elisa联合甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体感染的效果分析

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1、ELISA联合甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体感染的效果分析作者：周亮，李杰，周松伟，陈志【关键词】梅毒;检测;酶联免疫吸附试验;甲苯胺红不加热血清试验梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA法)是公认的梅毒特异性抗体确证试验，但该方法难以实现“三化”自动化、标准化和规范化，资料也难以保存。目前血站和医院输血科检测梅毒螺旋体抗体多采用ELISA法。其灵敏度和特异性都较高，与TPPA法间差异无统计学意义[1]，可实现“三化”，资料也易保存。但ELISA法梅毒抗体阳性，尚不能判定是否为现症感染，不能为医生提供诊治依据。甲苯胺红不加热血清试验(TRUST法)存在着较大的漏检率[2]

2、，血站和医院输血科不单独应用于检测梅毒，但TRUST法检测为阳性可辅助判断为现症感染，能为医生提供诊治依据。现许多血站已同时采用ELISA和TRUST法对献血者进行初复检检测[3-5]，两方法互补，灵敏度和特异性同TPPA法，又发挥出了ELISA法的优点。　　我们自2004年至2005年用ELISA、TRUST、TPPA三种检测方法对385例梅毒阳性标本进行了比较。2006年至2008年又采用ELISA法联合TRUST法检测需输血者76656例，性病门诊就诊者355例，共8011例标本，现将结果报告如下。　　1材料与方法　　1.1标本来源　　主要有两个时期标本：2004年1月

3、至2005年12月无偿献血者、输血前检测者利用ELISA法检测显示梅毒阳性标本385例，同期到性病门诊就诊者87例，共472例标本;2006年1月至2008年6月在我院住院患者中需输血者7656例，同期到性病门诊就诊者355例，共8011例标本。　　1.2检测试剂　　ELISA试剂盒(北京现代高达公司提供);TRUST试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司提供);TPPA试剂盒(日本富士公司提供)。　　1.3仪器　　酶标仪(奥地利Anthos2010型)和洗板机(奥地利Anthosfluido型)，梅毒自动旋转仪(姜堰市天力医疗器械TL2000A型)。6　　1.4方法　　对2004

4、年至2005年的472例标本分别采用TRUST，ELISA，TPPA三种方法检测梅毒。检测所用试剂在有效期内使用，严格按照试剂操作说明书操作。　　对2006年至2008年的共8011例标本联合使用ELISA法和TRUST法检测梅毒。检测所用试剂在有效期内使用，严格按照试剂操作说明书操作。　　1.5统计学方法　　采用SPSS14.0软件统计数据，不同方法间的比较采用χ2检验，P<0.01，差异有统计学意义;P>0.05为差异无统计学意义。两种方法的检测结果采用配对χ2检验。　　2结果　　385例经ELISA检测显示阳性的标本再分别采用TRUST和TPPA法检测，结果

5、见表1。表1同时包含有同期性病门诊接受3种方法检测的87例就诊者标本的检测结果。表1梅毒3种检测方法的比较表28011例输血及性病门诊就诊者梅毒检测结果　　3讨论6　　梅毒螺旋体亦称苍白螺旋体(treponemapallidum,TP),是引起人类梅毒的病原体。在感染的所有阶段，梅毒患者能产生两类抗体。一类是抗TP抗体(15ku,17ku,47ku)，当补体存在时，可将螺旋体杀死或溶解，也能对吞噬细胞发挥调理作用，如47ku抗体等;另一类是抗心磷脂抗体，称反应素(reagin),能同生物组织中的脂质发生反应，反应素无保护作用，仅可用作梅毒血清学诊断。所以临床血清试验主要分为两

6、大类：一类为密螺旋体抗原血清学试验，另一类为非密螺旋体抗原血清学试验。通常将前者作为确认试验方法，如TPPA法与ELISA法，后者检测的抗体不是梅毒特异性抗体，一些其他疾病如结核、自身免疫性疾病、猩红热等也可出现阳性反应，加之其灵敏度和特异性也只在70%～80%[3],故认为TRUST法等并非理想的梅毒感染筛检试验,一般列为常规试验方法。　　TP抗体在梅毒潜伏期即产生。一期梅毒时增高，主要是IgM型;二期梅毒时达高峰，有IgG型、IgM型;三期梅毒略降低，主要是IgG型。该抗体在病程中免疫作用不大，病后也无预防再感染的作用，可在实验室被检测出来，具有很高的灵敏度和特异性，晚期

7、梅毒和治疗后仍保持阳性。反应素在一期梅毒阶段即增加，二期梅毒时达到高峰，三期梅毒时有部分会逐渐降低。治疗结束后，应定期复查。在治疗3个月至1年后血清学TRUST转阴者表示治愈，否则要继续治疗。6　　表1说明ELISA法与TPPA法检测结果间的差异无统计学意义，与国内许多报道观点一致[1，6，7]。　　表2显示ELISA法与TRUST法检测均阳性者225例，经TPPA法确证均为阳性，通过询问病史，观察症状，符合梅毒现症感染诊断，均给予药物治疗;ELISA阳性而TRUST阴性189例，表示曾经感染梅毒，经过