人宫颈癌fhit基因的表达改变与hpv16感染的

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1、人宫颈癌FHIT基因的表达改变与HPV16感染的【摘要】目的探讨FHIT基因表达改变和HPV16感染与人宫颈癌发生的关系。方法采用反转录-巢式聚合酶链反应方法测定5种人宫颈癌细胞株(SiHa、HeLa、RJC-1、CS1213、C4-1)和58例宫颈癌组织与18例正常宫颈对照中FHITmRNA的表达；回收7例FHIT基因不同的转录扩增产物，纯化后进行DNA测序；PCR技术检测组织中HPV16型的感染状况。结果SiHa、HeLa和C4-1宫颈癌细胞中有FHIT基因转录异常;宫颈癌组织中39例(67.2%)存在FHIT基因异常表达，显著高于正常对照组0例(0%)(P<

2、;0.05)；37例(63.8%)有HPV16感染，显著高于正常对照组1例(5.0%)(P<0.05)。宫颈癌组织中有HPV16感染患者的FHIT基因表达异常数(30/37)显著高于HPV16未感染的患者(9/21)，二者之间存在相关性(P<0.01)；FHIT基因的异常表达和HPV16的感染与患者的年龄、临床分期、肿瘤直径、病理分级及是否伴淋巴结转移无相关性(P>0.05)。序列分析发现FHIT基因转录本主要存在不同程度的外显子的缺失，以第5位和第6位外显子的缺失为主，未见未知序列的插入和点突变。结论FHIT基因在人宫颈癌组织中的异常表达率明显增高

3、，且与HPV16的感染有关，这些改变可能在人宫颈鳞癌的发生中起着重要作用。【关键词】宫颈癌；FHIT基因；基因缺失；人乳头瘤病毒(HPV)　　ABSTRACT:ObjectiveToevaluatetherelationshipbetalitiesandHPV16infectionandhumancervicaltumorigenesis.MethodsTotalRNAfrom5cervicalcarcinomacelllines(SiHa,HeLa,RJC-1,CS1213andC4-1),58primarycervicalcancerspecimensand18n

4、ormalcervicalepithelialtissuesples(67.2%),butnoneoutof18inthenormalcervixtissuespecimens(0%);HPV16infectionsalcervicalepithelialtissues(5%),berofpartialdeletionsoftheFHITgeneinthegrouporsize,gradeandlymphnodemetastasisbetalitiesandHPV16infection(P>0.05).③Theexon5andexon6ainlydeletedi

5、nthealteredFHITtranscriptsandnoinsertionandpointmutationonincervicalcancersandorsuppressorgeneFHITandhighriskHPV16mayplayaveryimportantroleinhumancervicalcarcinogenesis.　　KEYanpapillomavirus16(HPV16)子宫颈癌是世界范围内女性第二位常见的恶性肿瘤，每年死亡人数超过27万［1］。研究表明子宫颈癌的发生与高危型HPV感染和宫颈组织内众多基因表达改变有关，包括HPV16和定位于染色

6、体3p14.2的脆性组氨酸三联体(fragilehistidinetriad,FHIT)基因等［2-3］。由于FHIT基因区域覆盖3p上的HPV16的整合位点，两者在子宫颈癌发生中的作用及其相互关系值得探讨［4］。本研究采用RT-PCR方法在宫颈鳞癌中检测FHIT基因的转录表达，并同时检测HPV16的感染情况，现将结果报道如下。　　1材料与方法　　1.1研究对象　　1.1.1细胞株　　5种宫颈癌细胞株(SiHa、HeLa、RJC-1、CS1213、C4-1)均由西安交通大学医学院第一附属医院实验医学中心提供，其中CS1213和RJC-1细胞为该中心实验室自建［5］。　

7、　1.1.2临床病例　　选择2003年9月至2004年5月间西安交通大学医学院第一附属医院妇产科和肿瘤科初诊初治的宫颈癌患者58例，年龄39-70岁，均无内外科合并症。病理类型均为鳞状细胞癌；临床分期［按国际妇产科联盟(FIGO)标准,2000年］：Ⅰ期18、Ⅱ期24例、Ⅲ-Ⅳ期16例；病理分级：Ⅰ级10例、Ⅱ级22例、Ⅲ级26例；有盆腔淋巴转移7例，无转移51例。正常对照18例为同期患良性子宫肌瘤或功能性子宫出血行全子宫切除术，术后宫颈组织病理检查报告为正常宫颈上皮，无其他疾病，年龄38-62岁。　　1.2研究方法　　1.2.1标本采集　　宫颈癌细