人宫颈癌fhit基因的表达改变与hpv16感染的关系

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1、人宫颈癌FHIT基因的表达改变与HPV16感染的关系【摘要】目的探讨FHIT基因表达改变和HPV16感染与人宫颈癌发生的关系。方法采用反转录-巢式聚合酶链反应方法测定5种人宫颈癌细胞株(SiHa、HeLa、RJC-1、CS1213、C4-1)和58例宫颈癌组织与18例正常宫颈对照中FHITmRNA的表达；回收7例FHIT基因不同的转录扩增产物，纯化后进行DNA测序；PCR技术检测组织中HPV16型的感染状况。结果SiHa、HeLa和C4-1宫颈癌细胞中有FHIT基因转录异常;宫颈癌组织中39例(67.2%)存在

2、FHIT基因异常表达，显著高于正常对照组0例(0%)(P<0.05)；37例(63.8%)有HPV16感染，显著高于正常对照组1例(5.0%)(P<0.05)。宫颈癌组织中有HPV16感染患者的FHIT基因表达异常数(30/37)显著高于HPV16未感染的患者(9/21)，二者之间存在相关性(P<0.01)；FHIT基因的异常表达和HPV16的感染与患者的年龄、临床分期、肿瘤直径、病理分级及是否伴淋巴结转移无相关性(P>0.05)。序列分析发现FHIT基因转录本主要存在不同程度的外显子的

3、缺失，以第5位和第6位外显子的缺失为主，未见未知序列的插入和点突变。结论FHIT基因在人宫颈癌组织中的异常表达率明显增高，且与HPV16的感染有关，这些改变可能在人宫颈鳞癌的发生中起着重要作用。【关键词】宫颈癌；FHIT基因；基因缺失；人乳头瘤病毒(HPV)13　　ABSTRACT:ObjectiveToevaluatetherelationshipbetweenfragilehistidinetriad(FHIT)transcriptionabnormalitiesandHPV16infectionandhu

4、mancervicaltumorigenesis.MethodsTotalRNAfrom5cervicalcarcinomacelllines(SiHa,HeLa,RJC-1,CS1213andC4-1),58primarycervicalcancerspecimensand18normalcervicalepithelialtissueswereextractedandFHITtranscriptswerecharacterizedbyatwo-step(nested)reversetranscription

5、(RT)-PCR.ThesevenofthePCRproductswithdifferentsizewerepurifiedandsequenced.HPV16infectionwasassessedbyPCR.Results①TherewerealteredFHITtranscriptsinSiHa,HeLaandC4-1cells.AberrantFHITtranscriptsweredetectedin39outofthe58cervicalcancersamples(67.2%),butnoneouto

6、f18inthenormalcervixtissuespecimens(0%);HPV16infectionswereidentifiedin37ofthe58cervicalcancertissues(63.8%),but1inthe18normalcervicalepithelialtissues(5%),whichshowedasignificantdifferencebetweenthesetwogroups(P<0.05).②ThenumberofpartialdeletionsoftheFHI

7、TgeneinthegroupwithHPV16infection(29/37)wassignificantlyhigherthanthatinthegroupwithoutHPV16infection(9/21)andthecorrelationwasfoundbetweenaberrationofFHITtranscriptandHPV16infection.Therewasnoobviousdifferenceinage,stage,tumorsize,grade13andlymphnodemetasta

8、sisbetweenthegroupswithandwithoutFHITabnormalitiesandHPV16infection(P>0.05).③Theexon5andexon6weremainlydeletedinthealteredFHITtranscriptsandnoinsertionandpointmutationwerefoundbyDNAsequencing