以phbv为支架构建组织工程化软骨

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1、以PHBV为支架构建组织工程化软骨作者：吴俊，孙俊英，李海燕，常江【关键词】组织工程;,,软骨细胞;,,支架；,,聚（羟基丁酸酯　　摘要：［目的］探讨聚（羟基丁酸酯羟基戊酸酯）（PHBV）多孔材料作为软骨组织工程支架的可行性以及体内外培养方式对软骨形成的影响。［方法］采用“压片-热处理-粒子析出”技术制备PHBV多孔支架。体外分离培养软骨细胞后接种到PHBV支架体外培养2周，期间扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况，然后与单纯PHBV支架同植入裸鼠皮下继续培养4、8周后取材，与体外培养至6、10周的细胞-支架复合物同行组织学观察。［结果］电镜观察示

2、软骨细胞在支架上黏附、增殖良好并能分泌细胞外基质；组织学观察示PHBV浅层有新生软骨组织形成，且皮下培养的软骨组织比体外培养的更为成熟。单纯PHBV支架皮下培养没有软骨组织形成。［结论］PHBV可以作为软骨组织工程支架材料，体内培养较体外更有利于组织工程化软骨的形成。关键词：组织工程;软骨细胞;支架；聚（羟基丁酸酯羟基戊酸酯）Abstract：［Objective］Toinvestigatethepossibilityofusingpoly（hydroxybutyratecohydroxyvalerate）（PHBV）as12scaffoldsf

3、orcartilagetissueengineeringandtocomparetheengineeredcartilagegeneratedinvitrowiththoseinnudemicemodles［Method］PHBVporousscaffoldswerefabricatedusingacompressionmoulding,thermalprocessingandsaltparticulateleachingmethodsChondrocytesisolatedfromarticularcartilagewereseededinto

4、porousPHBVscaffoldsAfterincubationfor2weeksinvitro,chondrocytesPHBVconstructswereimplantedsubcutaneouslyinthedorsumofathymicnudemiceControlgroupswereestablishedbysubcutaneousimplantationofPHBValoneTheimplantsharvestedafterinvivoincubationof4and8weeksandcellscaffoldsculturedin

5、vitrofor6and10weekswererespectivelyexaminedhistologicallyChondrocytesculturedfor3,7and14daysonthescaffoldswereexaminedbySEM［Result］SEMshowedthatchondrocytescouldaggregateandsynthesizeextracellularmatrixonPHBVscaffoldsBothspecimensharvestedfromnudemiceandthoseculturedinvitrode

6、monstratednewcartilageformation,whilecharacteristicsoftheengineeredcartilagegeneratedinvivoweremoretypicalThosefromcontrolgroupsshowednocartilageformation［Conclusion］PHBVcanbeusedasscaffoldsforcartilagetissueengineeringandnudemicemodleseemstofacilitatechondrogenesiscomparedwi

7、ththatinvitrosystem12Keywords：Tissueengineering;Chondrocyte;Scaffold;PHBV聚（羟基丁酸酯羟基戊酸酯）（PHBV）是原核微生物在碳、氧营养失衡的情况下，作为碳源和能源储存而合成的一类聚羟基链烷酸，具有良好的生物相容性和机械强度，且其由生物合成，不含有化工原料合成过程中可能产生的对人体有害的一些副产品〔1〕。因此近年来受到重视，并在骨组织工程中得到应用〔2〕。但作为软骨细胞支架的研究尚未有文献报道。为此作者自行备制PHBV多孔支架并接种软骨细胞进行体外和裸鼠皮下培养，探讨其作为软

8、骨细胞支架的可行性以及体内外培养方式对组织工程化软骨形成的影响。1材料与方法11实验材料和仪器DMEM培养基，胎牛血清，胰蛋白酶EDTA