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1、不同产地茯苓中茯苓酸含量的比较研究作者：赵英博,徐斌,昝俊峰,苏玮,王克勤,刘焱文【摘要】目的建立茯苓中茯苓酸含量的测定方法,比较9个不同产地茯苓中茯苓酸的含量,为评价不同产地茯苓的品质提供参考依据。方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),Kromasil100-5C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-0.4%乙酸(80∶20),流速1.0mL/min,检测波长242nm。结果茯苓酸在0.48～2.40μg范围内与其色谱峰面积呈良好线性关系,r＝0.9997,平均回收率99.96%,RSD＝1.85%。9个产地茯
2、苓中茯苓酸的含量有所差异。结论该方法简便、专属、稳定,可用于茯苓药材中茯苓酸的含量测定。【关键词】茯苓；茯苓酸；反相高效液相色谱法；含量测定Abstract：ObjectiveToestablishamethodfordeterminingthecontentofPachymicacidinPoriacocos,andcomparethecontentofPachymicacidofPoriacocosfromninedifferentareas,inordertoprovideabasistoevaluatethequalityofPoriacocos
3、fromdifferentareas.MethodsRP-HPLCmethodwasusedonKromasil100-5C18column(4.6mm×200mm,5μm),withacetonitrile-0.4%ethanoicacid(80∶20)asmobilephase,flowrateof1.0mL/min,columntemperatureat30℃,anddetection6wavelengthat242nm.ResultsPachymicacidshowedafinelinearrelationshipwiththepeakareas
4、between0.48～2.40μg(r＝0.9997).Theaveragerecoverywas99.96%withRSD＝1.85%.TherewasadifferenceinthecontentofPachymicacidinPoriacocosfromnineareas.ConclusionThemethodisprovedtobeconvinient,stable,andfeasibleforqualityassessmentofPachymicacidwhichisthemaineffectivecontentinPoriacocos.Ke
5、ywords：Poriacocos；Pachymicacid；RP-HPLC；contentdetermination茯苓为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核,具有利水消肿、渗湿、健脾、宁心的功效,为我国常用中药,是多种方药及中成药的原料,有“十药九茯苓”之说。以茯苓为原料配伍的中成药约有300多种[1]。茯苓主要含多糖、三萜酸类等化学成分,其中茯苓酸是其主要有效成分之一。2005年版《中华人民共和国药典》(一部)未收载茯苓的含量测定项。本试验采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对茯苓中茯苓酸进行了含量分析,建立了简便快捷、准确可靠的含量测定方法,进一步完善
6、了茯苓药材的质量控制标准。 1仪器与试药6Agilent1100液相色谱仪,紫外检测器,Agilent色谱工作站；KQ3200DE型超声波清洗仪；sartonus型电子天平(十万分之一)。茯苓酸对照品为本实验室自制,经面积归一化法测定后确认其纯度大于98%；茯苓药材由本课题组分别采自湖南、河南、四川、浙江、贵州、安徽、湖北、广州、福建9个地区,共9批,经湖北省中医药研究院王克勤教授鉴定为多孔菌科真菌茯苓。乙腈为色谱纯,水为重蒸馏水,其他试剂均为分析纯。 2方法及结果 2.1色谱条件参考文献[2]方法。色谱柱：Kromasil100-5C18(250
7、mm×4.6mm,5μm)；柱温：30℃；流动相：乙腈-0.4%乙酸(80∶20)；流速为1.0mL/min；检测波长：242nm。在上述色谱条件下能达到基线分离,HPLC色谱图见图1。 2.2对照品溶液的制备精密称取茯苓酸对照品2.40mg,置于10mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,得0.240mg/mL的茯苓酸对照品溶液。6 2.3供试品溶液的制备精密称取茯苓粗粉(过60目筛)约1.0g,置于50mL具塞锥型瓶中,加甲醇30mL,加塞称定,浸泡30min,超声90min,途中及结束时用甲醇补足减失的重量,冷却,过滤；用甲醇洗涤滤渣,洗液合并于滤液
8、中,置蒸发皿中水浴蒸干,残留物用甲醇定容至10mL容量瓶中,即得。 2.4线性
