尿酸(ua) 酶比色法

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时间:2018-07-24

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1、项目尿酸(UA)方法酶比色法目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3.试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4.仪器5.操作6.计算7.操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8.参考值9.临床意义附录A:参数1.检测原理反应生成的醌亚胺在505nm波长有最大吸收,所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比,再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较,经过计算可求出血清中尿酸的含量。试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响,测定尿酸所用的酶反应如下:尿酸酶尿酸

2、+O2+2H2O------------尿囊素+CO2+2H2O2过氧化物酶H2O2+4-氨基安替比林+2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸---------------醌亚胺+H2O2.标本采集与处理2.1受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布,会

3、影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂:血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。2.4标本处理:血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。3.试剂3.1试剂:本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司UA试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:组成R1:R2=4:1(混合后溶液的浓度)R1:检测试剂1Good”S缓冲液0.1mmol/L3,5-DHBS1.2mmol/LR2:检测试

4、剂2URO≥500KU/LPOD≥5.0KU/L4-AAP1.10mmol/L尿酸标准液:590umol/L3.2尿酸校准血清:使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次:空白定标:每日需做试剂空白定标。全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的±2SD范围,需要全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性:原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后,在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22℃稳定28天,试剂应避免污染。试剂R1,R2颜色为无色,当试剂变色,按照试剂失效处理。多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期,复溶后-20

5、℃保存,可稳定一个月,只可冻融一次,避免反复冻融。参见校准血清说明书。试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期,开瓶后2-8℃储存避免污染,可稳定2个月。4.仪器KONELAB30型号仪器。性能:波长505nm,仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5.操作样品为血清或肝素抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附,附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作,见仪器操作规程。6.计算ΔA测定C=————×CoΔA标准式中:c——测定尿酸浓度,μmol/L;ΔA=A2-A1ΔA测定——标本管吸光度;ΔA标准——标准管吸光度;CO——校准血清尿酸浓

6、度,μmol/L;7.操作性能7.1精密度:批内CV≤8.3%,批间CV≤10.0%。7.2准确度:检测结果的相对不准确度≤±10%。7.3灵敏度:尿酸浓度为:330μmol/L时,显色吸光度为0.123~0.134。7.4可报告范围:样本:R1:R2=1:40:10时,测定上限为1180μmol/L。7.5特异性:测量值在给定值的95%-105%范围内。7.6干扰:内源性干扰物为Hb1000mg/ml、TG2000mg/ml、BIL30mg/ml、VitC300mg/ml对测试结果无明显影响。8.参考值男:210~430μmol/L;女:150~360μmol/L。

7、9.临床意义尿酸是核酸中嘌呤分解代谢的最终产物,由肾脏排泄,随尿液排出体外。肾脏疾病如急慢性肾炎、肾结石、痛风、以及体内核酸分解代谢过盛的疾病,如慢性白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等可使尿酸量增高;而恶性贫血及应用ACTH、皮质素、阿斯匹林等药物时,血中尿酸量下降。附录A:参数

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