以交联透明质酸钠为支架体外构建组织工程软骨

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1、以交联透明质酸钠为支架体外构建组织工程软骨刘少英1,陈建英1,陈倩倩1,刘 飞1,刘 霞1,朱希强1,凌沛学1,21山东省生物药物研究院,山东省生物药物重点实验室,山东省济南市 250101;2山东福瑞达医药集团公司,山东省黏膜与皮肤给药技术重点实验室,山东省济南市 250101Constructionoftissue-engineeredcartilagewithcross-linkedsodiumhyaluronateasscaffoldmaterialsinvitroLiuShao-ying1,ChenJian-ying1,ChenQian-qia

2、n1,LiuFei1,LiuXia1,ZhuXi-qiang1,LingPei-xue1,21InstituteofBiopharmaceuticalsofShandongProvince,ShandongProvincialKeyLaboratoryofBiologyandPharmacology,Jinan250101,ShandongProvince,China;2ShandongFredaPharmaceuticalGroupCompany,ShandongProvincialKeyLaboratoryofMucosalandTransderma

3、lDrugDeliveryTechnologies,Jinan250101,ShandongProvince,China摘要 背景:采用组织工程技术再生和重建软骨是目前修复软骨组织缺损效果最好、最有应用前景的方法。目的:以体外培养的软骨细胞和交联透明质酸钠为支架材料,开发一套体外构建组织工程软骨的完整方案。方法:分离新西兰兔膝关节软骨细胞,制成细胞悬液滴加于交联透明质酸钠支架上,体外复合培养21d,提取RNA进行RT-PCR检测,制备冰冻切片进行显微观察和免疫组织化学观察。结果与结论:软骨细胞接种于交联透明质酸钠支架材料后,可贴附于支架上生长,并且大量细

4、胞聚集成团,在支架材料的纤维间隙中生长或呈单层细胞附着于支架材料纤维。细胞-支架复合物表达软骨组织特异性蛋白聚糖基因和Ⅱ型胶原α1基因,以及软骨组织特异性蛋白Ⅱ型胶原蛋白,可维持软骨细胞表型。表明培养的细胞-支架复合物在体外培养可形成软骨细胞外基质,有望获得组织工程软骨组织。中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料;口腔生物材料;纳米材料;缓释材料;材料相容性;组织工程全文链接:关键词 : 生物材料; 软骨生物材料; 组织工程; 关节软骨; 支架材料; 软骨细胞; 分离培养; 免疫细胞化学; RT-PCR; 形态学观察; 交联透明质酸钠; 

5、体外;  Abstract:BACKGROUND:Tissueengineeringprovidesnewideasandapproachesforrepairofcartilagedefects. OBJECTIVE:Todevelopacompletesetofsolutionsforconstructionoftissueengineeredcartilageinvitro,withchondrocytesasseedcellsandcross-linkedsodiumhyaluronateasscaffoldmaterials.METHODS:N

6、ewZealandrabbitarticularchondrocyteswereisolated,counted,andthenculturedandpassagedtopreparecellsuspension.Toluidinebluestaining,RT-PCRandimmunocytochemistrywereexertedtoevaluatetheculturedcells.Chondrocyteswereseededandco-culturedwithcross-linkedsodiumhyaluronatescaffoldfor21day

7、s.Then,RNAwasisolatedforRT-PCR,andfrozensectionswerepreparedformorphologicalobservationandimmunohistochemistrystudy.RESULTSANDCONCLUSION:Thechondrocytescouldadheretothecross-linkedsodiumhyaluronatescaffoldandaggregate,growingbetweenfibersoradheringtothescaffoldinamonolayermanner.

8、Thetranscriptsofcartilagespecificaggreca

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