准确度高灵敏度高第十章吸光光度法吸光光度分析法是以物质对光的选择性吸收为基础的分析方法。根据物质所吸收光的波长范围不同，吸光光度分析法又有紫外、可见及红外分光光度法。本章重点讨论可见光光度法（又称分光光度法，简称光度法）。方法的特点1.灵敏度高通常，待测物质的含量1～10－5％时，能够用分光光度法准确测定。所以它主要用于测

2、定微量组分。2.应用广泛几乎所有的无机离子和许多有机化合物可以用分光光度法进行测定。如土壤中的氮、磷以及植物灰、动物体液中各种微量元素的测定。3.操作简便、迅速、仪器设备不太复杂若采用灵敏度高、选择性好的有机显色剂，并加入适当的掩蔽剂，一般不经过分离即可直接进行分光光度法测定、其方法的相对误差通常为5～10％，其准确度虽不及重量分析法和容量法，但对于微量组分的测定，结果还是满意的。10.1物质对光的选择性吸收光波是一种电磁波。电磁波包括无线电波、微波。红外光、可见光、紫外光、x射线等。如果按照其频率或波长的的大小排列，可见光

3、只是电磁波中一个很小的波段。见表12－1光的波长λ(cm)、频率(Hz)，它们与光速c的关系是：光的基本性质在真空介质中，光速为2.9979×1010cm/s。单个光子的能量E与上述三要素的关系是：E－－光子的能量，J；h－－普朗克常数（6.625×10－34J·s）复合光可以分解成单色光有色物质的不同颜色是由于吸收了不同波长的光所致。溶液能选择性地吸收某些波长的光，而让其他波长的光透过，这时溶液呈现出透过光的颜色。透过光的颜色是溶液吸收光的互补色。能复合成白光的两种颜色的光叫互补色光。物质所显示的颜色是吸收光的互补色。有色

4、溶液对各种波长的光的吸收情况，常用光吸收曲线来描述。将不同波长λ的单色光依次通过一定的有色溶液，分别测出对各种波长光的吸收程度（即吸光度，用字母A表示）。以波长λ为横坐标，吸光度为纵坐标作图，所得的曲线称为吸收曲线或吸收光谱曲线。KMnO4的颜色及吸收光谱最大吸收波长：λmax定性分析的依据叶绿素的结构和吸收光谱苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱曲线苯(254nm)甲苯(262nm)A23025027010.2光吸收基本定律当一束平行的单色光照射均匀的有色溶液时，光的一部分被吸收，一部分透过溶液，一部分被比色皿的表面反射。如果入

5、射光的强度为I0，吸收光的强度为Ia，透过光的强度为It，反射光的强度为Ir，则:I0＝Ia＋It＋Ir在吸光光度法中，由于采用同样质料的比色皿进行测量，反射光的强度基本上相同，其影响可以相互抵消，上式可简化为:I0＝Ia＋It朗伯-比尔定律光吸收定律－朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律吸光光度法的理论依据，研究光吸收的最基本定律I0=Ir+It+IaI0=It+IaI0IrItIa定义：T=It/I0,T:透射比或透光度A=lg(I0/It)＝lg(1/T),A:吸光度T－透光率（透射比）（Transmittanc

6、e）A=lg(I0/It)=lg(1/T)=-lgTA=lg(I0/It)=kbcItI0bdxII-dIs朗伯定律(1760)A=lg(I0/It)=k1b比尔定律(1852)A=lg(I0/It)=k2c吸光度介质厚度(cm)当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系－－－朗伯比尔定律－－－光吸收定律数学表达：A＝lg(1/T)=Kbc其中，A:吸光度，T:透射比，K:比例常数，b:溶液厚度，c:溶液浓度注意：平行单色光均相介质无发射、散射或光化学反应朗伯-比尔定律的适用

7、条件单色光应选用max处或max肩峰处测定2.介质要均匀当待测液是胶体、乳浊液、悬浮液等不均匀体系时，入射光除被吸收外还有反射、散射损失，从而是吸光度增大导致正误差。3.稀溶液（吸光度=0.2-0.8）浓度增大，分子之间作用增强摩尔吸光系数e灵敏度表示方法A=ebcA=Kbcc:mol/Le的物理意义：表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时溶液的吸光度。单位：(L•mol-1•cm-1)理论上，其大小仅与入射光的波长、吸光物质的性质、溶剂、温度等因素有关。c:g/LA=abca:吸光系数标准曲线法根据朗伯－比耳

8、定律，保持液层厚度，入射光波长和其它测量条件也不变，则在一定浓度范围内，所测得吸光度与溶液中待测物质的浓度成正比。因此，配制一系列已知的具有不同浓度的标准溶液，分别在选定波长处测其吸光度A，然后以标准溶液的浓度c为横坐标，以相应的吸光度A为纵坐标，绘制出A－c关系曲线。如果符合光的吸收定律