人参二醇皂苷对感染性休克大鼠血清心肌酶和心肌超微结构的影响

人参二醇皂苷对感染性休克大鼠血清心肌酶和心肌超微结构的影响

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1、人参二醇皂苷对感染性休克大鼠血清心肌酶和心肌超微结构的影响作者:孙晓霞崔新明王健春孙文伟王宜路萌萌【摘要】目的观察人参二醇皂苷(PDS)对感染性休克大鼠心肌酶和心肌细胞超微结构的影响。方法大鼠舌下静脉注射PDS进行预治疗,10min后注射细菌内毒素(LPS,5mg/kg)复制感染性休克模型。实验动物随机分为对照组;LPS组;地塞米松(LPS+Dex)组;人参二醇皂苷(LPS+PDS)组。颈动脉插管记录平均动脉压(MAP);分别于休克后2h和4h腹主动脉取血,测定天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量及电镜观察

2、心肌细胞超微结构的改变。结果注射LPS后,LPS组的MAP迅速下降,在低水平维持,LPS+Dex组和LPS+PDS组的MAP未见明显下降,优于模型组(P<0.01);注射LPS4h后LPS组的AST、CK、LDH均明显升高,LPS+Dex组和LPS+PDS组心肌酶含量显著低于LPS组(P<0.01)。结论PDS能够明显改善LPS休克大鼠的低血压状态,降低心肌酶活性,减轻心肌细胞超微结构的损伤程度。【关键词】地塞米松;内毒素;人参二醇皂苷;超微结构;心肌酶7 地塞米松(dexamethasone,Dex)作为免疫相关性疾病的主要治疗制

3、剂和抗炎药物广泛用于临床上各种休克的治疗。然而,应用Dex治疗休克有明显的副作用,从而减低了Dex治疗休克的安全性。人参二醇皂苷(PDS)是从人参中提取的天然有效成分,是人参总皂苷亚型中的四环三萜皂苷,毒性低、分子量小,易于通过血脑屏障。近年的研究表明,PDS具有降血脂、改善微循环、抗脂质过氧化反应、提高机体免疫力、预防感染和抗休克等多种生物学功能〔1~4〕,具有Dex无可比拟的优点。本实验建立了感染性休克动物模型,观察PDS对感染性休克大鼠心肌酶和心肌超微结构的影响,旨在探讨PDS对心肌的保护作用及其机制,为临床应用提供实验依据。  1材料与

4、方法  1.1试剂PDS(吉林大学白求恩医学院化学教研室提供),主要成分为Rb1、Rb2、Rb3等,纯度为92%。Dex注射液(天津药业集团新郑股份有限公司,批号030216),大肠杆菌内毒素(LPS,购于Sigma公司),血清型O111:B4,三者均用5%葡萄糖溶液配制。天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司生产,批号分别为020121、090121、130061)。  1.2实验动物与模型制备健康Wistar大鼠40只(吉林大学白求恩医学院动物室提供),体重(250±10

5、)g,雌雄不拘,随机分为对照组、LPS组、LPS+Dex组、LPS+PDS(457mg/kg)组,每组10只。实验动物水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉后,分离一侧颈总动脉插动脉插管,通过压力传感器连接RM6000型四导生理记录仪(日本光电)记录血压;待血压平稳后记录正常的心率、血压。实验前对照组和LPS组大鼠舌下静脉注射5%葡萄糖溶液5ml/kg,LPS+Dex组静注Dex(2mg/kg)葡萄糖溶液5ml/kg,LPS+PDS组静注PDS(45mg/kg)葡萄糖溶液5ml/kg。10min后除对照组外均静脉注射LPS(5mg/kg),

6、对照组静脉注射等量的葡萄糖溶液。以血压降到实验前基础血压的2/3时判断为休克状态〔5〕。分别于休克后2、4h腹主动脉取血离心10min(3000r/min),取血清检测AST、CK、LDH。  1.3观察指标用EOS880半自动生化分析仪(意大利)测定AST、CK、LDH含量。实验结束剪取心尖部1mm3心肌组织,于JEM1200EX型透射电子显微镜(日本)下观察心肌超微结构变化。  1.4统计学分析试验数据均以x±s表示,采用组间t检验进行统计处理。  2结果  2.1PDS对大鼠平均动脉血压(MAP)的影响正常对照组大鼠在实验过程中血压平

7、稳,MAP(16.39±1.96)kPa。给予LPS后,LPS组的MAP在1h内开始下降,并持续4h以上。LPS+Dex组和LPS+PDS组在4h内都能有效维持,并明显优于LPS组(P<0.01)。见表1。7  2.2PDS对LPS休克大鼠血清心肌酶含量的影响大鼠注射LPS休克后2~4h时LPS组的血清心肌酶水平与对照组比较明显升高(P<0.01),相应的LPS+Dex组和LPS+PDS(45mg/kg)组2~4h时血清心肌酶含量显著低于LPS组(P<0.01)。见表2。  2.3对心肌细胞超微结构的影响电镜观察显示模型组心肌

8、细胞超微结构改变明显,肌膜破损,肌原纤维水肿,间距增宽,部分肌丝断裂、溶解,排列紊乱;线粒体肿胀,嵴断裂,空泡化;肌浆网肿胀,核消失。LPS+Dex组

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